摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一部分 抗寒相关转录因子CBF下游蛋白的筛选 | 第10-62页 |
1 文献综述 | 第12-25页 |
·植物的冷驯化 | 第12页 |
·冷驯化过程中冷信号传递及基因调控途径 | 第12-16页 |
·冷信号的感受 | 第13页 |
·依赖于CBF信号途径相关因子 | 第13-15页 |
·ABA非依赖的冷驯化途径中不依赖于CBF信号途径相关因子 | 第15-16页 |
·转录因子CBF在冷驯化过程中的作用 | 第16-22页 |
·顺式作用元件DRE的发现 | 第16页 |
·转录调控因子CBF/DREB1的发现及其基本性质 | 第16-18页 |
·CBF/DREB1的表达与其对植物抗性的调控 | 第18-22页 |
·氨基酸渗透酶情况简介 | 第22-25页 |
2 材料和方法 | 第25-36页 |
·实验材料 | 第25页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株和质粒 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-36页 |
·顺式作用元件搜索程序Element Finder的编写 | 第25页 |
·拟南芥培养 | 第25-26页 |
·基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
·RNA提取 | 第27页 |
·逆转录 | 第27-28页 |
·PCR | 第28-29页 |
·DNA酶切 | 第29页 |
·DNA连接 | 第29-30页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第30页 |
·农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第30-31页 |
·酵母感受态细胞制备及转化 | 第31页 |
·拟南芥转化 | 第31-32页 |
·GUS染色 | 第32-33页 |
·PEG介导的原生质体转化 | 第33-34页 |
·细胞液及细胞外液的提取 | 第34页 |
·6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性测定 | 第34-35页 |
·氨基酸含量测定 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-59页 |
·CBF下游基因的预测及表达分析 | 第36-48页 |
·CBF下游基因预测 | 第36页 |
·CBF1过表达植株 | 第36-43页 |
·基因芯片检测 | 第43-46页 |
·CBF下游基因表达情况的RT-PCR分析 | 第46-48页 |
·AtPPRC44表达与功能分析 | 第48-59页 |
·AtPPRC44的功能预测与进化地位分析 | 第48-51页 |
·AtPPRC44全长克隆 | 第51页 |
·酵母互补实验 | 第51-53页 |
·AtPPRC44表达分析 | 第53-54页 |
·细胞定位 | 第54-56页 |
·T-DNA插入突变体的鉴定及功能分析 | 第56-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
·通过DRE元件预测CBF下游基因的可行性分析 | 第59-60页 |
·AtPPRC44的可能功能 | 第60-62页 |
第二部分 低温对植物开花时间的影响 | 第62-94页 |
1 文献综述 | 第64-76页 |
·光周期途径 | 第64-67页 |
·春化途径 | 第67-72页 |
·自主开花途径 | 第72-74页 |
·GA对植物开花的影响 | 第74页 |
·其他途径 | 第74-76页 |
2 材料和方法 | 第76-79页 |
·实验材料 | 第76页 |
·实验方法 | 第76-79页 |
·拟南芥培养 | 第76页 |
·基因组DNA,RNA的提取 | 第76页 |
·开花相关转录因子的RT-PCR分析 | 第76-77页 |
·下胚轴长度对激素反应的实验 | 第77-79页 |
3 实验结果 | 第79-91页 |
·低温条件阻碍植物从营养生长向生殖生长转化 | 第79-82页 |
·CBF1,2,3过表达植株开花时间延迟 | 第82-83页 |
·CBF1过表达不影响春化和光周期途径 | 第83-87页 |
·CBF1过表达植株的开花时间的推迟与春化途径无关 | 第83-85页 |
·CBF1的过表达对光周期途径没有影响 | 第85-87页 |
·CBF1过表达植株赤霉素的水平没有显著减低 | 第87-89页 |
·CBF1过表达植株中开花整合途径因子Leafy,SOC1表达水平下降,FT表达基本不变 | 第89-91页 |
4 讨论 | 第91-94页 |
结束语 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-105页 |
附录1 引物序列表 | 第105-107页 |
附录2 缩略词对照 | 第107-108页 |
致谢 | 第108页 |