摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
第1章 引言 | 第10-32页 |
·植物先天免疫反应 | 第10-20页 |
·病原物的 PAMPs 和植物的 PRRs | 第10-13页 |
·PAMPs 激活的免疫信号通路 | 第13-16页 |
·细菌的 Ⅲ 型分泌系统 | 第16-18页 |
·效应蛋白诱导的免疫反应 | 第18-20页 |
·效应蛋白抑制宿主免疫反应的机理 | 第20-27页 |
·PTI 受体类激酶是效应蛋白的毒性靶标 | 第21-22页 |
·效应蛋白调节 MAPK 信号通路发挥毒性 | 第22-23页 |
·效应蛋白抑制植物的 ETI | 第23页 |
·效应蛋白作用于植物新的免疫组分 | 第23-25页 |
·效应蛋白调节宿主基因转录 | 第25-27页 |
·病原细菌和寄主植物的共进化 | 第27-28页 |
·Xcc 和寄主植物的相互作用 | 第28-31页 |
·本文的研究目的和主要研究内容 | 第31-32页 |
第2章 实验材料与方法 | 第32-54页 |
·实验材料 | 第32-37页 |
·植物材料和菌株 | 第32页 |
·质粒载体 | 第32页 |
·药品和试剂 | 第32-37页 |
·实验方法 | 第37-54页 |
·载体构建 | 第37-38页 |
·Xcc8004 基因组 DNA 提取 | 第38页 |
·三亲接合法敲除 Xcc 菌株的 avrAC 基因 | 第38-39页 |
·植物培养与转化 | 第39-40页 |
·拟南芥 RNA 提取和 RT-PCR | 第40-41页 |
·细菌生长和竞争指数分析 | 第41页 |
·超敏反应测试 | 第41-42页 |
·CyaA 分泌分析 | 第42页 |
·氯化铯密度梯度离心大量提取质粒 | 第42-43页 |
·原生质体转化和蛋白提取 | 第43-44页 |
·Bradford 法测定蛋白质浓度 | 第44页 |
·荧光素酶双报告系统分析 | 第44-45页 |
·活性氧测定 | 第45页 |
·MAPK 激酶活性分析 | 第45页 |
·烟草叶片瞬时表达提取蛋白 | 第45-46页 |
·免疫共沉淀分析 | 第46页 |
·His 融合蛋白的原核表达纯化 | 第46-48页 |
·GST 融合蛋白的原核表达与纯化 | 第48-49页 |
·GST pull-down 验证蛋白间相互作用 | 第49页 |
·体外激酶活性检测 | 第49页 |
·体外尿苷单磷酸化分析 | 第49页 |
·BIK1 的磷酸化和迁移分析 | 第49-50页 |
·GST-AvrAC 的蛋白分子量测定 | 第50页 |
·串联质谱鉴定 UMP 和磷酸化修饰位点 | 第50-51页 |
·诱饵蛋白的酵母转化 | 第51-52页 |
·诱饵蛋白的自激活鉴定 | 第52页 |
·酵母双杂交筛选 AvrAC 互作蛋白 | 第52页 |
·提取酵母质粒鉴定互作基因 | 第52-54页 |
第3章 AvrAC 调节植物先天免疫的分子机制 | 第54-92页 |
·引言 | 第54-55页 |
·实验结果 | 第55-90页 |
·AvrAC 可以有效抑制植物 PTI | 第55-57页 |
·AvrAC 特异性抑制 RPM1 介导的 ETI | 第57-60页 |
·AvrAC 抑制在植物 PTI 信号通路上游 | 第60-62页 |
·AvrAC 特异性与 BIK1 和 RIPK 相互作用 | 第62-64页 |
·AvrAC 并不是一个 AMP 转移酶 | 第64-66页 |
·AvrAC 是一个 UMP 转移酶 | 第66-69页 |
·AvrAC 修饰 BIK1 和 RIPK 抑制其激酶活性 | 第69-75页 |
·AvrAC 各结构域的功能 | 第75-80页 |
·AvrAC 在拟南芥上的毒性功能依赖于 BIK1 | 第80-82页 |
·AvrAC 在植物细胞中可以被磷酸化 | 第82-84页 |
·AvrAC 在 Col-0 维管束中可以激活 ETI | 第84-85页 |
·AvrAC 激活的 ETI 部分依赖于 RAR1 和 EDS1 | 第85-86页 |
·AvrAC 能够和细胞自噬相关蛋白直接互作 | 第86-90页 |
·结论 | 第90-92页 |
第4章 讨论和展望 | 第92-97页 |
·讨论 | 第92-95页 |
·工作展望 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-110页 |
致谢 | 第110-112页 |
附录 A 论文中所用引物列表 | 第112-114页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第114页 |