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流体切应力和血管平滑肌细胞诱导联合培养内皮祖细胞的分化及p-Akt的调控作用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第1章 绪论第14-21页
 1 内皮祖细胞的概念第14-15页
 2 内皮祖细胞的功能及应用第15-16页
   ·心肌梗塞治疗第15页
   ·肢体缺血治疗第15页
   ·基因工程中作为基因载体第15-16页
   ·参与组织工程血管的构建第16页
 3 内皮祖细胞参与修复损伤内皮的机制第16页
 4 影响内皮祖细胞黏附、增殖及分化的因素第16-19页
   ·生长因子第16-17页
   ·药物及化学因素第17-18页
   ·邻近细胞的影响第18页
   ·力学因素的影响第18-19页
 5 Akt 信号通路第19-21页
第2章 流体切应力和血管平滑肌细胞诱导联合培养内皮祖细胞分化及p-Akt 的调控作用第21-46页
 1 引言第21页
 2 实验材料及仪器第21-26页
   ·实验仪器第21-22页
   ·试剂第22-23页
   ·主要溶液成分及配制第23-26页
 3 实验方法第26-33页
   ·人脐血内皮祖细胞和脐静脉血管平滑肌细胞的培养第26-28页
   ·血管平滑肌细胞和内皮祖细胞的联合培养模型第28页
   ·用于内皮祖细胞和血管平滑肌细胞的平行平板流动腔系统第28-31页
   ·实验分组第31-32页
   ·6孔培养板的预处理第32页
   ·蛋白提取第32页
   ·蛋白免疫印迹实验(Western blot)第32-33页
   ·流式细胞仪检测细胞表面标志CD133, CD34, CD31, vWF 的表达第33页
   ·统计学分析第33页
 4 实验结果第33-42页
   ·原代培养的内皮祖细胞和血管平滑肌细胞形态观察第33-35页
   ·原代培养的内皮祖细胞鉴定第35-36页
   ·原代培养血管平滑肌细胞的鉴定第36页
   ·血管平滑肌细胞及流体切应力单因素和联合作用诱导内皮祖细胞形态学的改变第36-37页
   ·血管平滑肌细胞对细胞表面标志表达率的影响第37-38页
   ·单独培养条件下,切应力促进内皮细胞表面标志的表达;联合培养条件下,流体切应力的促进作用更为明显第38-40页
   ·血管平滑肌细胞和切应力促进Akt 活化第40-41页
   ·Akti 抑制了联合培养条件下切应力诱导的内皮祖细胞的分化第41-42页
 5 讨论第42-46页
   ·血管平滑肌细胞和流体切应力诱导了内皮祖细胞形态学的改变第42-44页
   ·血管平滑肌细胞和流体切应力诱导内皮祖细胞分化机制的探讨第44-46页
第3章 血管平滑肌细胞对联合培养内皮祖细胞黏附和增殖的影响第46-52页
 1 引言第46页
 2 实验材料第46-47页
   ·实验仪器第46-47页
   ·试剂第47页
   ·主要溶液成分及配制第47页
 3 实验方法第47-49页
   ·细胞培养以及血管平滑肌细胞和内皮祖细胞的联合培养模型第47-48页
   ·实验分组第48页
   ·盖玻片的预处理第48页
   ·细胞黏附实验第48页
   ·克隆形成单位计数第48-49页
   ·统计学分析第49页
 4 实验结果第49-50页
   ·血管平滑肌细胞和内皮祖细胞的鉴定第49页
   ·血管平滑肌细胞促进内皮祖细胞的黏附第49-50页
   ·联合培养的平滑肌细胞抑制了内皮祖细胞的增殖第50页
 5 讨论第50-52页
   ·血管平滑肌细胞对联合培养内皮祖细胞黏附的影响第50-51页
   ·血管平滑肌细胞对联合培养内皮祖细胞增殖的影响第51-52页
全文小结第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-60页
学习期间已完成或发表的学术论文第60页

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