| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-29页 |
| ·植物病原细菌的致病机理研究 | 第11-16页 |
| ·主要的植物病原细菌 | 第11-13页 |
| ·病原细菌的侵染过程 | 第13-14页 |
| ·植物病原细菌的致病生化因子及致病相关基因 | 第14-16页 |
| ·双组分调控系统 | 第16-25页 |
| ·双组分调控系统的序列特征 | 第17-19页 |
| ·双组分调控系统的分布 | 第19页 |
| ·双组分调控系统的调控机理 | 第19-22页 |
| ·双组分调控系统的功能 | 第22-24页 |
| ·双组分调控系统是理想的药物候选靶标 | 第24-25页 |
| ·十字花科黑腐病菌及其双组分调控系统基因 | 第25-27页 |
| ·十字花科黑腐病菌 | 第25-26页 |
| ·十字花科黑腐病菌基因组注释的双组分调控系统基因 | 第26-27页 |
| ·已报道的Xcc双组分调控系统基因 | 第27页 |
| ·本研究的主要内容、目的和意义 | 第27-29页 |
| ·本研究的主要内容 | 第27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-49页 |
| ·研究用菌株和质粒 | 第29-30页 |
| ·常规微生物学操作 | 第30-34页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·培养条件 | 第31页 |
| ·菌株的保存 | 第31页 |
| ·常用抗生素 | 第31-32页 |
| ·突变体营养缺陷型检测 | 第32页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第32-33页 |
| ·胞外酶的检测 | 第33-34页 |
| ·Xcc生长曲线的测定 | 第34页 |
| ·分子操作技术 | 第34-47页 |
| ·常用试剂、溶液、缓冲液 | 第34-36页 |
| ·DNA分子生物学操作 | 第36-41页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第41-43页 |
| ·十字花科黑腐病菌总RNA提取 | 第43-45页 |
| ·细菌的转化与接合实验 | 第45-47页 |
| ·植株试验 | 第47-49页 |
| ·植株材料 | 第47页 |
| ·器皿与工具 | 第47页 |
| ·致病性试验 | 第47-48页 |
| ·过敏反应 | 第48-49页 |
| ·从叶片回收细菌及叶内生长曲线 | 第49页 |
| 第三章 Xcc基因组中colRS同源基因分析 | 第49-56页 |
| ·Xcc 8004基因组中colRS的同源基因 | 第49-51页 |
| ·colS和colR同源基因在Xcc 8004基因组中的遗传结构 | 第51页 |
| ·Xcc 8004 colS和colR同源基因编码ColS和ColR的结构域 | 第51-53页 |
| ·colRS同源基因产物保守结构域氨基酸序列多重比对 | 第53-54页 |
| ·Xcc 8004 colS同源基因产物的跨膜结构分析 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第四章 colRS同源基因突变体构建及其在寄主叶表定殖分析 | 第56-67页 |
| ·Xcc 8004 colRS同源基因突变体构建 | 第56-62页 |
| ·整合突变体构建的原理 | 第56-58页 |
| ·Xcc 8004 colRS同源基因整合突变体构建 | 第58-62页 |
| ·Xcc 8004 colRS同源基因突变体在寄主叶表定殖分析 | 第62-63页 |
| ·NK1049突变体的遗传互补 | 第63-66页 |
| ·互补载体的制备 | 第64页 |
| ·PCR扩增互补基因片段 | 第64-65页 |
| ·pLAFR3互补重组质粒的酶切验证 | 第65-66页 |
| ·互补菌株在寄主叶表定殖分析 | 第66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第五章 colR_(Xcc)突变体的基本生理、代谢表型 | 第67-73页 |
| ·NK1049不是营养缺陷型突变体 | 第67页 |
| ·colR_(Xcc)突变不影响Xcc 8004菌株的运动能力 | 第67-68页 |
| ·半固体培养基平板检测泳动 | 第67-68页 |
| ·显微观察细菌的运动 | 第68页 |
| ·colR_(Xcc)突变不影响Xcc胞外酶和胞外多糖的产生 | 第68-70页 |
| ·供试Xcc菌株菌液的准备 | 第68页 |
| ·胞外蛋白酶的检测 | 第68-69页 |
| ·胞外淀粉酶的检测 | 第69页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第69-70页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第70页 |
| ·生物膜形成检测 | 第70-71页 |
| ·NK1049突变体在液体培养基中的生长状况 | 第71-72页 |
| ·NK1049突变体膜的渗透性分析 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第六章 colR_(Xcc)与十字花科黑腐病菌的抗逆性有关 | 第73-75页 |
| ·NK1049抗重金属、有机溶剂、渗透压胁迫实验 | 第73页 |
| ·NK1049抗酸碱胁迫实验 | 第73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第七章 colR_(Xcc)与Xcc的致病性和HR反应相关 | 第75-78页 |
| ·NK1049对寄主植物的致病力显著降低 | 第75页 |
| ·NK1049在植物中的生长显著降低 | 第75-76页 |
| ·NK1049在非寄主植物辣椒ECW-10R的HR反应显著降低 | 第76-77页 |
| ·小结 | 第77-78页 |
| 第八章 colR_(Xcc)与hrp基因的表达调控关系 | 第78-82页 |
| ·RT-PCR验证colR_(Xcc)突变对hrp基因转录的影响 | 第78-79页 |
| ·colR_(Xcc)对hrpG和hrpX基因转录无明显影响 | 第79页 |
| ·colR_(Xcc)正调控hrpC和hrpE转录单元的表达 | 第79页 |
| ·hrpG或hrpX对colR_(Xcc)基因的表达无明显影响 | 第79页 |
| ·小结 | 第79-82页 |
| 第九章 讨论与结论 | 第82-86页 |
| ·colR_(Xcc)与Xcc的定殖有关 | 第82-83页 |
| ·colR_(Xcc)影响Xcc的抗逆性 | 第83页 |
| ·colR_(Xcc)影响Xcc的生长速率 | 第83页 |
| ·colR_(Xcc)影响Xcc侵染植物的能力 | 第83页 |
| ·colR_(Xcc)调节膜渗透性 | 第83-84页 |
| ·colR_(Xcc)可能调控hrp基因表达 | 第84页 |
| ·colR是一个重要的双组分调控系统基因 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-101页 |
| 附件 | 第101-109页 |
| 附表1 colR_(Xcc)突变体验证PCR产物测序 | 第101-105页 |
| 附表2 互补colR_(Xcc)DNA片段测序 | 第105-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
