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斑点叉尾鮰肾脏细胞系建立与出血病病原学研究

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
缩略语表第14-16页
第一章 文献综述与研究目的及意义第16-43页
 1 淡水鱼类细胞培养及其应用第16-21页
   ·鱼类细胞的培养第16-18页
     ·培养方法第16-17页
     ·鱼类细胞培养现状第17-18页
   ·鱼类细胞系的主要应用第18-20页
     ·鱼类病毒学的研究第18-19页
     ·鱼类毒理学的研究第19页
     ·鱼类细胞疫苗的制备第19-20页
     ·鱼类免疫学的研究第20页
     ·鱼类肿瘤研究第20页
   ·小结第20-21页
 2 斑点叉尾鮰病毒病研究进展第21-27页
   ·CCVD的症状与流行病学第21-23页
   ·CCV的分子生物学特征第23-24页
   ·CCV的分离与检测方法第24-27页
     ·电镜技术第24页
     ·细胞培养技术第24-25页
     ·免疫学检测技术第25-26页
     ·分子生物学技术第26-27页
 3 水生呼肠孤病毒研究进展第27-34页
   ·前言第27页
   ·分类学第27-29页
   ·化特性第29-30页
   ·形态结构第30-31页
   ·水生动物呼肠孤病毒基因组及其编码的蛋白第31-32页
   ·基因组转录与翻译第32页
   ·病毒复制与细胞培养特性第32-33页
   ·致病机制以及引起的组织病理学变化第33页
   ·小结第33-34页
 4 水产疫苗研究进展第34-36页
   ·前言第34页
   ·疫苗发展历程第34-36页
     ·灭活疫苗第35页
     ·减毒疫苗第35-36页
     ·核酸疫苗第36页
     ·单位和基因工程疫苗第36页
 5 斑点叉尾鮰疫苗研究进展第36-42页
   ·灭活疫苗与亚单位疫苗第38-39页
     ·灭活疫苗第38页
     ·单位疫苗第38-39页
   ·减毒活疫苗第39-40页
   ·DNA疫苗第40-42页
 6 选题的目的与意义第42-43页
第二章 斑点叉尾鮰肾脏组织细胞系的建立及其生物学特性第43-57页
 1 前言第43-44页
 2 材料与方法第44-48页
   ·材料第44-45页
     ·实验鱼第44页
     ·试剂第44页
     ·耗料与器皿第44-45页
     ·仪器设备第45页
   ·实验方法第45-48页
     ·原代培养第45页
     ·传代培养第45-46页
     ·细胞最佳培养条件第46页
     ·细胞冻存与复苏后第46-47页
     ·细胞集落形成效率第47页
     ·染色体分析第47-48页
     ·28S rRNA基因序列测定和比对分析第48页
 3 结果第48-55页
   ·原代细胞培养第48-49页
   ·传代细胞培养第49-50页
   ·最佳培养条件第50-52页
     ·最佳培养基第50页
     ·最适培养温度第50-51页
     ·最适血清浓度第51-52页
   ·冷冻保存与复苏第52页
   ·细胞集落形成效率第52-53页
   ·染色体数目第53-54页
   ·28S rRNA基因序列分析与比对第54-55页
 4 讨论第55-57页
第三章 斑点叉尾鮰出血病的病原分离与鉴定第57-69页
 1 前言第57页
 2 材料与方法第57-61页
   ·材料第57-59页
     ·实验鱼第57-58页
     ·细胞系第58页
     ·试剂与耗材第58页
     ·仪器设备第58-59页
   ·实验方法第59-61页
     ·病鱼寄生虫检查与细菌分离第59页
     ·病鱼组织匀浆液的制备第59页
     ·细胞培养与病毒分离第59-60页
     ·超薄切片电镜观察第60页
     ·病毒基因组分析第60-61页
     ·人工感染试验第61页
 3 结果第61-67页
   ·病鱼症状第61页
   ·寄生虫检查与细菌分离第61-62页
   ·病毒培养与分离第62-64页
   ·电镜观察第64-65页
   ·病毒基因组分析第65-66页
     ·病毒核酸SDS-PAGE分析第65页
     ·病毒核酸类型鉴定第65-66页
   ·人工感染试验第66-67页
 4 讨论第67-69页
第四章 斑点叉尾蛔呼肠孤病毒理化特性与基因组分析第69-77页
 1 前言第69页
 2 材料与方法第69-72页
   ·材料第69-70页
     ·细胞系与病毒第69页
     ·试剂与耗材第69-70页
     ·仪器设备第70页
   ·实验方法第70-72页
     ·细胞培养与病毒培养第70页
     ·病毒理化特性第70-71页
     ·病毒基因组RNA提取第71页
     ·病毒基因组S1~S5节段的克隆与序列分析第71-72页
 3 结果第72-75页
   ·病毒的理化特性第72-73页
   ·病毒基因组S组基因序列分析第73-75页
 4 讨论第75-77页
第五章 斑点叉尾鮰出血病细胞培养灭活疫苗研究第77-85页
 1 前言第77页
 2 材料和方法第77-81页
   ·材料第77-78页
     ·细胞系与病毒第77页
     ·试剂与耗材第77-78页
     ·仪器设备第78页
   ·实验方法第78-81页
     ·CCK细胞培养第78页
     ·CCRV-730病毒制备第78页
     ·病毒滴度测定第78-79页
     ·CCRV-730病毒的最佳灭活方法第79页
     ·灭活疫苗的安全性检验第79-80页
     ·灭活疫苗的效果评估第80-81页
 3 结果第81-83页
   ·最佳灭活方法第81-82页
     ·最佳灭活剂量第81页
     ·最佳灭活时间第81-82页
   ·疫苗的安全性检验第82-83页
   ·疫苗效果评估第83页
     ·最佳免疫剂量第83页
     ·池塘养殖免疫保护实验第83页
 4 讨论第83-85页
主要研究结果第85-87页
参考文献第87-97页
附录第97-106页
 1 CCRV-730 S组(S7-S11)基因序列第97-100页
 2 CCRV-730 S组基因与其他水生呼肠孤病毒的比对图第100-104页
 3 CCRV-730 S组基因进化树第104-106页
在读期间发表的相关论文第106页
在读期间申请的专利第106-107页
致谢第107-108页

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