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grb10在爪蟾早期胚胎发育中的功能研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第1章 引言第8-17页
   ·模式生物在发育生物学研究中的作用第8页
   ·非洲爪蟾作为模式生物的优点第8-9页
   ·非洲爪蟾的早期胚胎发育第9-12页
   ·原肠运动及其调控第12-14页
   ·Grb7/10/14 家族的研究现状第14-16页
   ·本论文的研究目的和意义第16-17页
第2章 材料和方法第17-32页
   ·爪蟾grb10 基因的克隆和Morpholino 序列第17-18页
     ·爪蟾grb10 基因的克隆第17页
     ·Morpholino 序列第17-18页
   ·质粒的构建第18页
   ·体外转录m RNA第18-20页
     ·体外转录mRNA 所需试剂第18-19页
     ·制备模板DNA第19页
     ·体外转录mRNA第19页
     ·纯化m RNA第19-20页
   ·胚胎,动物帽实验和Keller explants第20-24页
     ·爪蟾胚胎和体外受精第20-21页
     ·显微注射第21页
     ·动物帽实验第21-22页
     ·Keller explants 试验第22-23页
     ·斑马鱼胚胎第23-24页
   ·原位杂交第24-27页
     ·原位杂交试剂第24页
     ·原位杂交探针的制备第24-25页
     ·原位杂交第25-27页
   ·RT-PCR第27-28页
     ·Trizol 法提取总RNA第27页
     ·反转录第27页
     ·PCR第27-28页
     ·琼脂糖凝胶检测第28页
   ·细胞培养和荧光素酶报告基因试验第28-29页
     ·细胞培养第28-29页
     ·荧光素酶报告基因试验第29页
   ·细胞极性试验第29页
   ·JNK 活性试验和免疫印迹试验第29-32页
第3章 结果与讨论第32-47页
   ·热带爪蟾grb10 基因的克隆与时空表达谱分析第32-33页
     ·grb10 基因的克隆第32-33页
     ·grb10 基因的时空表达谱分析第33页
   ·grb10 的过量表达导致原肠运动缺陷第33-39页
     ·grb10 的过量表达导致原肠运动缺陷第33-35页
     ·grb10 的过量表达抑制Activin 诱导的动物帽延伸第35页
     ·grb10 的过量表达不影响细胞命运的决定第35-37页
     ·grb10 在斑马鱼中过量表达导致原肠运动缺陷第37-39页
   ·grb10 特异性的对于正常的原肠运动是必需的第39-43页
     ·内源性的grb10 对于非洲爪蟾的原肠运动是必需的第39页
     ·敲减grb10 不影响细胞命运的决定第39页
     ·grb10-MO 导致的原肠运动缺陷的特异性第39-40页
     ·内源性的grb10 对于Activin 诱导的动物帽延伸是必需的第40-43页
     ·grb10 对于平面细胞极性的建立是必需的第43页
   ·grb10 影响Wnt/Fz 诱导的JNK 激活第43-47页
     ·grb10 对于JNK 的激活是必需的第43-46页
     ·Grb10 影响Wnt/JNK 信号通路组分的亚细胞定位第46-47页
第4章 结论第47-50页
   ·grb10 与Wnt/PCP 信号通路第47-48页
   ·grb10 与IGF 信号通路第48页
   ·grb10 与其它信号通路第48-50页
参考文献第50-54页
致谢第54-55页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第55页

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