摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-15页 |
·β-丙氨酸 | 第8-12页 |
·β-丙氨酸简介 | 第8页 |
·β-丙氨酸的应用 | 第8-10页 |
·β-丙氨酸的生产方法 | 第10-12页 |
·L-天冬氨酸 α-脱羧酶的性质及应用 | 第12-13页 |
·L-天冬氨酸 α-脱羧酶的研究现状 | 第13-14页 |
·本课题的立题意义和研究内容 | 第14-15页 |
·立题意义 | 第14页 |
·本课题的主要研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
·实验材料 | 第15-16页 |
·菌株与质粒 | 第15页 |
·培养基 | 第15页 |
·工具酶及主要试剂 | 第15页 |
·主要仪器 | 第15-16页 |
·方法 | 第16-23页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第16页 |
·L-天冬氨酸 -脱羧酶的克隆 | 第16-17页 |
·重组大肠杆菌表达质粒的构建 | 第17-18页 |
·重组大肠杆菌的诱导表达及鉴定 | 第18页 |
·重组菌目的蛋白表达量和酶转化功能比较 | 第18-19页 |
·重组菌生长曲线的测定 | 第19页 |
·重组 L-天冬氨酸 α-脱羧酶的高效表达 | 第19-20页 |
·重组大肠杆菌 10 L 发酵罐生产重组蛋白 PanD | 第20页 |
·重组蛋白的纯化 | 第20页 |
·重组 PanD 脱羧酶酶学性质研究 | 第20-21页 |
·重组 PanD 转化生产β-丙氨酸反应过程的考察 | 第21-22页 |
·L-天冬氨酸 -脱羧酶酶活力的测定 | 第22页 |
·菌体生物量的测定 | 第22页 |
·蛋白含量的测定 | 第22页 |
·常见其他分子克隆操作 | 第22-23页 |
第三章 结果与讨论 | 第23-48页 |
·L-天冬氨酸 -脱羧酶基因在大肠杆菌中的克隆表达 | 第23-30页 |
·大肠杆菌 MG1655 和谷氨酸棒杆菌 ATCC13032 panD 基因的克隆 | 第23-24页 |
·重组质粒及重组菌的构建 | 第24-26页 |
·重组菌的诱导表达 | 第26-27页 |
·L-天冬氨酸 -脱羧酶 PanD 酶活力检测方法的确立 | 第27-28页 |
·两株重组菌目的蛋白表达量及酶转化功能比较 | 第28-30页 |
·重组 L-天冬氨酸 α-脱羧酶的高效表达 | 第30-37页 |
·重组菌株生长曲线的测定 | 第30-31页 |
·重组菌诱导条件的优化 | 第31-35页 |
·重组菌发酵罐诱导培养 | 第35-37页 |
·重组 L-天冬氨酸 α-脱羧酶的纯化及酶学性质研究 | 第37-42页 |
·重组 L-天冬氨酸 α-脱羧酶的纯化 | 第37-39页 |
·L-天冬氨酸α-脱羧酶酶学性质的研究 | 第39-42页 |
·重组酶转化过程的研究 | 第42-48页 |
·底物 L-天冬氨酸对重组 PanD 转化反应的影响 | 第42-44页 |
·产物β-丙氨酸对重组 PanD 转化反应的影响 | 第44页 |
·酶转化反应方式对转化率的影响 | 第44-48页 |
主要结论与展望 | 第48-50页 |
主要结论 | 第48页 |
展望 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |