| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 英文缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-14页 |
| 第二章 综述 | 第14-20页 |
| ·趋化因子 | 第14-17页 |
| ·病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅰ | 第15-16页 |
| ·病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ | 第16页 |
| ·病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅲ | 第16-17页 |
| ·趋化因子受体 | 第17-19页 |
| ·趋化因子受体CCR5 | 第18页 |
| ·趋化因子受体CXCR4 | 第18-19页 |
| ·小结与展望 | 第19-20页 |
| 第三章 材料 | 第20-25页 |
| ·菌株、质粒和细胞株 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·常用试剂配制 | 第21-22页 |
| ·PCR引物 | 第22-24页 |
| ·Real-time PCR引物 | 第22-23页 |
| ·克隆用PCR引物设计 | 第23页 |
| ·验证用PCR引物设计 | 第23-24页 |
| ·引物溶解 | 第24-25页 |
| 第四章 方法 | 第25-35页 |
| ·细胞的复苏、培养、传代、冻存和计数 | 第25-26页 |
| ·细胞复苏 | 第25页 |
| ·细胞培养、传代 | 第25页 |
| ·细胞冻存 | 第25-26页 |
| ·细胞计数 | 第26页 |
| ·BCBL-1细胞基因组DNA的抽提 | 第26-27页 |
| ·构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-K15 | 第27-32页 |
| ·质粒扩增及抽提 | 第27-29页 |
| ·DNA凝胶回收 | 第29页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·将k15基因克隆至pGEM-T easy载体 | 第30-32页 |
| ·构建真核表达载体pIRES2-EGFP-K15 | 第32页 |
| ·待筛选基因的真核表达质粒电穿孔转染Jurkat细胞 | 第32-33页 |
| ·细胞总RNA的抽提 | 第33页 |
| ·逆转录PCR | 第33-34页 |
| ·PCR验证待筛选目的基因是否表达 | 第34页 |
| ·实时定量PCR检测抗-HIV相关基因的表达水平 | 第34-35页 |
| 第五章 结果 | 第35-47页 |
| ·构建真核表达载体pIRES2-EGFP-K15 | 第35-37页 |
| ·目的基因PCR扩增后的凝胶电泳图 | 第35页 |
| ·pGEM-T easy-K15的双酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·真核表达载体pIRES2-EGFP-K15的双酶切鉴定 | 第36页 |
| ·K15基因与载体pIRES2-EGFP连接成功后的测序结果 | 第36-37页 |
| ·构建的待筛选目的基因真核表达载体的鉴定 | 第37-40页 |
| ·构建的待筛选目的基因真核表达载体的双酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·构建的待筛选目的基因真核表达载体的测序结果 | 第38-40页 |
| ·重组质粒电穿孔转染Jurkat细胞后的荧光显微镜检测结果 | 第40-42页 |
| ·PCR鉴定目的基因在细胞内是否表达 | 第42-43页 |
| ·qRT-PCR检测重组质粒转染Jurkat细胞后ARGs mRNA的表达水平 | 第43-47页 |
| 第六章 讨论 | 第47-53页 |
| ·KSHV基因的选取 | 第47页 |
| ·克隆载体的选取 | 第47-48页 |
| ·转染方式的选取 | 第48-49页 |
| ·内源性ARGs及其作用机制 | 第49-50页 |
| ·筛选出的特异基因在激活ARGs表达方面的作用 | 第50-53页 |
| 第七章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 个人简介 | 第61页 |
