| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号及缩略语 | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-30页 |
| 前言 | 第12页 |
| 1 植物内生菌概况 | 第12-18页 |
| ·植物内生菌的概念及研究历史 | 第12-13页 |
| ·植物内生菌的分离和培养 | 第13页 |
| ·植物内生菌的生物多样性 | 第13-15页 |
| ·植物内生菌之间及其与宿主植物之间的关系 | 第15-16页 |
| ·植物内生菌与宿主植物的关系 | 第16页 |
| ·植物内生菌之间的相互关系 | 第16页 |
| ·植物内生菌的作用 | 第16-18页 |
| ·在非豆科植物中内生固氮作用 | 第16-17页 |
| ·促植物生长作用 | 第17页 |
| ·增强宿主植物抗逆境、抗病虫害等作用 | 第17-18页 |
| ·外源基因载体 | 第18页 |
| 2 植物内生菌的开发和应用 | 第18-27页 |
| ·植物内生菌在医药领域的开发和应用 | 第18-25页 |
| ·抗生素的开发 | 第18-20页 |
| ·抗肿瘤活性物质的开发 | 第20-23页 |
| ·抗糖尿病的活性物质 | 第23页 |
| ·抗疟原虫，抗结核类的活性物质 | 第23页 |
| ·免疫抑制剂 | 第23-24页 |
| ·抗氧化剂 | 第24-25页 |
| ·抗病毒类活性化合物 | 第25页 |
| ·植物内生菌在涉农领域的开发和应用 | 第25-27页 |
| ·杀虫类活性物质 | 第26-27页 |
| ·植物生长调节物质 | 第27页 |
| 3 植物内生菌产生活性代谢产物的理论研究 | 第27-28页 |
| ·生物间的“基因水平传递”及“内共生理论” | 第27-28页 |
| ·生物之间的相互作用和“协同进化” | 第28页 |
| 4 立题依据 | 第28-29页 |
| 5 本实验拟采用的技术线路 | 第29-30页 |
| 第二篇 试验部分 | 第30-81页 |
| 第一章 植物内生真菌活性菌株的筛选 | 第30-46页 |
| 1 试验材料 | 第30-32页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·主要实验试剂 | 第30-31页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第31页 |
| ·主要培养基 | 第31-32页 |
| ·肿瘤细胞株 | 第32页 |
| ·抗菌模型指示菌株 | 第32页 |
| 2. 试验方法 | 第32-35页 |
| ·筛选样品的制备 | 第32-34页 |
| ·菌种的纯化与复壮 | 第32页 |
| ·筛选样品的制备 | 第32-34页 |
| ·菌株发酵样品的筛选模型 | 第34-35页 |
| ·抗肿瘤细胞筛选模型 | 第34-35页 |
| ·抗菌筛选模型 | 第35页 |
| 3 试验结果 | 第35-44页 |
| ·筛选样品制备结果 | 第35页 |
| ·抗肿瘤细胞模型活性菌株初筛结果 | 第35-41页 |
| ·抗肿瘤细胞模型活性菌株复筛结果 | 第41-42页 |
| ·抗菌模型筛选结果 | 第42-44页 |
| 4 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第二章 植物内生真菌HCCB1621的分类鉴定 | 第46-58页 |
| 1. 试验材料 | 第46-48页 |
| ·菌株 | 第46页 |
| ·主要培养基 | 第46-47页 |
| ·主要试剂 | 第47-48页 |
| ·仪器设备 | 第48页 |
| 2 试验方法 | 第48-51页 |
| ·菌株HCCB1621的形态学鉴定 | 第48-49页 |
| ·菌体形态特征的观察 | 第48页 |
| ·菌株培养特征的变化 | 第48页 |
| ·菌株的生理生化特性 | 第48-49页 |
| ·菌株显微特征的电镜观察 | 第49页 |
| ·菌株HCCB1621的分子鉴定 | 第49-51页 |
| ·染色体 DNA的提取 | 第49-50页 |
| ·PCR扩增引物的合成 | 第50页 |
| ·18S rDNA和ITS序列 PCR扩增体系 | 第50-51页 |
| ·PCR扩增条件 | 第51页 |
| ·系统发育分析 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-56页 |
| ·菌株HCCB1621的生长速度考察 | 第51-52页 |
| ·菌株HCCB1621的形态、培养特征 | 第52-53页 |
| ·菌株的生理生化特性 | 第53-54页 |
| ·HCCB1621染色体DNA的制备及18S rDNA和ITS序列的PCR | 第54-55页 |
| ·菌株HCCB1621的系统发育分析及鉴定结果 | 第55-56页 |
| 4 小结与讨论 | 第56-58页 |
| 第三章 菌株 HCCB1621代谢产物的分离 | 第58-81页 |
| 1 试验材料 | 第58-59页 |
| ·菌株 | 第58页 |
| ·主要培养基 | 第58页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·各类树脂 | 第58-59页 |
| ·主要仪器设备 | 第59页 |
| 2. 实验方法 | 第59-64页 |
| ·发酵代谢产物的基本特性探索 | 第59-60页 |
| ·HCCB1621的二级发酵培养 | 第59页 |
| ·代谢产物活性的跟踪检测方法 | 第59页 |
| ·代谢产物活性的稳定性试验 | 第59-60页 |
| ·5升发酵罐中的发酵参数测定 | 第60页 |
| ·溶媒萃取活性的测定 | 第60页 |
| ·发酵代谢产物分离纯化方法的探索 | 第60-61页 |
| ·活性代谢产物的树脂分离 | 第60-61页 |
| ·薄层层析法(TLC)的探索 | 第61-62页 |
| ·显色方法的探索 | 第61-62页 |
| ·展开体系的探索 | 第62页 |
| ·产物的分离 | 第62-64页 |
| ·运用树脂初步分离 | 第62-63页 |
| ·运用硅胶初步分离 | 第63-64页 |
| ·粗品的进一步纯化 | 第64页 |
| ·样品的理化性质及化学结构解析 | 第64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-79页 |
| ·发酵代谢产物的基本特性 | 第64-67页 |
| ·菌株发酵代谢曲线的测定结果 | 第64-65页 |
| ·不同pH对代谢产物活性稳定性的影响 | 第65页 |
| ·不同处理温度对代谢产物活性稳定性的影响 | 第65-66页 |
| ·5升发酵罐发酵工艺参数的跟踪测定 | 第66-67页 |
| ·发酵代谢产物分离纯化的探索 | 第67-69页 |
| ·溶媒萃取试验结果 | 第67页 |
| ·树脂的静态吸附小试 | 第67-68页 |
| ·大孔吸附树脂 XAD-1600的动态吸附 | 第68-69页 |
| ·TLC检测及柱层析条件的确定 | 第69-70页 |
| ·菌株HCCB1621代谢产物的研究 | 第70-79页 |
| ·化合物HCCB1621-1的分离纯化与结构鉴定 | 第70-73页 |
| ·化合物HCCB1621-2的分离纯化与结构鉴定 | 第73-75页 |
| ·化合物HCCB1621-3的分离与结构鉴定 | 第75-76页 |
| ·化合物HCCB1621-4的分离纯化与结构鉴定 | 第76-78页 |
| ·化合物HCCB1621-5的分离纯化与分子量的确定 | 第78-79页 |
| 4. 小结与讨论 | 第79-81页 |
| 全文总结 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 本论文创新之处 | 第87-88页 |
| 硕士研究生阶段发表论文 | 第88-89页 |
| 附录 | 第89-97页 |