| 英文缩略词 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 材料与方法 | 第13-39页 |
| 一 材料 | 第13-17页 |
| 1. 质粒与载体 | 第13页 |
| 2. 菌株、实验动物及细胞 | 第13页 |
| 3. HPV型特异性中和抗体阳性血清 | 第13页 |
| 4. 样本的采集 | 第13-14页 |
| 5. 试剂耗材 | 第14-15页 |
| 6. 主要仪器 | 第15-16页 |
| 7. 常用溶液 | 第16-17页 |
| 二 方法 | 第17-39页 |
| (一) 报告质粒pcDNA3.1-EGFP的构建 | 第17-21页 |
| 1. 大肠杆菌E.coli化学感受态的制备 | 第17页 |
| 2. 增强型绿色荧光蛋白基因的扩增 | 第17-18页 |
| 3. PCR产物的回收 | 第18-19页 |
| 4. PCR回收产物的克隆 | 第19-21页 |
| (二) 假病毒的制备和滴定 | 第21-23页 |
| 1. 假病毒的制备 | 第21-23页 |
| 2. 假病毒的滴定 | 第23页 |
| (三) 中和抗体检测方法的建立 | 第23-26页 |
| 1. 中和试验中假病毒接种量的选择 | 第23-24页 |
| 2. 中和试验线性范围及重复性的测定 | 第24-25页 |
| 3. 待测血清中和抗体的检测 | 第25-26页 |
| (四) 用假病毒中和试验对HPV 58L1 DNA疫苗所诱导中和抗体的检测 | 第26-31页 |
| 1. 五种HPV58L1 DNA疫苗的构建 | 第26-28页 |
| 2. HPV58L1 DNA疫苗在真核细胞中的瞬时表达 | 第28页 |
| 3. SDS-1从GE电泳 | 第28-29页 |
| 4. 目的蛋白的鉴定(Western blot) | 第29页 |
| 5. DNA疫苗假病毒形成能力的检测 | 第29-30页 |
| 6. DNA疫苗重组质粒的大量提取及定量 | 第30-31页 |
| 7. 小鼠DNA疫苗的免疫 | 第31页 |
| (五) HPV DNA检测以及型别分析 | 第31-33页 |
| 1. HPV核酸DNA的提取 | 第31-32页 |
| 2. PCR扩增 | 第32-33页 |
| 3. HPV核酸的杂交检测 | 第33页 |
| (六) 小鼠假病毒感染模型的建立 | 第33-35页 |
| 1. 双报告基因假病毒的制备 | 第33-34页 |
| 2. 假病毒滴度的测定 | 第34页 |
| 3. 小鼠假病毒感染模型的建立 | 第34-35页 |
| (七) HPV全基因序列的扩增及序列同源性分析 | 第35-39页 |
| 1. 全长引物的设计 | 第35页 |
| 2. HPV全基因序列的PCR扩增 | 第35-36页 |
| 3. HPV全基因序列的克隆及序列测定 | 第36-37页 |
| 4. 序列同源性分析 | 第37-39页 |
| 实验结果 | 第39-55页 |
| 一 以假病毒为基础的中和抗体检测方法的建立 | 第39-43页 |
| 1. 报告质粒pcDNA3.1-EGFP的构建 | 第39页 |
| 2. 假病毒的制备和滴定 | 第39-40页 |
| 3. 中和抗体检测方法的建立 | 第40-43页 |
| 二 中和抗体检测方法的应用 | 第43-49页 |
| 1. 对不同HPV58L1 DNA疫苗所诱导中和抗体的检测 | 第43-46页 |
| 2. 不同人群中HPV中和抗体的检测以及与HPV DNA关系的分析 | 第46-49页 |
| 三 以假病毒为基础的动物模型的建立 | 第49-51页 |
| 1. 以荧光素酶为报告基因的假病毒的制备 | 第49-51页 |
| 2. 假病毒滴度的测定 | 第51页 |
| 3. 小鼠生殖道假病毒感染模型的建立 | 第51页 |
| 四 HPV全基因序列的扩增及序列同源性分析 | 第51-55页 |
| 讨论 | 第55-63页 |
| 一 中和抗体检测方法的建立 | 第55-56页 |
| 二 中和抗体检测方法的应用 | 第56-59页 |
| 三 小鼠假病毒感染模型的建立 | 第59-60页 |
| 四 基因组的扩增及同源性分析 | 第60-63页 |
| 小结 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 综述: 人乳头瘤病毒(HPV)中和抗体检测方法的研究进展 | 第69-83页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
