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睾丸支持细胞促进骨髓间充质干细胞分化的培养特性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第1章 综述第12-23页
   ·支持细胞的发现第12页
   ·支持细胞的结构特点第12页
   ·支持细胞的功能第12-14页
     ·支持细胞的分泌功能第12-13页
     ·支持细胞作用于生精细胞第13页
     ·支持细胞的免疫豁免功能第13-14页
   ·支持细胞的研究进展与应用第14-17页
     ·支持细胞的免疫豁免功能与器官移植的应用第14页
     ·支持细胞促进细胞生长的作用研究第14-16页
     ·支持细胞骨架作用的研究第16页
     ·支持细胞的紧密动力学研究第16-17页
   ·骨髓间充质干细胞的简介第17页
   ·骨髓间充质干细胞的生物学特征第17-18页
     ·骨髓间充质干细胞的形态学特征第17页
     ·骨髓间充质干细胞的表面标记物第17-18页
     ·骨髓间充质干细胞的增殖能力第18页
     ·骨髓间充质干细胞的分化潜能第18页
     ·骨髓间充质干细胞的分泌功能第18页
   ·骨髓间充质干细胞的研究进展与临床应用第18-22页
     ·骨髓间充质干细胞对创伤愈合的作用第19页
     ·骨髓间充质干细胞在骨修复中的应用第19页
     ·骨髓间充质干细胞在软骨修复中的应用第19-20页
     ·骨髓间充质干细胞在肺上皮修复中的应用第20页
     ·骨髓间充质干细胞对肝脏修复的作用第20页
     ·骨髓间充质干细胞对心肌修复作用的研究第20-21页
     ·骨髓间充质干细胞的体外大规模培养的研究第21-22页
   ·本论文的研究意义与内容第22-23页
第2章 支持细胞的分离鉴定与体外扩大培养第23-35页
   ·前言第23页
   ·实验材料与实验方法第23-26页
     ·实验材料与试剂第23-24页
     ·原代支持细胞的分离第24-25页
     ·支持细胞的传代培养与生长参数分析第25页
     ·苏木精伊红染色鉴定支持细胞第25页
     ·电子扫描显微镜鉴定支持细胞第25页
     ·支持细胞的优化培养第25-26页
     ·支持细胞的扩大培养第26页
     ·支持细胞扩大培养的代谢分析第26页
   ·结果与讨论第26-33页
     ·支持细胞的分离与鉴定第26-27页
     ·培养条件对支持细胞增殖的影响第27-29页
       ·不同基础培养基对支持细胞增殖的影响第27-28页
       ·不同浓度的胎牛血清(FBS)对支持细胞增殖的影响第28-29页
     ·转瓶微载体对支持细胞体外扩大培养的作用第29-33页
       ·细胞接种密度对支持细胞体外扩增的影响第29-30页
       ·微载体密度对支持细胞体外扩增的影响第30-31页
       ·转速对微载体培养支持细胞的影响第31页
       ·微载体培养支持细胞的代谢分析第31-32页
       ·微载体培养支持细胞的显微观察第32-33页
   ·小结与讨论第33-35页
第3章 骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定第35-41页
   ·前言第35页
   ·实验材料与实验方法第35-37页
     ·实验材料与试剂第35-36页
     ·骨髓间充质干细胞的分离培养第36页
     ·流式细胞术鉴定骨髓间充质干细胞第36页
     ·不同血清浓度的骨髓间充质干细胞培养第36-37页
   ·结果与讨论第37-39页
     ·骨髓间充质干细胞的分离培养第37页
     ·流式细胞术鉴定骨髓间充质干细胞的表面标记物第37-38页
     ·不同血清浓度对bmMSC增殖的影响第38-39页
   ·小结与讨论第39-41页
第4章 支持细胞促进骨髓间充质干细胞分化的特性第41-59页
   ·前言第41页
   ·实验材料与实验方法第41-48页
     ·材料与试剂第41-43页
     ·制备支持细胞的无血清条件培养基(Condition Medium,CM)第43页
     ·支持细胞促进骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化第43页
     ·甲苯胺蓝染色法鉴定bmMSCs的成软骨分化第43页
     ·番红花O-亮绿染色法鉴定bmMSCs的成软骨分化第43页
     ·Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定bmMSCs的成软骨分化第43-44页
     ·总RNA的提取与RT-PCR检测成软骨分化相关基因的表达第44-45页
     ·支持细胞促进骨髓间充质干细胞成骨细胞分化第45页
     ·碱性磷酸酶(ALP)染色法鉴定bmMSCs的成骨分化第45页
     ·茜素红染色法鉴定bmMSCs的成骨分化第45页
     ·Ⅰ型胶原免疫组化染色鉴定bmMSCs的成软骨分化第45-46页
     ·总RNA的提取与RT-PCR检测成骨分化相关基因的表达第46-47页
     ·Western-blot检测bmMSCs定向分化的信号通路磷酸化蛋白第47-48页
   ·结果与讨论第48-57页
     ·甲苯胺蓝染色法鉴定bmMSCs的成软骨分化第48-49页
     ·番红花O-亮绿染色法鉴定bmMSCs的成软骨分化第49页
     ·Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定bmMSCs的成软骨分化第49-50页
     ·RT-PCR检测成软骨相关基因的表达第50-52页
     ·碱性磷酸酶(ALP)染色法鉴定bmMSCs的成骨分化第52页
     ·茜素红染色法鉴定bmMSCs的成骨分化第52页
     ·Ⅰ型胶原免疫组化染色鉴定bmMSCs的成软骨分化第52-53页
     ·RT-PCR检测成软骨相关基因的表达第53-55页
     ·Western-blot检测bmMSCs定向分化的信号通路磷酸化蛋白第55-57页
   ·小结与讨论第57-59页
第5章 生物反应器微载体培养扩增骨髓间充质干细胞第59-71页
   ·前言第59页
   ·实验材料与实验方法第59-62页
     ·实验材料与试剂第59-60页
     ·转瓶微载体培养骨髓间充质干细胞第60页
     ·1.5L反应器扩大培养骨髓间充质干细胞第60-61页
     ·反应器培养bmMSCs的代谢分析第61页
     ·流式细胞术检测细胞的表面标记物第61页
     ·骨髓间充质干细胞成软骨与成骨诱导分化第61-62页
   ·结果与讨论第62-70页
     ·接种密度与搅拌速率对细胞增殖的影响第62-63页
     ·搅拌式反应器扩大培养骨髓间充质干细胞第63-67页
     ·反应器培养bmMSCs的代谢分析第67-69页
     ·流式细胞术鉴定骨髓间充质干细胞的表面标记第69页
     ·骨髓间充质干细胞成软骨与成骨诱导分化第69-70页
   ·小结与讨论第70-71页
第6章 总结与展望第71-73页
   ·总结第71-72页
   ·展望第72-73页
参考文献第73-81页
致谢第81页

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