中文摘要 | 第1-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
1 前言 | 第16-38页 |
·苗端分生组织与叶原基的起始 | 第16-18页 |
·叶极性的建立 | 第18-33页 |
·胚胎中的极性建立 | 第18-20页 |
·叶的极性建立 | 第20-33页 |
·KNOX 基因与叶形态发育 | 第33-36页 |
·AS2 与KNOX 基因 | 第33-34页 |
·KNOX 基因的表达与叶的形态建成 | 第34-36页 |
·其他因素与叶的发育 | 第36-37页 |
·本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
2 材料与方法 | 第38-55页 |
·实验材料 | 第38-39页 |
·植物材料及其生长条件 | 第38页 |
·菌株与质粒 | 第38页 |
·酶及生化试剂 | 第38页 |
·PCR引物 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-55页 |
·植物组织总RNA 的提取 | 第39-40页 |
·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第40页 |
·PCR 扩增 | 第40页 |
·连接反应 | 第40-41页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第41-42页 |
·碱法小量质粒DNA 的提取 | 第42页 |
·DNA 序列测定 | 第42-43页 |
·根癌农杆菌 GV3101 或 EHA105 感受态细胞的制备与转化 | 第43页 |
·目的基因 OsAS2 及 OsLOB1 的分离 | 第43-44页 |
·半定量PCR | 第44页 |
·原位杂交 | 第44-49页 |
·表达载体的构建 | 第49-51页 |
·拟南芥的无土栽培、转化 | 第51页 |
·植物基因组DNA 的提取 | 第51-52页 |
·石蜡切片 | 第52-53页 |
·农杆菌介导的水稻转化 | 第53-54页 |
·转基因植株的RT-PCR 半定量检测 | 第54-55页 |
3 结果与分析 | 第55-75页 |
·OsAS2 基因的分离 | 第55页 |
·OsAS2 核苷酸序列以及推导的氨基酸序列 | 第55-57页 |
·OsAS2 基因的氨基酸序列分析 | 第57-59页 |
·OsAS2 表达产物二级结构预测 | 第59页 |
·OsAS2 基因的时空表达情况 | 第59-61页 |
·35S::OsAS2 表达载体的构建 | 第61-65页 |
·ubi::OsAS2 及ubi::anti-OsAS2 表达载体的构建 | 第65-75页 |
·过量表达OsAS2 的水稻愈伤组织的绿色芽点分化延迟 | 第65-68页 |
·OsAS2 的表达促进水稻愈伤组织细胞分裂抑制了细胞的分化 | 第68-69页 |
·OsAS2 的过表达促进水稻愈伤组织细胞分裂相关基因的表达 | 第69-70页 |
·OsAS2 的过量表达提高了水稻愈伤组织中OSH1 及OsWOX3 的水平 | 第70-71页 |
·OsLOB1 基因的分离及表达模式的分析 | 第71-75页 |
4 讨论 | 第75-79页 |
·OsAS2 是水稻 LOB-Domain 基因家族成员,为拟南芥 AS2 的同源基因 | 第75页 |
·OsAS2在苗端分生组织和侧生器官中表达 | 第75-76页 |
·OsAS2过表达影响拟南芥苗端分生组织和侧生器官的正常发育 | 第76页 |
·OsAS2的过表达促进水稻愈伤组织细胞的分裂,同时抑制细胞的分化 | 第76-77页 |
·OsAS2通过调节相关基因表达,维持苗端分生组织和侧生器官的正常发育 | 第77-78页 |
·OsLOB1属于水稻LOB-Domain基因家族成员 | 第78-79页 |
5 结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-94页 |
附录 | 第94-99页 |
致谢 | 第99页 |