中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
第一章 引言和文献综述 | 第10-38页 |
·引言 | 第10页 |
·转录因子与心脏发育 | 第10-18页 |
·转录因子的特点及主要类型 | 第10-13页 |
·与心脏发育密切相关的几种转录因子 | 第13-18页 |
·锌指蛋白家族与心脏发育 | 第18-29页 |
·锌指转录因子的主要特点 | 第18-22页 |
·锌指转录因子的主要类型 | 第22-24页 |
·锌指蛋白基因在心脏发育过程中的作用 | 第24-29页 |
·MAPK信号途径与心脏发育 | 第29-37页 |
·MAPK家族简述 | 第30-33页 |
·MAPK作用机制 | 第33-35页 |
·MAPK与心脏发育的关系 | 第35-37页 |
·本文研究的意义 | 第37-38页 |
第二章 实验材料和方法 | 第38-62页 |
·实验材料 | 第38-43页 |
·生物信息学软件和数据库 | 第38-39页 |
·主要的基因工程酶和试剂盒 | 第39-40页 |
·细胞、菌株和质粒 | 第40-41页 |
·缓冲液、培养基和重要试剂 | 第41-42页 |
·主要实验仪器 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-62页 |
·总RNA提取 | 第43-44页 |
·人类胚胎心脏cDNA文库的构建 | 第44页 |
·巢式PCR(nest PCR)扩增开放阅读框 | 第44-45页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第45-46页 |
·PCR产物与T-载体的连接 | 第46页 |
·感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
·转化(热休克法) | 第47页 |
·质粒的小量制备 | 第47-48页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第48-49页 |
·测序 | 第49页 |
·ZNF552 5’-RACE和3’-RACE的扩增 | 第49-51页 |
·Northern blot | 第51-52页 |
·反转录RT-PCR | 第52-53页 |
·荧光亚细胞定位分析 | 第53-56页 |
·ZNF552基因的信号途径report assay分析 | 第56-62页 |
第三章 ZNF552的研究结果 | 第62-80页 |
·ZNF552基因的克隆 | 第62-65页 |
·ZNF552开放阅读框(ORF)的克隆 | 第62页 |
·ZNF552相关载体的构建 | 第62-65页 |
·生物信息学分析ZNF552蛋白质序列的结构、功能及其家族蛋白同源性 | 第65-70页 |
·ZNF552基因的基因组结构分析 | 第65-66页 |
·ZNF552基因及蛋白结构特点 | 第66-68页 |
·ZNF552与同源基因编码蛋白的同源性比较及进化分析 | 第68-69页 |
·生物信息学预测ZNF552的表达情况 | 第69-70页 |
·ZNF552的表达分析 | 第70-72页 |
·ZNF552的亚细胞定位分析 | 第72页 |
·ZNF552蛋白的转录活性分析 | 第72-75页 |
·ZNF552是转录抑制因子 | 第72-74页 |
·ZNF552主要通过其KRAB框起转录抑制作用 | 第74-75页 |
·RNAi对ZNF552蛋白转录活性的影响 | 第75-77页 |
·论讨 | 第77-80页 |
第四章 其他方面的工作 | 第80-88页 |
·人类基因POPDC2的相关工作 | 第80-84页 |
·人类基因POPDC2的克隆及相关载体的构建 | 第80-81页 |
·POPDC2蛋白多克隆抗体的制备 | 第81-83页 |
·POPDC2稳定转染细胞系的建立 | 第83-84页 |
·人类基因TRIM45的相关工作 | 第84-88页 |
参考文献 | 第88-98页 |
附录1 | 第98-99页 |
附录2 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-102页 |