目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
中英文缩略词表 | 第10-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-25页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征及相关细胞因子的研究进展 | 第11-25页 |
1 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) | 第11页 |
2 PRRSV病原特性 | 第11-12页 |
3 流行病学 | 第12-13页 |
4 PRRSV的致病机理 | 第13-19页 |
·PRRSV与巨噬细胞 | 第15-16页 |
·PRRSV对细胞因子的影响 | 第16-19页 |
·PRRSV对感染仔猪细胞因子的影响 | 第17页 |
·PRRSV对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响 | 第17-18页 |
·病毒基因变异与免疫逃避 | 第18-19页 |
5 本试验的目的与意义 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-25页 |
第二篇 试验研究 | 第25-63页 |
第二章 PRRSV对体外培养PAMs免疫相关因子基因表达的影响 | 第25-53页 |
摘要 | 第25页 |
Abstract | 第25-27页 |
1 材料与方法 | 第27-33页 |
·试验动物 | 第27页 |
·病毒 | 第27页 |
·主要试剂和仪器 | 第27页 |
·PAMs的获取及鉴定 | 第27-29页 |
·激光共聚焦显微镜检测PRRSV对PAMs的感染 | 第29页 |
·总RNA的提取和纯化 | 第29-30页 |
·总RNA的提取(用TRlzol提取试剂盒) | 第29-30页 |
·总RNA的定量和质检 | 第30页 |
·反转录 | 第30-31页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·SYBRGreen Ⅰ实时定量PCR | 第32-33页 |
·相对mRNA拷贝数的计算 | 第33页 |
·数据统计分析 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-49页 |
·PAMs分离纯化结果 | 第33-34页 |
·形态学检测结果 | 第33-34页 |
·酸性磷酸酶染色结果 | 第34页 |
·PAMs活力测定结果 | 第34页 |
·PRRSV感染PAMs的进程 | 第34-35页 |
·荧光定量RT-PCR的扩增曲线、溶解曲线和标准曲线 | 第35-44页 |
·PRRSV对PAMs中IL-2 mRNA表达的影响 | 第44页 |
·PRRSV对体外培养PAMs IL-6 mRNA表达的影响 | 第44-45页 |
·PRRSV对PAMs表达IL-8mRNA的影响 | 第45-46页 |
·PRRSV对PAMs表达IL-10 mRNA的影响 | 第46页 |
·PRRSV对PAMs表达TNF-a mRNA的影响 | 第46-47页 |
·PRRSV对PAMs表达MHC-1 mRNA的影响 | 第47-48页 |
·PRRSV对PAMs表达SLA-1mRNA的影响 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
第三章 PRRSV对体外培养PAMs分泌细胞因子的影响 | 第53-63页 |
摘要 | 第53页 |
Abstract | 第53-54页 |
1 材料与方法 | 第54-56页 |
·实验动物与病毒 | 第54页 |
·细胞上清液的获取 | 第54-55页 |
·主要试剂和仪器 | 第55页 |
·PAMs培养上清液中IL-6、IL-10、TNF-α的定量检测 | 第55-56页 |
·数据统计与处理方法 | 第56页 |
2 结果 | 第56-60页 |
·细胞因子ELISA检测的标准曲线 | 第56-57页 |
·PRRSV对细胞培养上清液中IL-6含量的影响 | 第57-58页 |
·PRRSV对PAMs培养上清液中IL-10含量的影响 | 第58-59页 |
·PRRSV对PAMs培养上清液中TNF-α含量的影响 | 第59-60页 |
3. 讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-63页 |
全文总结 | 第63-65页 |
致谢 | 第65页 |