摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-58页 |
1. 豆科植物研究进展 | 第17-29页 |
·豆科模式植物蒺藜苜蓿的研究进展 | 第17-25页 |
·豆科作物紫花苜蓿的研究进展 | 第25-29页 |
2. 小RNA在植物中的研究进展 | 第29-40页 |
·植物microRNA | 第30-34页 |
·植物siRNA | 第34-35页 |
·植物trans-acting siRNA(ta-siRNA) | 第35-40页 |
3. RNA干扰技术在植物研究中的应用 | 第40-45页 |
·RNAi技术的作用机制 | 第40-42页 |
·RNAi在植物功能基因组研究中的应用 | 第42-45页 |
4. 叶绿素降解 | 第45-54页 |
·植物衰老概述 | 第45页 |
·植物衰老与叶绿素降解 | 第45-46页 |
·叶绿素降解途径 | 第46-51页 |
·叶绿素降解相关的滞绿突变体 | 第51-52页 |
·叶绿素降解途径的研究意义 | 第52-54页 |
5. 立题背景与研究内容 | 第54-58页 |
·立题背景 | 第54-56页 |
·研究内容 | 第56-58页 |
第二章 蒺藜苜蓿发育相关基因LOBED LEAFLET1的克隆与分析 | 第58-93页 |
1. 前言 | 第58-59页 |
2. 材料和方法 | 第59-78页 |
·植物材料 | 第59页 |
·材料培养 | 第59页 |
·扫描电镜观察 | 第59-61页 |
·花粉染色观察 | 第61-62页 |
·植物DNA提取 | 第62-63页 |
·植物RNA提取与cDNA合成 | 第63-64页 |
·Tnt1侧翼序列分析 | 第64-66页 |
·基因克隆 | 第66-70页 |
·RNA原位杂交 | 第70-72页 |
·基因芯片分析 | 第72页 |
·系统进化树 | 第72页 |
·基因表达载体构建 | 第72-74页 |
·农杆菌转化 | 第74-76页 |
·蒺藜苜蓿遗传转化 | 第76页 |
·转基因阳性植株鉴定 | 第76-78页 |
3. 结果与分析 | 第78-90页 |
·蒺藜苜蓿lol1突变体表型分析 | 第78-81页 |
·LOL1基因的克隆和表达分析 | 第81-83页 |
·突变体的互补与LOL1过表达系 | 第83-84页 |
·LOL1基因与TAS3 ta-siRNA途径的关系 | 第84-89页 |
·TAS3 ta-siRNA间接参与调控根的发育 | 第89-90页 |
4. 讨论与分析 | 第90-93页 |
·TAS3 ta-siRNA途径参与调控蒺藜苜蓿的幼叶发育 | 第90-91页 |
·TAS3 ta-siRNA途径对蒺藜苜蓿的发育有更广泛的影响 | 第91-92页 |
·TAS3 ta-siRNA途径参与调控蒺藜苜蓿的根发育 | 第92-93页 |
第三章 蒺藜苜蓿滞绿基因(STAY-GREEN)的鉴定以及紫花苜蓿内源SGR基因RNAi分析 | 第93-135页 |
1. 前言 | 第93-94页 |
2. 材料与方法 | 第94-110页 |
·植物材料 | 第94页 |
·材料培养与条件处理 | 第94页 |
·Tnt1侧翼序列分析 | 第94页 |
·基因克隆 | 第94页 |
·系统进化树 | 第94-95页 |
·MsSGR-RNAi载体构建 | 第95页 |
·农杆菌转化 | 第95页 |
·紫花苜蓿转基因 | 第95-102页 |
·叶绿素含量的测定 | 第102页 |
·叶绿体PSII反应中心最大量子效率测定 | 第102-106页 |
·透射电镜观察分析 | 第106-109页 |
·共聚焦显微镜观察分析 | 第109页 |
·草料分析 | 第109-110页 |
3. 结果与分析 | 第110-129页 |
·滞绿突变体鉴定 | 第110-113页 |
·SGR基因分析 | 第113-120页 |
·RNA干扰紫花苜蓿内源SGR | 第120-129页 |
4. 讨论与分析 | 第129-135页 |
·sgr突变体与MsSGR-RNAi转基因株系均为C类型滞绿表型 | 第129-132页 |
·SGR在豆科根瘤的发育和衰老过程可能发挥作用 | 第132-133页 |
·紫花苜蓿内源SGR下调能够提高其牧草品质 | 第133-135页 |
总结 | 第135-136页 |
附录 | 第136-138页 |
参考文献 | 第138-151页 |
致谢 | 第151-152页 |
在读期间发表的文章和参与的课题 | 第152-153页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第153页 |