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桃遗传转化再生体系的建立及果实特异性基因E8启动子的克隆

摘要第1-4页
Summary第4-6页
缩略词表第6-11页
前言第11-12页
第一章 文献综述第12-33页
 1 桃延熟保鲜研究进展第12-19页
   ·桃果实软化变质的影响因素第12-16页
     ·水解酶类第12-15页
     ·贮藏条件第15页
     ·植物激素第15-16页
   ·延长果实保鲜期的基因工程研究进展第16-19页
     ·利用S-腺苷甲硫氨酸水解酶基因延长果实保鲜期第17页
     ·利用ACC 合成酶和ACC 氧化酶基因延长果实保鲜期第17-18页
     ·利用ACC 脱氨酶基因延长果实保鲜期第18页
     ·利用多聚半乳糖醛酸酶基因(PG)延长果实保鲜期第18-19页
     ·利用其他基因延长果实保鲜期第19页
 2 植物基因启动子第19-27页
   ·植物基因启动子的一般特征第20-21页
     ·转录起始位点第20页
     ·TATA 盒第20-21页
     ·G 盒保守序列第21页
   ·植物基因启动子的类型第21-23页
     ·组成型启动子第21-22页
     ·组织特异性启动子第22页
     ·诱导型启动子第22页
     ·双向启动子第22页
     ·可变启动子第22-23页
   ·启动子的应用第23-24页
     ·组成型启动子的应用第23页
     ·组织特异启动子的应用第23页
     ·诱导型启动子的应用第23-24页
   ·已经分离克隆到的启动子及其表达特性第24页
   ·植物果实特异性启动子研究进展第24-27页
     ·E8 启动子第24-25页
     ·2A11/2A12 启动子第25页
     ·PG 启动子第25-26页
     ·MCPI 启动子第26页
     ·B33 启动子第26页
     ·ACC 氧化酶启动子第26-27页
 3 桃组织培养和离体转化研究进展第27-33页
   ·组织培养第28-31页
     ·外植体类型第28-29页
     ·愈伤组织的诱导与不定芽的分化第29页
     ·生根培养第29-31页
   ·遗传转化第31-33页
     ·农杆菌介导法转化桃第31-32页
     ·基因枪轰击法转化桃第32-33页
第二章 桃遗传转化再生体系的建立第33-42页
 1 桃遗传转化再生体系的建立技术路线第33页
 2 实验材料第33-34页
   ·材料第33页
   ·试剂第33页
   ·激素配置第33-34页
   ·培养基第34页
   ·实验仪器第34页
 3 实验方法第34-36页
   ·外植体的采集与消毒第34页
   ·培养条件第34页
   ·愈伤组织诱导第34-35页
     ·不同诱导培养基与不同品种对胚愈伤组织诱导的影响第34-35页
     ·不同胚龄胚对愈伤组织诱导的影响第35页
     ·不同外植体愈伤组织诱导效果第35页
   ·愈伤组织增殖第35页
     ·不同蔗糖浓度对胚愈伤组织增殖的效果第35页
   ·不定芽的分化与植株再生第35-36页
     ·激素配比对胚愈伤组织不定芽分化的影响第35-36页
     ·不同胚龄胚对愈伤组织不定芽再分化能力的影响第36页
   ·种胚直接诱导不定芽再生第36页
   ·实验数据统计第36页
 4 结果与分析第36-41页
   ·不同诱导培养基与不同品种对胚愈伤组织诱导的影响第36-37页
   ·激素对胚愈伤组织出愈率的影响第37-38页
   ·不同胚龄胚对愈伤组织诱导的影响第38-39页
   ·不同外植体愈伤组织诱导效果第39-40页
   ·不同蔗糖浓度对胚愈伤组织增殖的效果第40页
   ·激素配比对胚愈伤组织不定芽分化的影响第40-41页
   ·不同胚龄胚对愈伤组织不定芽再分化能力的影响第41页
   ·不同胚龄胚直接分化再生植株的能力第41页
   ·不定芽生根的诱导第41页
 5 讨论第41-42页
第三章 果实特异性E8 启动子的基因克隆第42-59页
 1 E8 启动子的基因克隆技术路线第42-43页
 2 实验材料第43-46页
   ·材料第43页
   ·试剂第43页
   ·质粒第43页
   ·菌株第43页
   ·引物设计第43页
   ·有关试剂及溶液配置第43-46页
     ·主要溶液第43-45页
     ·主要培养基第45-46页
   ·实验仪器第46页
 3 实验方法第46-54页
   ·番茄幼苗的培养第46页
   ·基因组DNA 提取第46-49页
     ·高盐低pH 值法第46-47页
     ·分步离心法第47页
     ·SDS 法第47-48页
     ·CTAB 法第48页
     ·本试验提取DNA 所用方法第48-49页
     ·琼脂糖凝胶电泳第49页
   ·目的基因的PCR 扩增第49-50页
     ·PCR 反应体系优化第49-50页
     ·PCR 扩增程序筛选第50页
     ·PCR 扩增产物的凝胶电泳观察第50页
   ·目的DNA 片段回收第50-51页
   ·目的片段的连接第51页
   ·感受态E.coli DH5α细胞的制备第51-52页
   ·E.coli DH5α的转化第52页
   ·重组子的筛选与鉴定第52-54页
     ·β-半乳糖苷基因插入失活筛选第52页
     ·碱裂解法小量提取质粒DNA第52-53页
     ·滞后质粒筛选第53页
     ·重组子的PCR 鉴定第53-54页
     ·重组子的Hind Ⅲ、BamH Ⅰ双酶切鉴定第54页
     ·重组子阳性克隆菌保存第54页
 4 实验结果及分析第54-57页
   ·基因组DNA 提取方法比较第54-56页
   ·PCR 反应体系优化结果第56页
   ·重组子滞后质粒筛选第56-57页
   ·滞后质粒PCR 鉴定第57页
   ·滞后质粒双酶切鉴定第57页
 5 讨论第57-59页
   ·启动子的选择第57-58页
   ·β-半乳糖苷基因插入失活的蓝白菌落筛选第58-59页
第四章 结论第59-60页
附图第60-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-70页
个人简介第70-71页
导师简介第71-72页

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