摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-19页 |
·嵌合体研究简史 | 第12页 |
·猪的嵌合体研究 | 第12页 |
·嵌合体的制作方法 | 第12-14页 |
·聚合法 | 第13页 |
·注射法 | 第13-14页 |
·嵌合体的鉴定 | 第14-15页 |
·色素分析 | 第14页 |
·同功酶法 | 第14页 |
·绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP) | 第14页 |
·可变数目串联重复(variable number tandem re-peats,VNTR) | 第14页 |
·短串联重复序列(short tandem repeats,STR) | 第14-15页 |
·单核苷酸多态性 | 第15页 |
·实时荧光定量PCR技术 | 第15页 |
·嵌合体技术应用前景 | 第15-16页 |
·发育生物学领域 | 第15-16页 |
·医学领域 | 第16页 |
·诱导性多潜能干细胞研究进展 | 第16-17页 |
·猪iPS嵌合研究进展 | 第17页 |
·iPS细胞应用前景 | 第17页 |
·慢病毒载体法的发展 | 第17-18页 |
·慢病毒载体特点 | 第17-18页 |
·慢病毒制备转基因动物研究概述 | 第18页 |
·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-25页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·猪卵巢 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要器材 | 第19页 |
·iPS供核细胞 | 第19-20页 |
·实验动物 | 第20页 |
·卵母细胞及胚胎培养相关试剂 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-25页 |
·卵母细胞成熟培养 | 第20-21页 |
·慢病毒的稀释与保存 | 第21页 |
·精子的采集和精液保存 | 第21页 |
·卵母细胞体外受精(IVF) | 第21页 |
·慢病毒注射 | 第21页 |
·凹窝聚合 | 第21页 |
·胚胎染色和囊胚细胞计数 | 第21-22页 |
·嵌合胚胎的鉴定 | 第22页 |
·注射用的细胞准备 | 第22页 |
·猪的发情观察和受体移植 | 第22页 |
·组织切片HE染色 | 第22-23页 |
·基因组DNA提取 | 第23-24页 |
·统计分析 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-37页 |
·慢病毒感染制备转基因胚胎 | 第25-28页 |
·慢病毒感染1-细胞期胚胎 | 第25-26页 |
·慢病毒感染2-细胞期胚胎 | 第26-28页 |
·同时期聚合胚胎的研究 | 第28-29页 |
·iPS细胞嵌合不同时期胚胎能力的研究 | 第29-31页 |
·两株iPS细胞的嵌合能力的比较 | 第31-32页 |
·iPS细胞嵌合胚胎受体猪移植 | 第32-37页 |
·流产胎儿后的胎盘分析 | 第34-37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
·慢病毒感染猪胚胎的研究 | 第37页 |
·聚合法研究不同时期胚胎的嵌合率 | 第37-38页 |
·iPS嵌合胚胎的研究 | 第38-40页 |
·前期卵裂球时期胚胎无法嵌合的原因 | 第38-39页 |
·iPS嵌合囊胚的位置 | 第39页 |
·造成妊娠率的低可能有以下原因 | 第39-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
附录 | 第46-48页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第48页 |