| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| ·RNA干扰技术 | 第11-14页 |
| ·RNAi机制的发现 | 第11-12页 |
| ·RNAi的原理及相关过程 | 第12-14页 |
| ·RNAi的特点 | 第14页 |
| ·RNAi在丝状真菌中的应用技术 | 第14-20页 |
| ·丝状真菌中的RNAi机制 | 第14-15页 |
| ·RNAi在丝状真菌功能基因研究中的应用进展 | 第15-16页 |
| ·丝状真菌RNAi研究路线 | 第16-20页 |
| ·本课题来源、研究内容和意义 | 第20-23页 |
| ·课题来源 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| ·研究意义 | 第21-23页 |
| 第二章 RNA干扰基础载体的构建 | 第23-46页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料和仪器 | 第23-25页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·主要培养基 | 第24页 |
| ·菌株和质粒 | 第24-25页 |
| ·引物序列 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-36页 |
| ·米曲霉糖化酶终止子TagdA的接入 | 第26-32页 |
| ·米曲霉淀粉酶启动子PamyB接入 | 第32-34页 |
| ·ccdB基因与内含子连接至质粒pHGW+P+T | 第34-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-44页 |
| ·米曲霉糖化酶终止子TagdA的接入 | 第36-38页 |
| ·米曲霉淀粉酶启动子PamyB接入 | 第38-41页 |
| ·ccdB基因与内含子连接至质粒pHGW+P+T | 第41-44页 |
| ·本章小结 | 第44-46页 |
| 第三章 RNA干扰对黑曲霉糖化酶基因表达影响的研究 | 第46-75页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·实验材料和仪器 | 第46-51页 |
| ·主要实验试剂 | 第46-48页 |
| ·主要培养基 | 第48-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第50页 |
| ·引物序列 | 第50-51页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-63页 |
| ·RNA干扰表达载体的构建 | 第51-55页 |
| ·根癌农杆菌介导单片段干扰表达载体的黑曲霉转化 | 第55-58页 |
| ·黑曲霉糖化酶基因干扰效果分析 | 第58-63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-74页 |
| ·糖化酶基因干扰表达载体的构建 | 第63-67页 |
| ·根癌农杆菌介导单片段干扰表达载体的黑曲霉转化 | 第67-71页 |
| ·RNAi对黑曲霉糖化酶基因沉默效果的分析 | 第71-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第四章 RNA干扰共抑制黑曲霉多个基因 | 第75-95页 |
| ·引言 | 第75页 |
| ·实验材料和仪器 | 第75-77页 |
| ·主要实验试剂 | 第75-76页 |
| ·主要培养基 | 第76页 |
| ·菌株和质粒 | 第76页 |
| ·引物序列 | 第76-77页 |
| ·实验仪器 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-84页 |
| ·多基因干扰表达载体的构建 | 第77-80页 |
| ·根癌农杆菌介导三基因干扰表达载体的黑曲霉转化 | 第80-81页 |
| ·三基因干扰表达载体作用效果分析 | 第81-84页 |
| ·结果与讨论 | 第84-93页 |
| ·多片段干扰表达载体的构建 | 第84-86页 |
| ·根癌农杆菌介导三基因干扰表达载体的黑曲霉转化 | 第86-87页 |
| ·根癌农杆菌介导转化黑曲霉SH-2 | 第87-89页 |
| ·三基因干扰表达载体作用效果分析 | 第89-93页 |
| ·本章小结 | 第93-95页 |
| 结论与展望 | 第95页 |
| 本文创新之处 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-99页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 附录一 终止子TagdA测序比对结果 | 第101-103页 |
| 附录二 启动子PamyB测序比对结果 | 第103-105页 |
| 附录三 内含子测序比对结果 | 第105-106页 |
| 附录四 ccdB测序比对结果 | 第106-110页 |
| 附录五 检测方向测序比对结果 | 第110-111页 |
| 附录六 388bp及 784bp片段测序结果 | 第111-113页 |
| 附录七 三基因融合片段比对片段 | 第113-115页 |
| 附件 | 第115页 |