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巨大芽孢杆菌热休克系统的克隆和操纵子的分析

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
前言第8-11页
第一章 综述第11-20页
 1.芽孢杆菌热激系统及其研究进展第12-17页
   ·热休克反应和热激蛋白慨述第12-14页
   ·芽孢杆菌热激蛋白系统的组成及分类第14-15页
   ·第一类热激系统的基因组成第15-16页
   ·HrcA的负调控作用假说第16-17页
   ·巨大芽孢杆菌热激蛋白研究进展第17页
 2.本研究的立题依据和主要内容、目标及意义第17-20页
   ·立题依据第17-18页
   ·主要研究内容、目的和意义第18-20页
第二章 材料与方法第20-30页
 1 材料第20-24页
   ·菌种与质粒第20页
   ·培养基第20-22页
   ·主要试剂及其来源第22-23页
   ·主要仪器设备及其来源第23-24页
   ·序列分析软件第24页
 2 方法第24-30页
   ·GroES和GroEL基因的克隆第24页
   ·hrcA-grpE和dnaJ基因簇的克隆第24-25页
   ·革兰氏阳性菌基因组DNA的提取第25-26页
   ·电泳及割胶回收第26页
   ·连接反应与T-A克隆第26页
   ·大肠杆菌电转化第26-27页
   ·碱裂解法提取质粒第27页
   ·巨大芽孢杆菌转化第27-28页
   ·DNA酶切、连接及磷酸化反应、核酸浓缩第28-29页
   ·系统发生树的构建第29-30页
第三章 结果与讨论第30-48页
 1 结果第30-39页
   ·groES-groEL基因簇的克隆、测序与同源性分析第30-33页
   ·dnaK-dnaJ基因簇的克隆、测序与基因组成第33-34页
   ·hrcA、grpE和dnaJ开放式阅读框的序列分析第34-35页
   ·DnaK操纵子的转录调控元件分析第35-37页
   ·基于HrcA蛋白的系统发生树的构建第37-39页
 2 讨论第39-48页
   ·目的基因片段的PCR扩增策略第39页
   ·第一类热激蛋白基因的分布特点分析第39-41页
   ·第一类热激蛋白基因的应用前景第41-42页
   ·大肠杆菌-巨大芽孢杆菌穿梭载体pBCrep-Hsh的初步构建第42-45页
   ·基于HrcA蛋白的系统发生树的构建第45-48页
主要结论第48-50页
参考文献第50-55页
致谢第55页

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