| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-18页 |
| 英文缩略表 | 第18-19页 |
| 引言 | 第19-21页 |
| 第一章 猪高热病研究进展 | 第21-27页 |
| 1 流行概况 | 第21页 |
| 2 病原研究进展 | 第21-23页 |
| ·病原多重感染所致 | 第21-22页 |
| ·蓝耳病病毒变异株引起 | 第22页 |
| ·与猪瘟及其继发感染有关 | 第22-23页 |
| ·与猪流感病毒感染有关 | 第23页 |
| ·与未知病毒感染有关 | 第23页 |
| 3 防控措施 | 第23-26页 |
| ·加强管理,科学饲养 | 第23-24页 |
| ·做好免疫接种工作 | 第24页 |
| ·尽早确诊,及时控制 | 第24页 |
| ·加强监督,防止扩散 | 第24页 |
| ·加强消毒,净化环境 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-27页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒及疫苗研究进展 | 第27-69页 |
| 1 PRRSV的分子生物学 | 第27-29页 |
| ·病毒的分类地位及理化特性 | 第27页 |
| ·病毒基因组结构与病毒的复制 | 第27-29页 |
| ·PRRSV在我国的流行及分子生物学特点 | 第29页 |
| 2 PRRSV的编码蛋白及其功能 | 第29-36页 |
| ·病毒的非结构蛋白 | 第29-32页 |
| ·病毒的结构蛋白 | 第32-36页 |
| 3 PRRSV疫苗研究进展 | 第36-46页 |
| ·需要再检验的免疫学要素 | 第36-41页 |
| ·基于反向遗传技术的PRRSV疫苗研究进展 | 第41-44页 |
| ·新型PRRSV疫苗研发潜在策略和方法 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-69页 |
| 研究部分 | 第69-187页 |
| 第三章 中国部分地区猪痕病毒分子流行病学调查 | 第69-85页 |
| 摘要 | 第69-70页 |
| 1 材料与方法 | 第70-71页 |
| ·临床样品 | 第70页 |
| ·RNA提取,RT-套式PCR(RT-nPCR) | 第70页 |
| ·E2基因的克隆与测序 | 第70-71页 |
| ·进化分析 | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-79页 |
| ·猪瘟病料的采集、检测 | 第71-73页 |
| ·E2基因序列的同源性分析 | 第73-76页 |
| ·进化分析 | 第76-77页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第77-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| Abstract | 第84-85页 |
| 第四章 中国部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查 | 第85-105页 |
| 摘要 | 第85-86页 |
| 1 材料与方法 | 第86-89页 |
| ·病料采集 | 第86页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第86页 |
| ·主要仪器 | 第86-87页 |
| ·引物设计与合成 | 第87页 |
| ·病毒RNA的提取与cDNA的合成 | 第87-88页 |
| ·PCR扩增反应 | 第88页 |
| ·目的基因的克隆、测序 | 第88-89页 |
| ·数据分析 | 第89页 |
| 2 结果 | 第89-97页 |
| ·PRRSV感染检测结果 | 第89页 |
| ·ORF5基因的扩增和测序 | 第89-90页 |
| ·ORF5基因的同源性分析 | 第90页 |
| ·基于ORF5基因的进化分析 | 第90页 |
| ·ORF5编码氨基酸的序列分析 | 第90-97页 |
| 3 讨论 | 第97-100页 |
| 参考文献 | 第100-103页 |
| Abstract | 第103-105页 |
| 第五章 PRRSV中国流行株全基因组序列的测定与分析 | 第105-125页 |
| 摘要 | 第105-106页 |
| 1 材料与方法 | 第106-111页 |
| ·毒株、细胞和菌种 | 第106页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第106页 |
| ·主要仪器 | 第106页 |
| ·引物的设计及合成 | 第106-107页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第107页 |
| ·病毒cDNA的制备 | 第107-108页 |
| ·基因组片段的PCR扩增 | 第108-110页 |
| ·基因的克隆及序列测定 | 第110页 |
| ·基因组cDNA全序列拼接与分析 | 第110-111页 |
| 2 结果 | 第111-119页 |
| ·PRRSV JS0922株全长基因各片段的RT-PCR扩增 | 第111页 |
| ·PRRSV JS0922株各亚克隆片段的克隆 | 第111-112页 |
| ·PRRSV JS0922株全长基因组序列的拼接及分析 | 第112-113页 |
| ·PRRSV JS0922株基因组序列的分析比对 | 第113-119页 |
| 3 讨论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-123页 |
| Abstract | 第123-125页 |
| 第六章 猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白N蛋白N端非必需区的研究 | 第125-147页 |
| 摘要 | 第125-126页 |
| 1 材料与方法 | 第126-135页 |
| ·质粒、细胞和抗体 | 第126页 |
| ·主要试剂盒 | 第126页 |
| ·主要生化试剂 | 第126-127页 |
| ·主要实验仪器 | 第127页 |
| ·连接产物或质粒的转化 | 第127页 |
| ·质粒的抽提 | 第127-128页 |
| ·胶回收 | 第128页 |
| ·引物设计 | 第128-129页 |
| ·突变体克隆的构建 | 第129-130页 |
| ·突变体质粒转染细胞 | 第130-131页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第131页 |
| ·病毒传代及细胞上清盲传 | 第131-132页 |
| ·病毒上清RNA的提取 | 第132页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第132-133页 |
| ·病毒基因组及亚基因组的RT-PCR检测 | 第133-134页 |
| ·空斑形态与空斑纯化 | 第134-135页 |
| ·多步生长曲线 | 第135页 |
| 2 结果 | 第135-141页 |
| ·N蛋白N端缺失突变体的构建 | 第135-136页 |
| ·N端缺失突变病毒的拯救 | 第136-138页 |
| ·N端缺失突变病毒的遗传稳定性 | 第138-139页 |
| ·缺失突变病毒的体外生长特性 | 第139-141页 |
| 3 讨论 | 第141-143页 |
| 参考文献 | 第143-145页 |
| Abstract | 第145-147页 |
| 第七章 猪繁殖与呼吸综合征结构蛋白N蛋白标记毒株的构建及初步免疫实验研究 | 第147-169页 |
| 摘要 | 第147-148页 |
| 1 材料和方法 | 第148-154页 |
| ·质粒、抗体和细胞 | 第148页 |
| ·突变体全长cDNA克隆的构建 | 第148-150页 |
| ·转染和突变病毒的拯救 | 第150页 |
| ·N蛋白和7APMa多肽的间接免疫荧光分析 | 第150-151页 |
| ·生长动力学和空斑形态学分析 | 第151页 |
| ·RT-PCR和核酸测序检测体外遗传稳定性 | 第151页 |
| ·动物实验 | 第151页 |
| ·体温变化及临床症状 | 第151页 |
| ·qRT-PCR检测病毒血症 | 第151-152页 |
| ·PP-RSV特异性抗体的检测 | 第152页 |
| ·7APMa多肽特异性抗体的检测 | 第152-153页 |
| ·中和抗体测定 | 第153页 |
| ·细胞因子的测定 | 第153-154页 |
| 2 结果 | 第154-161页 |
| ·v7APMa突变病毒的拯救 | 第154-155页 |
| ·v7APMa标记毒株生长动力学和空斑形态学分析 | 第155-156页 |
| ·v7APMa的体外遗传稳定性 | 第156-157页 |
| ·猪体体温变化及临床表现 | 第157页 |
| ·病毒血症检测 | 第157-158页 |
| ·PRRSV特异性抗体检测 | 第158-159页 |
| ·7APMa多肽特异性抗体的检测 | 第159页 |
| ·中和抗体测定 | 第159-160页 |
| ·细胞因子的测定 | 第160-161页 |
| 3 讨论 | 第161-164页 |
| 参考文献 | 第164-168页 |
| Abstract | 第168-169页 |
| 第八章 猪繁殖与呼吸综合征病毒活载体疫苗候选株的构建及其病毒学特性的研究 | 第169-187页 |
| 摘要 | 第169-170页 |
| 1 材料与方法 | 第170-177页 |
| ·质粒、细胞和细菌 | 第170页 |
| ·抗体 | 第170页 |
| ·主要生化试剂 | 第170页 |
| ·主要实验仪器 | 第170页 |
| ·引物合成 | 第170-171页 |
| ·PCR产物回收 | 第171页 |
| ·平末端DNA片段连接 | 第171页 |
| ·转化 | 第171-172页 |
| ·质粒小量提取 | 第172页 |
| ·高浓度质粒提取 | 第172页 |
| ·SOE-PCR扩增DNA片段 | 第172-175页 |
| ·全长cDNA克隆的构建与鉴定 | 第175-176页 |
| ·细胞转染 | 第176页 |
| ·病毒上清RNA的提取及细胞总RNA的提取 | 第176页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第176页 |
| ·空斑形态分析 | 第176页 |
| ·多步生长曲线 | 第176页 |
| ·Northern blot分析 | 第176-177页 |
| 2 结果 | 第177-182页 |
| ·中间质粒的构建 | 第177页 |
| ·全长cDNA克隆构建 | 第177页 |
| ·病毒拯救结果 | 第177-178页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第178-179页 |
| ·嵌合病毒的病毒学特性 | 第179-181页 |
| ·嵌合病毒的亚基因组mRNA转录谱 | 第181-182页 |
| 3 讨论 | 第182-184页 |
| 参考文献 | 第184-186页 |
| Abstract | 第186-187页 |
| 全文总结 | 第187-189页 |
| 致谢 | 第189-191页 |
| 硕博期间论文发表情况 | 第191-192页 |
