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巴西橡胶树HbMyb1基因和OPV-10390连锁标记原位PCR定位的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 前言第10-26页
   ·橡胶树种质概述第11页
   ·橡胶树抗性相关基因研究概况第11-14页
     ·死皮病抗性相关基因(HbMybl)第11-13页
     ·含锰的超氧化物歧化酶基因(MnSOD)第13页
     ·几丁质酶基因(Chitinase)第13页
     ·抗白粉病基因连锁标记(OPV-10_(390))第13-14页
   ·橡胶树基因定位研究进展第14-15页
   ·橡胶树的核型分析第15-16页
   ·植物原位PCR的研究进展第16-24页
     ·原位PCR的基本原理第16-18页
     ·植物原位PCR技术的主要操作步骤第18-23页
     ·植物原位PCR应用进展第23-24页
   ·本研究的目的意义和技术路线第24-26页
     ·研究目的及意义第24-25页
     ·研究的技术路线第25-26页
2 材料与方法第26-37页
   ·试验材料与试剂第26-27页
     ·供试材料第26页
     ·主要的仪器第26页
     ·试剂第26-27页
   ·试验方法第27-37页
     ·橡胶树DNA提取第27-28页
     ·特异引物合成与筛选第28-32页
     ·橡胶树特异DNA序列的原位PCR检测体系第32-37页
       ·PLL(L—多聚赖氨酸)包被玻片第32页
       ·染色体标本制备第32-34页
       ·预处理第34页
       ·原位扩增第34页
       ·荧光检测结果第34-35页
       ·橡胶死皮病抗性相关基因HbMybl和抗白粉病基因连锁标记OPV—10_(390)的定位第35-37页
3 结果与分析第37-55页
   ·OPV-10_(390)特异引物的筛选第37-41页
     ·橡胶树基因组DNA的提取第37页
     ·橡胶树特异引物的合成与筛选第37-41页
   ·橡胶树染色体的原位PCR技术体系的建立第41-46页
     ·标本预理的优化第41-44页
     ·原位扩增体系的建立第44页
     ·扩增后洗脱的优化第44-46页
   ·橡胶树HbMybl和OPV—10_(390)的原位PCR定位第46-55页
     ·核型分析第46-52页
       ·HbMybl在热研7-33-97叶片细胞不同分裂时期原位PCR及其染色体上的定位分析第52-53页
     ·OPV—10_(390)在RRIM600叶片细胞不同分裂时期原位PCR及其染色体上的定位分析第53-55页
4 讨论第55-60页
   ·引物的筛选第55页
   ·染色体标本制备及其保存第55-56页
   ·预处理和洗脱强度第56-57页
   ·原位PCR技术中的非特异性问题第57-58页
   ·原位PCR定位时信号数量问题第58页
   ·分析了热研7-33-97和橡胶RRIM600的核型第58-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-70页
附录 试剂的配制第70-73页
缩略语第73-74页
致谢第74页

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