| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-18页 |
| ·研究目的及意义 | 第12页 |
| ·国内外研究现状 | 第12-17页 |
| ·口蹄疫病毒免疫学研究进展 | 第12-17页 |
| ·研究内容和方法 | 第17-18页 |
| 第二章 A 型口蹄疫病毒重组表达质粒的构建及在 BHK-21 细胞中的表达 | 第18-30页 |
| 摘要 | 第18页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·酶和主要试剂 | 第18页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第18-19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第20页 |
| ·RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR | 第21页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第21-22页 |
| ·重组克隆载体的构建 | 第22页 |
| ·重组克隆质粒的鉴定 | 第22-23页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·BHK -21 细胞的转染 | 第25页 |
| ·双抗体夹心 ELSA 检测 | 第25页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第25-26页 |
| ·电镜扫描 FMD 病毒空衣壳 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-28页 |
| ·目的基因的 PCR 鉴定结果 | 第26页 |
| ·重组表达载体 pcDNA3.1(+)/P12A -3C 的双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组表达载体 pcDNA3.1(+)/P12A -3C 的序列 | 第27页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 结果 | 第27页 |
| ·间接免疫荧光检测结果 | 第27-28页 |
| ·透射电镜观察 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 FMDV 抗原纳米微球的制备 | 第30-34页 |
| ·纳米微球 DNA 疫苗的制备 | 第30-31页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·质粒的大量提取 | 第30页 |
| ·吸附壳聚糖 PLGA 纳米微球的制备 | 第30-31页 |
| ·纳米微球 DNA 疫苗的制备 | 第31页 |
| ·灭活抗原纳米微球的制备 | 第31-32页 |
| ·抗原制备 | 第31-32页 |
| ·146S 抗原的冻干及黏膜佐剂的冻干 | 第32页 |
| ·146S 抗原与黏膜佐剂混合 | 第32页 |
| ·结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 同居接触感染实验 | 第34-37页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·方法 | 第34页 |
| ·同居感染实验 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-36页 |
| ·同居感染牛体温变化情况 | 第34-35页 |
| ·同居感染牛的临床病变情况 | 第35-36页 |
| ·同居感染牛 OP 液中病毒存在情况 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第五章 动物攻毒保护实验 | 第37-54页 |
| 摘要 | 第37页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·病毒、细胞和实验动物 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·动物免疫及攻毒保护效果 | 第37-39页 |
| ·动物分组及免疫 | 第37-38页 |
| ·动物实验与样品采集 | 第38-39页 |
| ·样品检测及保护率 | 第39-43页 |
| ·鼻液及唾液中 sIgA 的检测 | 第39页 |
| ·血液中 IgA 的检测 | 第39页 |
| ·血液中 IgG 的检测 | 第39-40页 |
| ·T 淋巴细胞亚群 CD4+、 CD8+的检测 | 第40页 |
| ·外周血淋巴细胞增殖实验 | 第40-41页 |
| ·同居攻毒后的临床检查 | 第41页 |
| ·同居攻毒后样品中病毒 RNA 的检测 | 第41-42页 |
| ·同居攻毒后各个实验组体温变化 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-52页 |
| ·鼻液、唾液中 SIgA 的水平 | 第43页 |
| ·血液 IgA 的水平 | 第43-44页 |
| ·血液中 IgG 的含量 | 第44页 |
| ·外周血 T 淋巴细胞亚群 CD4+、 CD8+的含量 | 第44-46页 |
| ·外周血淋巴细胞增殖 | 第46-48页 |
| ·同居感染结束后的发病情况 | 第48页 |
| ·同居感染结束各个实验组体温变化 | 第48-49页 |
| ·同居感染结束后样品中病毒 RNA 的含量 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第六章 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简历 | 第64页 |
