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人类锌指蛋白家族新基因ZNF552的克隆与功能研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-10页
第一章 引言和文献综述第10-38页
   ·引言第10页
   ·转录因子与心脏发育第10-18页
     ·转录因子的特点及主要类型第10-13页
     ·与心脏发育密切相关的几种转录因子第13-18页
   ·锌指蛋白家族与心脏发育第18-29页
     ·锌指转录因子的主要特点第18-22页
     ·锌指转录因子的主要类型第22-24页
     ·锌指蛋白基因在心脏发育过程中的作用第24-29页
   ·MAPK信号途径与心脏发育第29-37页
     ·MAPK家族简述第30-33页
     ·MAPK作用机制第33-35页
     ·MAPK与心脏发育的关系第35-37页
   ·本文研究的意义第37-38页
第二章 实验材料和方法第38-62页
   ·实验材料第38-43页
     ·生物信息学软件和数据库第38-39页
     ·主要的基因工程酶和试剂盒第39-40页
     ·细胞、菌株和质粒第40-41页
     ·缓冲液、培养基和重要试剂第41-42页
     ·主要实验仪器第42-43页
   ·实验方法第43-62页
     ·总RNA提取第43-44页
     ·人类胚胎心脏cDNA文库的构建第44页
     ·巢式PCR(nest PCR)扩增开放阅读框第44-45页
     ·PCR产物的纯化回收第45-46页
     ·PCR产物与T-载体的连接第46页
     ·感受态细胞的制备第46-47页
     ·转化(热休克法)第47页
     ·质粒的小量制备第47-48页
     ·阳性克隆的筛选与鉴定第48-49页
     ·测序第49页
     ·ZNF552 5’-RACE和3’-RACE的扩增第49-51页
     ·Northern blot第51-52页
     ·反转录RT-PCR第52-53页
     ·荧光亚细胞定位分析第53-56页
     ·ZNF552基因的信号途径report assay分析第56-62页
第三章 ZNF552的研究结果第62-80页
     ·ZNF552基因的克隆第62-65页
     ·ZNF552开放阅读框(ORF)的克隆第62页
     ·ZNF552相关载体的构建第62-65页
   ·生物信息学分析ZNF552蛋白质序列的结构、功能及其家族蛋白同源性第65-70页
     ·ZNF552基因的基因组结构分析第65-66页
     ·ZNF552基因及蛋白结构特点第66-68页
     ·ZNF552与同源基因编码蛋白的同源性比较及进化分析第68-69页
     ·生物信息学预测ZNF552的表达情况第69-70页
   ·ZNF552的表达分析第70-72页
   ·ZNF552的亚细胞定位分析第72页
   ·ZNF552蛋白的转录活性分析第72-75页
     ·ZNF552是转录抑制因子第72-74页
     ·ZNF552主要通过其KRAB框起转录抑制作用第74-75页
   ·RNAi对ZNF552蛋白转录活性的影响第75-77页
   ·论讨第77-80页
第四章 其他方面的工作第80-88页
   ·人类基因POPDC2的相关工作第80-84页
     ·人类基因POPDC2的克隆及相关载体的构建第80-81页
     ·POPDC2蛋白多克隆抗体的制备第81-83页
     ·POPDC2稳定转染细胞系的建立第83-84页
   ·人类基因TRIM45的相关工作第84-88页
参考文献第88-98页
附录1第98-99页
附录2第99-100页
致谢第100-102页

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