摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
文献综述 | 第12-24页 |
第一章 哺乳动物雄性生殖干细胞及其研究进展 | 第12-24页 |
·雄性生殖干细胞的起源 | 第12-13页 |
·雄性生殖干细胞的生物学特性和鉴定 | 第13-15页 |
·形态学和组织学特征 | 第13页 |
·雄性生殖干细胞的特异性标记 | 第13-15页 |
·雄性生殖干细胞的体外培养 | 第15-18页 |
·雄性生殖干细胞的分离、纯化 | 第15-16页 |
·分离、纯化雄性生殖干细胞时材料的选择 | 第15页 |
·雄性生殖干细胞悬液的制备 | 第15-16页 |
·雄性生殖干细胞的纯化 | 第16-17页 |
·差速贴壁法 | 第16页 |
·Percoll 密度梯度离心 | 第16页 |
·流式细胞术( Flow cytomet ry, FCM) | 第16-17页 |
·免疫磁珠分离技术(MACS) | 第17页 |
·培养液成分的改进与发展 | 第17-18页 |
·干细胞生长因子(SCF) | 第17页 |
·胶质细胞源神经营养因子(GDNF) | 第17-18页 |
·白血病抑制因子(LIF) | 第18页 |
·成纤维细胞生长因子(FGFs) | 第18页 |
·饲养层 | 第18页 |
·雄性生殖干细胞的诱导分化 | 第18-19页 |
·雄性生殖干细胞的去分化及多能性 | 第19-21页 |
·雄性生殖干细胞移植的研究进展 | 第21-22页 |
·雄性生殖干细胞移植 | 第21-22页 |
·雄性生殖干细胞移植的流程 | 第21页 |
·受体动物的选择 | 第21-22页 |
·供体细胞的获得与体外操作 | 第22页 |
·移植方法 | 第22页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的研究进展 | 第22页 |
·雄性生殖干细胞研究的前景 | 第22-24页 |
试验研究 | 第24-50页 |
第二章 奶山羊雄性生殖干细胞分离、培养条件的优化 | 第24-34页 |
·材料和方法 | 第24-27页 |
·材料 | 第24-25页 |
·动物组织材料 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·方法 | 第25-27页 |
·奶山羊睾丸组织的采集 | 第25页 |
·不同组合的酶消化液的效果比较 | 第25-26页 |
·不同细胞外基质对雄性生殖干细胞纯化的效率 | 第26页 |
·CD49f 的免疫荧光染色 | 第26页 |
·碱性磷酸酶(AP)染色 | 第26页 |
·奶山羊年龄对于雄性生殖干细胞培养的影响 | 第26页 |
·不同基础培养液对奶山羊雄性生殖干细胞培养的影响 | 第26-27页 |
·生长因子及小分子化和物对奶山羊雄性生殖干细胞体外增殖、分化的作用 | 第27页 |
·数据统计方法 | 第27页 |
·结果 | 第27-30页 |
·三种酶消化法的比较 | 第27页 |
·细胞外基质对奶山羊雄性生殖干细胞的纯化效率的影响 | 第27页 |
·不同基础液对于奶山羊雄性生殖干细胞培养的影响 | 第27-28页 |
·年龄对奶山羊雄性生殖干细胞培养的影响 | 第28-29页 |
·生长因子及小分子化合物对奶山羊雄性生殖干细胞体外增殖、分化的作用 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
·小结 | 第32-34页 |
第三章 奶山羊雄性生殖干细胞生物学特性的鉴定 | 第34-41页 |
·材料和方法 | 第34-36页 |
·材料 | 第34页 |
·动物组织材料 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的获取 | 第34-35页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞株的免疫荧光检测 | 第35页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞株的RT-PCR 检测 | 第35-36页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的体外诱导分化 | 第36页 |
·结果 | 第36-37页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的形态学观察 | 第36-37页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的免疫荧光检测 | 第37页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的RT-PCR 检测 | 第37页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的体外分化潜能 | 第37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
·小结 | 第39-41页 |
第四章 奶山羊雄性GSCs 向精子细胞的诱导分化 | 第41-50页 |
·材料和方法 | 第41-43页 |
·材料 | 第41页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·方法 | 第41-43页 |
·睾丸提取液的制作 | 第42页 |
·奶山羊雄性生殖干细胞的体外诱导 | 第42页 |
·Stra8 超表达对奶山羊雄性生殖干细胞向精子细胞分化的影响 | 第42页 |
·定量PCR | 第42页 |
·免疫荧光染色 | 第42-43页 |
·结果 | 第43-45页 |
·RA 及睾丸提取液的作用 | 第43页 |
·Stra8 基因对于奶山羊雄性生殖干细胞分化为精子细胞的作用 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50页 |
本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
缩略语简表 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |