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蛋白二硫键异构酶和淀粉合成酶基因沉默对水稻耐热及结实特性的影响

致谢第1-10页
缩略词列表第10-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-15页
第一章 文献综述第15-38页
 1 蛋白质二硫键异构酶(PDI)的生物学基础第15-21页
   ·蛋白质二硫键异构酶简介第15-16页
   ·PDI的结构特点第16-17页
   ·PDI的分子生物学功能第17-19页
   ·植物组织中的热激蛋白及其在水稻耐逆性上的应用研究第19-21页
 2 稻米品质与淀粉合成代谢第21-26页
   ·淀粉的化学组成及其与稻米品质的关系第21-22页
   ·淀粉的生物合成途径及其重要关键酶第22-24页
   ·淀粉合成代谢关键酶的重要同工型基因第24-26页
 3 RNA干扰技术第26-30页
   ·RNAi的主要干扰机制第27-28页
   ·RNAi的优点第28-29页
   ·内含子发卡结构RNA干扰(ihpRNAi)的研究进展第29-30页
   ·RNAi在作物品质改良研究中的应用第30页
 4 本研究的目的意义第30-32页
 参考文献第32-38页
第二章 水稻蛋白二硫键异构酶基因沉默载体构建及其转基因后代的高温结实特性分析第38-58页
   ·引言第38-39页
   ·材料与方法第39-47页
     ·试验材料及试剂第39页
     ·水稻胚乳总RNA的提取纯化及cDNA的合成第39-40页
     ·PDI基因RNAi目标区段的选择、扩增及其亚克隆第40-42页
     ·RNAi表达载体pTCK303-RiOsPDI的构建第42-43页
     ·农杆菌EHA105介导表达载体pTCK303-RiOsPDI的水稻遗传转化第43-44页
     ·PDI基因沉默水稻植株的获得及其PCR检测第44-45页
     ·转基因水稻植株T_1代的遗传分离鉴定第45页
     ·转基因水稻T_2代PDI基因的表达水平分析第45-46页
     ·转基因水稻T_2代的高温特性分析PDI基因表达的荧光定量PCR检测第46页
     ·稻米表观直链淀粉及粗蛋白的检测分析第46-47页
   ·结果与分析第47-53页
     ·PDI基因片段的亚克隆及测序第47-48页
     ·双元干扰表达载体pTCK303-RiOsPDI的构建第48-49页
     ·RNAi表达载体pTCK303-RiOsPDI导入农杆菌及其遗传转化第49-50页
     ·T_0代转基因植株的获得及其T_1代的分离鉴定第50-51页
     ·转基因T_2代植株的农艺表现、高温结实特性与PDI基因荧光定量表达分析第51-53页
   ·讨论第53-55页
   ·小结第55-56页
 参考文献第56-58页
第三章 蛋白二硫键异构酶基因的沉默与超表达对水稻苗期耐热性影响的生理特征第58-71页
   ·引言第58页
   ·材料与方法第58-62页
     ·试验材料及试剂第58页
     ·水稻胚乳总RNA的提取纯化及cDNA的合成第58页
     ·PDI基因的克隆第58-59页
     ·超表达载体pTCK303-OsPDI的构建第59-60页
     ·农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化第60页
     ·PDI基因超表达水稻植株的获得及其PCR检测第60页
     ·PDI基因超表达和RNAi沉默转基因植株的苗期高温特性分析第60-62页
     ·转基因植株苗期PDI及Bip基因表达的荧光定量PCR检测第62页
   ·结果与分析第62-67页
     ·PDI基因的克隆及超表达载体pTCK303-OsPDI的构建第62-63页
     ·农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化及PDI基因超表达植株的获得第63-64页
     ·PDI基因超表达和RNAi沉默后代的PDI及相关基因表达特性第64-66页
     ·转基因材料中幼叶高温可溶性蛋白、脯氨酸及丙二醛含量差异分析第66-67页
   ·讨论第67-68页
   ·小结第68-69页
 参考文献第69-71页
第四章 水稻淀粉合成酶基因SSSⅠ和SSS Ⅲa的沉默及转基因后代苗期的耐热性分析第71-82页
   ·引言第71页
   ·材料与方法第71-74页
     ·试验材料及试剂第71页
     ·水稻胚乳总RNA的提取纯化及cDNA的合成第71页
     ·SSSⅠ和SSSⅢa基因RNAi目标区段的选择、扩增及其亚克隆第71-72页
     ·RNAi表达载体的构建及农杆菌介导的遗传转化第72页
     ·转基因水稻植株的获得及其PCR检测鉴定第72-73页
     ·RNAi沉默转基因植株的苗期高温特性分析第73-74页
   ·结果与分析第74-79页
     ·淀粉合成酶SSSⅠ和SSSⅢa基因的亚克隆第74-75页
     ·RNAi双元干扰表达表达载体的构建第75-76页
     ·RNAi表达载体导入农杆菌及农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化第76页
     ·转基因T_0代植株的获得及其PCR鉴定第76-77页
     ·RNAi沉默转基因后代淀粉合成酶相关基因的苗期高温特性分析第77-79页
   ·讨论第79-80页
   ·小结第80-81页
 参考文献第81-82页
第五章 研究展望第82-84页
附录第84页

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