中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-6页 |
第1章 绪论 | 第6-18页 |
·甘露聚糖酶概述 | 第6-11页 |
·大肠杆菌原核表达系统 | 第11-14页 |
·大肠杆菌pET 表达系统 | 第14-16页 |
·本研究的目的、意义和内容 | 第16-18页 |
第2章 材料与方法 | 第18-36页 |
·试验材料 | 第18-21页 |
·菌种和载体 | 第18页 |
·培养基 | 第18-19页 |
·所用试剂和试剂盒 | 第19-21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·试验方法 | 第22-36页 |
·甘露聚糖酶基因的克隆 | 第22-27页 |
·甘露聚糖酶融合表达载体的构建 | 第27-29页 |
·甘露聚糖酶融合表达菌株的构建 | 第29-30页 |
·生物信息学分析 | 第30-31页 |
·融合甘露聚糖酶的诱导表达 | 第31-34页 |
·融合甘露聚糖酶的纯化 | 第34-35页 |
·融合甘露聚糖酶酶学性质的研究 | 第35-36页 |
第3章 结果与分析 | 第36-65页 |
·甘露聚糖酶基因的克隆 | 第36-42页 |
·地衣芽孢杆菌 HDYM-04 基因组 DNA 的提取 | 第36页 |
·简并引物扩增甘露聚糖酶基因片段 | 第36-37页 |
·简并引物扩增甘露聚糖酶基因片段的克隆和鉴定 | 第37-38页 |
·PCR 扩增甘露聚糖酶基因片段 | 第38-40页 |
·PCR 产物的鉴定 | 第40-42页 |
·甘露聚糖酶融合表达载体的构建 | 第42-44页 |
·重组载体 T-man2 的提取 | 第42-43页 |
·pET28a 融合表达载体的构建 | 第43-44页 |
·甘露聚糖酶融合表达菌株的构建 | 第44-46页 |
·融合甘露聚糖酶的生物信息学分析 | 第46-57页 |
·开放阅读框分析 | 第46-48页 |
·同源性分析 | 第48-49页 |
·一级结构分析 | 第49-53页 |
·二级结构分析 | 第53-56页 |
·三级结构分析 | 第56-57页 |
·融合甘露聚糖酶的诱导表达 | 第57-62页 |
·融合甘露聚糖酶表达菌株的筛选 | 第57-58页 |
·融合甘露聚糖酶诱导表达条件的研究 | 第58-62页 |
·融合甘露聚糖酶的纯化 | 第62-63页 |
·甘露聚糖酶酶学性质的研究 | 第63-65页 |
·酶的分子量分析 | 第63页 |
·温度和pH 对酶活力的影响 | 第63-64页 |
·酶的热稳定性和pH 稳定性分析 | 第64-65页 |
第4章 讨论 | 第65-69页 |
结论 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
附录 | 第77-82页 |