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平邑甜茶MhWRKY15基因的克隆及表达分析

英文缩写符号及其中英文对照表第1-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-23页
   ·WRKY 的结构特征及其分类第12-13页
   ·WRKY 转录因子的结构域第13-14页
   ·WRKY 转录因子的表达及其生物学功能第14-20页
     ·WRKY 转录因子的表达特性第14-15页
     ·WRKY 转录因子在植物防卫反应中的作用第15-17页
     ·WRKY 转录因子在植物形态建成中的作用第17页
     ·WRKY 转录因子在植物代谢中的作用第17-18页
     ·WRKY 与MAPK 相互作用关系第18-20页
   ·果树转录因子研究进展第20-22页
   ·本研究目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-37页
   ·试验材料第23-24页
     ·试材第23页
     ·菌株与质粒第23页
     ·酶及生化试剂第23页
     ·PCR 引物第23-24页
   ·试验方法第24-37页
     ·平邑甜茶总RNA 的提取第24-25页
     ·RT-PCR 反转录合成cDNA第25-26页
     ·MhWRKY15 全长序列的扩增第26-31页
       ·巢式PCR 扩增MhWRKY15 中间片段第26-27页
       ·3’-RACE 扩增3’端序列第27页
       ·5’-RACE 获得5’端序列第27-31页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第31-32页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第31-32页
     ·碱法小量质粒DNA 的提取第32页
     ·凝胶电泳中DNA 片段的回收第32-33页
     ·质粒DNA 的酶切鉴定第33页
     ·DNA 序列测定第33页
     ·pFGC5941-RNAi-MhWRKY15 表达载体的构建第33-34页
     ·拟南芥转化及转化植株的PCR 鉴定第34-35页
     ·pCAMBIA1390-MhWRKY15-GFP 表达载体的构建第35页
     ·根癌农杆菌GV3101 和EHA105 感受态细胞的制备与转化第35-36页
       ·根癌农杆菌感受态细胞制备第35-36页
       ·冻融法转化农杆菌第36页
     ·半定量RT-PCR 分析第36页
     ·生物信息学分析第36-37页
3 结果与分析第37-51页
   ·平邑甜茶MhWRKY15 基因克隆与序列分析第37-44页
     ·MhWRKY15 基因的分离第37-38页
       ·MhWRKY15 中间片段的分离第37页
       ·MhWRKY 15 3’片段的分离第37页
       ·MhWRKY 15 5’片段的分离第37页
       ·MhWRKY15 全长cDNA 的分离第37-38页
     ·平邑甜茶MhWRKY15 基因的序列分析第38-39页
     ·平邑甜茶MhWRKY15 编码蛋白的系统发生分析第39-41页
       ·蛋白保守域分析第39页
       ·系统进化树分析第39页
       ·部分植物WRKY 蛋白序列多重比对第39-41页
     ·平邑甜茶MhWRKY15 编码蛋白的性质及结构分析第41-44页
       ·理化性质分析第41页
       ·跨膜区域分析第41-42页
       ·信号肽分析第42页
       ·疏水性分析第42-43页
       ·修饰位点分析第43页
       ·二级结构及三级结构预测第43-44页
   ·平邑甜茶MhWRKY15 蛋白的亚细胞定位第44-46页
     ·pCAMBIA1390-MhWRKY15-GFP 表达载体的构建及亚细胞定位第44页
     ·MhWRKY15 蛋白亚细胞定位的生物信息学预测第44-46页
   ·平邑甜茶MhWRKY15 RNA 干扰载体的构建及拟南芥转化第46-49页
     ·目的片段的克隆及重组子鉴定第46页
     ·RNA 干扰载体的鉴定第46-49页
   ·平邑甜茶MhWRKY15 基因的表达分析第49-51页
     ·平邑甜茶根系中MhWRKY15 基因在不同胁迫下的表达分析第49-50页
     ·平邑甜茶MhWRKY15 基因在不同发育期的表达分析第50-51页
4 讨论第51-53页
   ·平邑甜茶MhWRKY15 基因的生物信息学分析及表达特性第51-52页
   ·平邑甜茶MhWRKY15 基因RNA 干扰载体的构建及拟南芥转化第52-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
攻读硕士学位期间完成论文情况第62-63页
硕士学位论文内容简介及自评第63页

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