| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-19页 |
| 1 包涵体蛋白柱层析复性研究 | 第10-16页 |
| ·包涵体的形成 | 第10-11页 |
| ·影响蛋白质复性的因素 | 第11-12页 |
| ·蛋白复性的传统方法 | 第12-14页 |
| ·柱层析法复性蛋白 | 第14-16页 |
| 2 人干扰素 α-2b | 第16-17页 |
| ·人干扰素 α-2b 的结构 | 第16-17页 |
| ·人干扰素 α-2b 的理化性质 | 第17页 |
| ·人干扰素 α-2b 的生物学作用 | 第17页 |
| 3 本文的研究内容与意义 | 第17-19页 |
| 第二章 重组人干扰素 α-2b 包涵体的制备、洗涤、溶解及透析复性 | 第19-32页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第20-21页 |
| ·菌种与培养基 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验仪器 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-23页 |
| ·菌种的活化和培养 | 第21-22页 |
| ·菌体的收集与破碎 | 第22页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第22页 |
| ·包涵体的溶解 | 第22-23页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 的透析复性 | 第23页 |
| 3 分析方法 | 第23-27页 |
| ·菌体浓度及 rhIFNα-2b 表达量测定 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE 电泳测定 rhIFNα-2b 含量 | 第23-24页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第24-25页 |
| ·rhIFNα-2b生物学活性测定-微量细胞病变效应抑制(CPE) | 第25-27页 |
| 4 实验结果与讨论 | 第27-30页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 的发酵 | 第27-28页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 包涵体的洗涤纯化与溶解 | 第28-30页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 的透析复性 | 第30页 |
| 5 结论 | 第30-32页 |
| 第三章 重组人干扰素 α-2b 包涵体的柱层析复性研究 | 第32-53页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-38页 |
| ·盐酸胍浓度梯度凝胶过滤柱复性重组人干扰素 α-2b | 第34-35页 |
| ·离子交换层析法复性重组人干扰素 α-2b | 第35-37页 |
| ·疏水层析法复性重组人干扰素 α-2b | 第37-38页 |
| 3 分析方法 | 第38页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 蛋白浓度测定 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第38页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 活性测定 | 第38页 |
| 4 实验结果与讨论 | 第38-52页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 的梯度凝胶过滤柱复性 | 第39-42页 |
| ·盐酸胍浓度梯度凝胶过滤柱复性 rhIFNα-2b | 第39-40页 |
| ·Buffer A中盐酸胍浓度对 SEC 复性的影响 | 第40页 |
| ·盐酸胍梯度长度对 SEC 复性的影响 | 第40-41页 |
| ·GSH-GSSG 比例对 SEC 复性的影响 | 第41-42页 |
| ·流速对 SEC 复性的影响 | 第42页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 的离子交换层析复性 | 第42-46页 |
| ·盐酸胍浓度梯度离子交换层析复性 rhIFNα-2b | 第42-44页 |
| ·流速对 IEC 复性的影响 | 第44页 |
| ·Buffer B 中盐酸胍浓度对 IEC 复性的影响 | 第44-45页 |
| ·上样量对 IEC 复性的影响 | 第45-46页 |
| ·重组人干扰素 α-2b 的疏水层析复性 | 第46-50页 |
| ·疏水层析复性 rhIFNα-2b | 第46-47页 |
| ·上样样品中氯化钠浓度对蛋白沉淀的影响 | 第47-48页 |
| ·Buffer A 和 Buffer B 中盐酸胍浓度对 HIC 复性的影响 | 第48页 |
| ·流速对 HIC 复性的影响 | 第48-49页 |
| ·上样量对 HIC 复性的影响 | 第49-50页 |
| ·复性方法的比较 | 第50-52页 |
| ·复性机理的比较 | 第50页 |
| ·复性效果的比较 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
