致谢 | 第1-10页 |
缩略词列表 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-38页 |
1 蛋白质二硫键异构酶(PDI)的生物学基础 | 第15-21页 |
·蛋白质二硫键异构酶简介 | 第15-16页 |
·PDI的结构特点 | 第16-17页 |
·PDI的分子生物学功能 | 第17-19页 |
·植物组织中的热激蛋白及其在水稻耐逆性上的应用研究 | 第19-21页 |
2 稻米品质与淀粉合成代谢 | 第21-26页 |
·淀粉的化学组成及其与稻米品质的关系 | 第21-22页 |
·淀粉的生物合成途径及其重要关键酶 | 第22-24页 |
·淀粉合成代谢关键酶的重要同工型基因 | 第24-26页 |
3 RNA干扰技术 | 第26-30页 |
·RNAi的主要干扰机制 | 第27-28页 |
·RNAi的优点 | 第28-29页 |
·内含子发卡结构RNA干扰(ihpRNAi)的研究进展 | 第29-30页 |
·RNAi在作物品质改良研究中的应用 | 第30页 |
4 本研究的目的意义 | 第30-32页 |
参考文献 | 第32-38页 |
第二章 水稻蛋白二硫键异构酶基因沉默载体构建及其转基因后代的高温结实特性分析 | 第38-58页 |
·引言 | 第38-39页 |
·材料与方法 | 第39-47页 |
·试验材料及试剂 | 第39页 |
·水稻胚乳总RNA的提取纯化及cDNA的合成 | 第39-40页 |
·PDI基因RNAi目标区段的选择、扩增及其亚克隆 | 第40-42页 |
·RNAi表达载体pTCK303-RiOsPDI的构建 | 第42-43页 |
·农杆菌EHA105介导表达载体pTCK303-RiOsPDI的水稻遗传转化 | 第43-44页 |
·PDI基因沉默水稻植株的获得及其PCR检测 | 第44-45页 |
·转基因水稻植株T_1代的遗传分离鉴定 | 第45页 |
·转基因水稻T_2代PDI基因的表达水平分析 | 第45-46页 |
·转基因水稻T_2代的高温特性分析PDI基因表达的荧光定量PCR检测 | 第46页 |
·稻米表观直链淀粉及粗蛋白的检测分析 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-53页 |
·PDI基因片段的亚克隆及测序 | 第47-48页 |
·双元干扰表达载体pTCK303-RiOsPDI的构建 | 第48-49页 |
·RNAi表达载体pTCK303-RiOsPDI导入农杆菌及其遗传转化 | 第49-50页 |
·T_0代转基因植株的获得及其T_1代的分离鉴定 | 第50-51页 |
·转基因T_2代植株的农艺表现、高温结实特性与PDI基因荧光定量表达分析 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
第三章 蛋白二硫键异构酶基因的沉默与超表达对水稻苗期耐热性影响的生理特征 | 第58-71页 |
·引言 | 第58页 |
·材料与方法 | 第58-62页 |
·试验材料及试剂 | 第58页 |
·水稻胚乳总RNA的提取纯化及cDNA的合成 | 第58页 |
·PDI基因的克隆 | 第58-59页 |
·超表达载体pTCK303-OsPDI的构建 | 第59-60页 |
·农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化 | 第60页 |
·PDI基因超表达水稻植株的获得及其PCR检测 | 第60页 |
·PDI基因超表达和RNAi沉默转基因植株的苗期高温特性分析 | 第60-62页 |
·转基因植株苗期PDI及Bip基因表达的荧光定量PCR检测 | 第62页 |
·结果与分析 | 第62-67页 |
·PDI基因的克隆及超表达载体pTCK303-OsPDI的构建 | 第62-63页 |
·农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化及PDI基因超表达植株的获得 | 第63-64页 |
·PDI基因超表达和RNAi沉默后代的PDI及相关基因表达特性 | 第64-66页 |
·转基因材料中幼叶高温可溶性蛋白、脯氨酸及丙二醛含量差异分析 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-68页 |
·小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
第四章 水稻淀粉合成酶基因SSSⅠ和SSS Ⅲa的沉默及转基因后代苗期的耐热性分析 | 第71-82页 |
·引言 | 第71页 |
·材料与方法 | 第71-74页 |
·试验材料及试剂 | 第71页 |
·水稻胚乳总RNA的提取纯化及cDNA的合成 | 第71页 |
·SSSⅠ和SSSⅢa基因RNAi目标区段的选择、扩增及其亚克隆 | 第71-72页 |
·RNAi表达载体的构建及农杆菌介导的遗传转化 | 第72页 |
·转基因水稻植株的获得及其PCR检测鉴定 | 第72-73页 |
·RNAi沉默转基因植株的苗期高温特性分析 | 第73-74页 |
·结果与分析 | 第74-79页 |
·淀粉合成酶SSSⅠ和SSSⅢa基因的亚克隆 | 第74-75页 |
·RNAi双元干扰表达表达载体的构建 | 第75-76页 |
·RNAi表达载体导入农杆菌及农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化 | 第76页 |
·转基因T_0代植株的获得及其PCR鉴定 | 第76-77页 |
·RNAi沉默转基因后代淀粉合成酶相关基因的苗期高温特性分析 | 第77-79页 |
·讨论 | 第79-80页 |
·小结 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-82页 |
第五章 研究展望 | 第82-84页 |
附录 | 第84页 |