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黄单胞菌效应蛋白AvrAC调节植物先天免疫的分子机制

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第1章 引言第10-32页
   ·植物先天免疫反应第10-20页
     ·病原物的 PAMPs 和植物的 PRRs第10-13页
     ·PAMPs 激活的免疫信号通路第13-16页
     ·细菌的 Ⅲ 型分泌系统第16-18页
     ·效应蛋白诱导的免疫反应第18-20页
   ·效应蛋白抑制宿主免疫反应的机理第20-27页
     ·PTI 受体类激酶是效应蛋白的毒性靶标第21-22页
     ·效应蛋白调节 MAPK 信号通路发挥毒性第22-23页
     ·效应蛋白抑制植物的 ETI第23页
     ·效应蛋白作用于植物新的免疫组分第23-25页
     ·效应蛋白调节宿主基因转录第25-27页
   ·病原细菌和寄主植物的共进化第27-28页
   ·Xcc 和寄主植物的相互作用第28-31页
   ·本文的研究目的和主要研究内容第31-32页
第2章 实验材料与方法第32-54页
   ·实验材料第32-37页
     ·植物材料和菌株第32页
     ·质粒载体第32页
     ·药品和试剂第32-37页
   ·实验方法第37-54页
     ·载体构建第37-38页
     ·Xcc8004 基因组 DNA 提取第38页
     ·三亲接合法敲除 Xcc 菌株的 avrAC 基因第38-39页
     ·植物培养与转化第39-40页
     ·拟南芥 RNA 提取和 RT-PCR第40-41页
     ·细菌生长和竞争指数分析第41页
     ·超敏反应测试第41-42页
     ·CyaA 分泌分析第42页
     ·氯化铯密度梯度离心大量提取质粒第42-43页
     ·原生质体转化和蛋白提取第43-44页
     ·Bradford 法测定蛋白质浓度第44页
     ·荧光素酶双报告系统分析第44-45页
     ·活性氧测定第45页
     ·MAPK 激酶活性分析第45页
     ·烟草叶片瞬时表达提取蛋白第45-46页
     ·免疫共沉淀分析第46页
     ·His 融合蛋白的原核表达纯化第46-48页
     ·GST 融合蛋白的原核表达与纯化第48-49页
     ·GST pull-down 验证蛋白间相互作用第49页
     ·体外激酶活性检测第49页
     ·体外尿苷单磷酸化分析第49页
     ·BIK1 的磷酸化和迁移分析第49-50页
     ·GST-AvrAC 的蛋白分子量测定第50页
     ·串联质谱鉴定 UMP 和磷酸化修饰位点第50-51页
     ·诱饵蛋白的酵母转化第51-52页
     ·诱饵蛋白的自激活鉴定第52页
     ·酵母双杂交筛选 AvrAC 互作蛋白第52页
     ·提取酵母质粒鉴定互作基因第52-54页
第3章 AvrAC 调节植物先天免疫的分子机制第54-92页
   ·引言第54-55页
   ·实验结果第55-90页
     ·AvrAC 可以有效抑制植物 PTI第55-57页
     ·AvrAC 特异性抑制 RPM1 介导的 ETI第57-60页
     ·AvrAC 抑制在植物 PTI 信号通路上游第60-62页
     ·AvrAC 特异性与 BIK1 和 RIPK 相互作用第62-64页
     ·AvrAC 并不是一个 AMP 转移酶第64-66页
     ·AvrAC 是一个 UMP 转移酶第66-69页
     ·AvrAC 修饰 BIK1 和 RIPK 抑制其激酶活性第69-75页
     ·AvrAC 各结构域的功能第75-80页
     ·AvrAC 在拟南芥上的毒性功能依赖于 BIK1第80-82页
     ·AvrAC 在植物细胞中可以被磷酸化第82-84页
     ·AvrAC 在 Col-0 维管束中可以激活 ETI第84-85页
     ·AvrAC 激活的 ETI 部分依赖于 RAR1 和 EDS1第85-86页
     ·AvrAC 能够和细胞自噬相关蛋白直接互作第86-90页
   ·结论第90-92页
第4章 讨论和展望第92-97页
   ·讨论第92-95页
   ·工作展望第95-97页
参考文献第97-110页
致谢第110-112页
附录 A 论文中所用引物列表第112-114页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第114页

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