| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-41页 |
| ·葱属植物病毒病的研究进展 | 第14-15页 |
| ·Potyvirus 属病毒的分类标准 | 第15-16页 |
| ·Potyvirus 属病毒编码蛋白功能 | 第16-32页 |
| ·非编码区 | 第17-18页 |
| ·P1 蛋白 | 第18-19页 |
| ·HC-Pro | 第19-21页 |
| ·P3 蛋白 | 第21-23页 |
| ·6K 蛋白 | 第23页 |
| ·CI 蛋白 | 第23-25页 |
| ·NIa 蛋白 | 第25-29页 |
| ·NIa-pro 蛋白 | 第25-27页 |
| ·NIa-VPg 蛋白 | 第27-29页 |
| ·NIb 蛋白 | 第29-30页 |
| ·CP 蛋白 | 第30-32页 |
| ·研究Potyvirus 属成员病毒蛋白功能常用技术 | 第32-40页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第32-34页 |
| ·转基因技术 | 第34-35页 |
| ·全长cDNA 侵染性克隆 | 第35-36页 |
| ·双分子荧光互补 | 第36页 |
| ·串联亲和纯化 | 第36-40页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第40-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-62页 |
| ·试剂与仪器 | 第41-42页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·仪器 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·病样和转基因材料 | 第42页 |
| ·菌株和载体质粒 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-62页 |
| ·普通生物学实验方法 | 第42-44页 |
| ·病毒提纯 | 第42-44页 |
| ·电子显微镜观察 | 第44页 |
| ·分子生物学实验方法 | 第44-49页 |
| ·RNA 抽提 | 第44-46页 |
| ·逆转录 | 第46页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第46-47页 |
| ·DNA 片段切胶纯化 | 第47-48页 |
| ·T-A 连接 | 第48页 |
| ·感受态细胞制备（CaC12 法） | 第48页 |
| ·转化和筛选 | 第48页 |
| ·质粒提取 | 第48-49页 |
| ·序列测定和分析 | 第49页 |
| ·血清学实验方法 | 第49-54页 |
| ·原核表达载体构建 | 第49-50页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第50-52页 |
| ·抗血清的制备 | 第52页 |
| ·Western Blot | 第52-54页 |
| ·酵母双杂交实验方法 | 第54-60页 |
| ·基本操作 | 第54-55页 |
| ·SMV-P 和SYSV-O 蛋白互作 | 第55-56页 |
| ·洋葱文库构建和筛选 | 第56-60页 |
| ·拟南芥转基因 | 第60-62页 |
| ·拟南芥的培养 | 第60页 |
| ·拟南芥转基因 | 第60页 |
| ·转基因植株检测 | 第60-62页 |
| 第三章 胡葱黄条病毒陕西洋葱分离物基因组全序列测定及分析 | 第62-84页 |
| ·SYSV 研究现状 | 第62-66页 |
| ·普通生物学 | 第62-64页 |
| ·寄主范围和危害症状 | 第63页 |
| ·传播方式 | 第63页 |
| ·病毒粒子形态和细胞病理学特征 | 第63-64页 |
| ·血清学关系 | 第64页 |
| ·分子生物学研究进展 | 第64-66页 |
| ·胡葱黄条病毒陕西洋葱分离物基因组的全序列测定及分析 | 第66-80页 |
| ·电镜观察 | 第66-67页 |
| ·SYSV-O 基因组全序列测定 | 第67-77页 |
| ·SYSV-O 基因组分析 | 第77-80页 |
| ·SYSV-O 基因组结构特征 | 第77-78页 |
| ·SYSV-O 基因组序列分析 | 第78-80页 |
| ·SYSV-O 与相关病毒的血清学关系 | 第80-84页 |
| ·SYSV-O CP 的原核表达 | 第80-82页 |
| ·构建SYSV-O CP 的原核表达载体 | 第80-82页 |
| ·原核表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第82页 |
| ·SYSV-O CP 抗血清制备及检测 | 第82-83页 |
| ·SYSV、LYSV 和OYDV 的血清学关系 | 第83-84页 |
| 第四章 酵母双杂交分析SYSV-O 和SMV-P 编码蛋白的相互作用 | 第84-98页 |
| ·SYSV-O 和SMV-P 各基因酵母双杂交载体的构建 | 第84-89页 |
| ·引物设计 | 第84-85页 |
| ·构建SYSV-O 的诱饵质粒和猎物质粒 | 第85-86页 |
| ·诱饵质粒和酵母质粒在酵母中的表达 | 第86-88页 |
| ·单个酵母双杂交质粒的自激活检测 | 第88-89页 |
| ·酵母双杂交分析SYSV-O 和SMV-P 编码蛋白的互作图谱 | 第89-95页 |
| ·互作图谱的建立 | 第91-93页 |
| ·SMV-P-HC-Pro 与SYSV-O 编码蛋白以及SYSV-O-HC-Pro 与SMV-P 编码蛋白之间的互作检测 | 第93页 |
| ·假阳性的排除 | 第93-94页 |
| ·缺失的SMV-P 6K1 与NIa-pro 之间的互作 | 第94-95页 |
| ·讨论 | 第95-98页 |
| 第五章 SYSV-O P3 蛋白功能的研究 | 第98-126页 |
| ·YTHS 筛选与SYSV-O P3 蛋白互作的洋葱蛋白 | 第98-100页 |
| ·洋葱总RNA 提取以及LD-PR | 第98-99页 |
| ·共转化筛选与SYSV-O P3 蛋白互作的洋葱蛋白 | 第99页 |
| ·阳性克隆的进一步验证 | 第99-100页 |
| ·测序结果与分析 | 第100页 |
| ·YTHS 验证rbcL/SYSV-O-P3 的互作 | 第100-111页 |
| ·洋葱rbcL 全序列 | 第100-103页 |
| ·用完整的O-rbcL 的ORF 构建酵母双杂交载体 | 第103-104页 |
| ·YTHS 再证明完整的O-rbcL 蛋白和SYSV-O-P3 有互作 | 第104-105页 |
| ·YTHS 证明rbcL 和OYDV-P3、SMV-P-P3 之间存在互作 | 第105-106页 |
| ·缺失突变确定rbcL/SYSV-O-P3 互作区域 | 第106-109页 |
| ·缺失突变确定rbcL/OYDV-P3 互作区域 | 第109-111页 |
| ·免疫共沉淀进一步验证rbcL/SYSV-O-P3 的互作 | 第111-117页 |
| ·rbcL 抗血清的制备 | 第112-113页 |
| ·构建体外表达载体pTNT-rbcL 和pTNT-SYSVO-P3?2 | 第113-114页 |
| ·免疫共沉淀证明rbcL/SYSV-O-P3 体外互作 | 第114-117页 |
| ·rbcL 和拟南芥 Rieske FeS 与 SYSV-O 和 SMV-P 其它编码蛋白的互作研究 | 第117-119页 |
| ·rbcL 与SYSV-O 和SMV-P 其它编码蛋白的互作研究 | 第117-118页 |
| ·拟南芥Rieske FeS 与SYSV-O 和SMV-P 其他编码蛋白的互作研究 | 第118-119页 |
| ·SYSV-O-P3 转拟南芥研究 | 第119-123页 |
| ·SYSV-O-P3 转基因载体构建 | 第119-120页 |
| ·转SYSV-O-P3 拟南芥的分子鉴定 | 第120-121页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察GFP 融合蛋白在拟南芥中的表达 | 第121-123页 |
| ·讨论 | 第123-126页 |
| 第六章 结论与进一步的研究建议 | 第126-128页 |
| ·主要结论 | 第126-127页 |
| ·进一步的研究设想 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-150页 |
| 附录1（表格） | 第150-152页 |
| 附录2（图） | 第152-158页 |
| 英文缩略词 | 第158-161页 |
| 致谢 | 第161-162页 |
| 作者简介 | 第162-163页 |
