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拟南芥抗寒相关转录因子CBF下游基因的筛选以及低温对植物开花的影响

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一部分 抗寒相关转录因子CBF下游蛋白的筛选第10-62页
 1 文献综述第12-25页
   ·植物的冷驯化第12页
   ·冷驯化过程中冷信号传递及基因调控途径第12-16页
     ·冷信号的感受第13页
     ·依赖于CBF信号途径相关因子第13-15页
     ·ABA非依赖的冷驯化途径中不依赖于CBF信号途径相关因子第15-16页
   ·转录因子CBF在冷驯化过程中的作用第16-22页
     ·顺式作用元件DRE的发现第16页
     ·转录调控因子CBF/DREB1的发现及其基本性质第16-18页
     ·CBF/DREB1的表达与其对植物抗性的调控第18-22页
   ·氨基酸渗透酶情况简介第22-25页
 2 材料和方法第25-36页
   ·实验材料第25页
     ·植物材料第25页
     ·菌株和质粒第25页
   ·实验方法第25-36页
     ·顺式作用元件搜索程序Element Finder的编写第25页
     ·拟南芥培养第25-26页
     ·基因组DNA的提取第26-27页
     ·RNA提取第27页
     ·逆转录第27-28页
     ·PCR第28-29页
     ·DNA酶切第29页
     ·DNA连接第29-30页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化第30页
     ·农杆菌感受态细胞制备及转化第30-31页
     ·酵母感受态细胞制备及转化第31页
     ·拟南芥转化第31-32页
     ·GUS染色第32-33页
     ·PEG介导的原生质体转化第33-34页
     ·细胞液及细胞外液的提取第34页
     ·6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性测定第34-35页
     ·氨基酸含量测定第35-36页
 3 结果第36-59页
   ·CBF下游基因的预测及表达分析第36-48页
     ·CBF下游基因预测第36页
     ·CBF1过表达植株第36-43页
     ·基因芯片检测第43-46页
     ·CBF下游基因表达情况的RT-PCR分析第46-48页
   ·AtPPRC44表达与功能分析第48-59页
     ·AtPPRC44的功能预测与进化地位分析第48-51页
     ·AtPPRC44全长克隆第51页
     ·酵母互补实验第51-53页
     ·AtPPRC44表达分析第53-54页
     ·细胞定位第54-56页
     ·T-DNA插入突变体的鉴定及功能分析第56-59页
 4 讨论第59-62页
   ·通过DRE元件预测CBF下游基因的可行性分析第59-60页
   ·AtPPRC44的可能功能第60-62页
第二部分 低温对植物开花时间的影响第62-94页
 1 文献综述第64-76页
   ·光周期途径第64-67页
   ·春化途径第67-72页
   ·自主开花途径第72-74页
   ·GA对植物开花的影响第74页
   ·其他途径第74-76页
 2 材料和方法第76-79页
   ·实验材料第76页
   ·实验方法第76-79页
     ·拟南芥培养第76页
     ·基因组DNA,RNA的提取第76页
     ·开花相关转录因子的RT-PCR分析第76-77页
     ·下胚轴长度对激素反应的实验第77-79页
 3 实验结果第79-91页
   ·低温条件阻碍植物从营养生长向生殖生长转化第79-82页
   ·CBF1,2,3过表达植株开花时间延迟第82-83页
   ·CBF1过表达不影响春化和光周期途径第83-87页
     ·CBF1过表达植株的开花时间的推迟与春化途径无关第83-85页
     ·CBF1的过表达对光周期途径没有影响第85-87页
   ·CBF1过表达植株赤霉素的水平没有显著减低第87-89页
   ·CBF1过表达植株中开花整合途径因子Leafy,SOC1表达水平下降,FT表达基本不变第89-91页
 4 讨论第91-94页
结束语第94-96页
参考文献第96-105页
附录1 引物序列表第105-107页
附录2 缩略词对照第107-108页
致谢第108页

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