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慢病毒载体介导的绿色荧光蛋白转基因标记与猪嵌合体制作研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-19页
   ·嵌合体研究简史第12页
   ·猪的嵌合体研究第12页
   ·嵌合体的制作方法第12-14页
     ·聚合法第13页
     ·注射法第13-14页
   ·嵌合体的鉴定第14-15页
     ·色素分析第14页
     ·同功酶法第14页
     ·绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)第14页
     ·可变数目串联重复(variable number tandem re-peats,VNTR)第14页
     ·短串联重复序列(short tandem repeats,STR)第14-15页
     ·单核苷酸多态性第15页
     ·实时荧光定量PCR技术第15页
   ·嵌合体技术应用前景第15-16页
     ·发育生物学领域第15-16页
     ·医学领域第16页
   ·诱导性多潜能干细胞研究进展第16-17页
     ·猪iPS嵌合研究进展第17页
     ·iPS细胞应用前景第17页
   ·慢病毒载体法的发展第17-18页
     ·慢病毒载体特点第17-18页
     ·慢病毒制备转基因动物研究概述第18页
   ·研究的目的和意义第18-19页
2 材料与方法第19-25页
   ·实验材料第19-20页
     ·猪卵巢第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要器材第19页
     ·iPS供核细胞第19-20页
     ·实验动物第20页
     ·卵母细胞及胚胎培养相关试剂第20页
   ·实验方法第20-25页
     ·卵母细胞成熟培养第20-21页
     ·慢病毒的稀释与保存第21页
     ·精子的采集和精液保存第21页
     ·卵母细胞体外受精(IVF)第21页
     ·慢病毒注射第21页
     ·凹窝聚合第21页
     ·胚胎染色和囊胚细胞计数第21-22页
     ·嵌合胚胎的鉴定第22页
     ·注射用的细胞准备第22页
     ·猪的发情观察和受体移植第22页
     ·组织切片HE染色第22-23页
     ·基因组DNA提取第23-24页
     ·统计分析第24-25页
3 结果与分析第25-37页
   ·慢病毒感染制备转基因胚胎第25-28页
     ·慢病毒感染1-细胞期胚胎第25-26页
     ·慢病毒感染2-细胞期胚胎第26-28页
   ·同时期聚合胚胎的研究第28-29页
   ·iPS细胞嵌合不同时期胚胎能力的研究第29-31页
   ·两株iPS细胞的嵌合能力的比较第31-32页
   ·iPS细胞嵌合胚胎受体猪移植第32-37页
     ·流产胎儿后的胎盘分析第34-37页
4 讨论第37-40页
   ·慢病毒感染猪胚胎的研究第37页
   ·聚合法研究不同时期胚胎的嵌合率第37-38页
   ·iPS嵌合胚胎的研究第38-40页
     ·前期卵裂球时期胚胎无法嵌合的原因第38-39页
     ·iPS嵌合囊胚的位置第39页
     ·造成妊娠率的低可能有以下原因第39-40页
5 结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-46页
附录第46-48页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第48页

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