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利用融合标签纯化和表达β-甘露聚糖酶

中文摘要第1-3页
英文摘要第3-6页
第1章 绪论第6-18页
   ·甘露聚糖酶概述第6-11页
   ·大肠杆菌原核表达系统第11-14页
   ·大肠杆菌pET 表达系统第14-16页
   ·本研究的目的、意义和内容第16-18页
第2章 材料与方法第18-36页
   ·试验材料第18-21页
     ·菌种和载体第18页
     ·培养基第18-19页
     ·所用试剂和试剂盒第19-21页
   ·主要仪器设备第21-22页
   ·试验方法第22-36页
     ·甘露聚糖酶基因的克隆第22-27页
     ·甘露聚糖酶融合表达载体的构建第27-29页
     ·甘露聚糖酶融合表达菌株的构建第29-30页
     ·生物信息学分析第30-31页
     ·融合甘露聚糖酶的诱导表达第31-34页
     ·融合甘露聚糖酶的纯化第34-35页
     ·融合甘露聚糖酶酶学性质的研究第35-36页
第3章 结果与分析第36-65页
   ·甘露聚糖酶基因的克隆第36-42页
     ·地衣芽孢杆菌 HDYM-04 基因组 DNA 的提取第36页
     ·简并引物扩增甘露聚糖酶基因片段第36-37页
     ·简并引物扩增甘露聚糖酶基因片段的克隆和鉴定第37-38页
     ·PCR 扩增甘露聚糖酶基因片段第38-40页
     ·PCR 产物的鉴定第40-42页
   ·甘露聚糖酶融合表达载体的构建第42-44页
     ·重组载体 T-man2 的提取第42-43页
     ·pET28a 融合表达载体的构建第43-44页
   ·甘露聚糖酶融合表达菌株的构建第44-46页
   ·融合甘露聚糖酶的生物信息学分析第46-57页
     ·开放阅读框分析第46-48页
     ·同源性分析第48-49页
     ·一级结构分析第49-53页
     ·二级结构分析第53-56页
     ·三级结构分析第56-57页
   ·融合甘露聚糖酶的诱导表达第57-62页
     ·融合甘露聚糖酶表达菌株的筛选第57-58页
     ·融合甘露聚糖酶诱导表达条件的研究第58-62页
   ·融合甘露聚糖酶的纯化第62-63页
   ·甘露聚糖酶酶学性质的研究第63-65页
     ·酶的分子量分析第63页
     ·温度和pH 对酶活力的影响第63-64页
     ·酶的热稳定性和pH 稳定性分析第64-65页
第4章 讨论第65-69页
结论第69-70页
致谢第70-71页
参考文献第71-77页
附录第77-82页

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