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水稻OsAS2基因的分离及其在拟南芥和水稻中的功能分析

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-16页
1 前言第16-38页
   ·苗端分生组织与叶原基的起始第16-18页
   ·叶极性的建立第18-33页
     ·胚胎中的极性建立第18-20页
     ·叶的极性建立第20-33页
   ·KNOX 基因与叶形态发育第33-36页
     ·AS2 与KNOX 基因第33-34页
     ·KNOX 基因的表达与叶的形态建成第34-36页
   ·其他因素与叶的发育第36-37页
   ·本研究的目的和意义第37-38页
2 材料与方法第38-55页
   ·实验材料第38-39页
     ·植物材料及其生长条件第38页
     ·菌株与质粒第38页
     ·酶及生化试剂第38页
     ·PCR引物第38-39页
   ·实验方法第39-55页
     ·植物组织总RNA 的提取第39-40页
     ·反转录 cDNA 第一链的合成第40页
     ·PCR 扩增第40页
     ·连接反应第40-41页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第41-42页
     ·碱法小量质粒DNA 的提取第42页
     ·DNA 序列测定第42-43页
     ·根癌农杆菌 GV3101 或 EHA105 感受态细胞的制备与转化第43页
     ·目的基因 OsAS2 及 OsLOB1 的分离第43-44页
     ·半定量PCR第44页
     ·原位杂交第44-49页
     ·表达载体的构建第49-51页
     ·拟南芥的无土栽培、转化第51页
     ·植物基因组DNA 的提取第51-52页
     ·石蜡切片第52-53页
     ·农杆菌介导的水稻转化第53-54页
     ·转基因植株的RT-PCR 半定量检测第54-55页
3 结果与分析第55-75页
   ·OsAS2 基因的分离第55页
   ·OsAS2 核苷酸序列以及推导的氨基酸序列第55-57页
   ·OsAS2 基因的氨基酸序列分析第57-59页
   ·OsAS2 表达产物二级结构预测第59页
   ·OsAS2 基因的时空表达情况第59-61页
   ·35S::OsAS2 表达载体的构建第61-65页
   ·ubi::OsAS2 及ubi::anti-OsAS2 表达载体的构建第65-75页
     ·过量表达OsAS2 的水稻愈伤组织的绿色芽点分化延迟第65-68页
     ·OsAS2 的表达促进水稻愈伤组织细胞分裂抑制了细胞的分化第68-69页
     ·OsAS2 的过表达促进水稻愈伤组织细胞分裂相关基因的表达第69-70页
     ·OsAS2 的过量表达提高了水稻愈伤组织中OSH1 及OsWOX3 的水平第70-71页
     ·OsLOB1 基因的分离及表达模式的分析第71-75页
4 讨论第75-79页
   ·OsAS2 是水稻 LOB-Domain 基因家族成员,为拟南芥 AS2 的同源基因第75页
   ·OsAS2在苗端分生组织和侧生器官中表达第75-76页
   ·OsAS2过表达影响拟南芥苗端分生组织和侧生器官的正常发育第76页
   ·OsAS2的过表达促进水稻愈伤组织细胞的分裂,同时抑制细胞的分化第76-77页
   ·OsAS2通过调节相关基因表达,维持苗端分生组织和侧生器官的正常发育第77-78页
   ·OsLOB1属于水稻LOB-Domain基因家族成员第78-79页
5 结论第79-80页
参考文献第80-94页
附录第94-99页
致谢第99页

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