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β-防御素-5 mRNA在荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞中的表达

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
1 引言第7-16页
   ·奶牛乳腺炎及防控研究进展第7-9页
     ·引起乳腺炎的病原第7页
     ·乳腺的自身免疫生理调节第7-8页
     ·乳腺炎的防控第8-9页
   ·β-防御素的研究进展第9-14页
     ·β-防御素的发现及分类第9-10页
     ·β-防御素的分布第10-11页
     ·β-防御素的分子结构第11-12页
     ·β-防御素的作用机制及生物活性第12-13页
     ·β-防御素的应用前景第13-14页
   ·大肠杆菌乳腺炎与脂多糖模型第14-16页
     ·大肠杆菌乳腺炎研究现状第14页
     ·脂多糖第14-15页
     ·奶牛乳腺上皮细胞脂多糖模型第15-16页
   ·本研究的目的及意义第16页
2 材料与方法第16-23页
   ·实验材料第16-17页
     ·实验动物及组织第16-17页
     ·药品与试剂第17页
     ·仪器设备第17页
   ·实验方法第17-23页
     ·乳腺上皮细胞原代培养第17-18页
     ·乳腺上皮细胞的纯化及传代培养第18页
     ·乳腺上皮细胞冻存和解冻复苏培养第18-19页
     ·生长曲线绘制第19页
     ·上皮细胞中期分裂相染色体的制备与核型分析第19页
     ·药物干预实验第19页
     ·PCR 引物的设计与合成第19-20页
     ·荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞总 RNA 的提取第20-21页
     ·实时荧光定量 RT-PCR 反应第21-23页
     ·PCR 产物电泳检测及序列测定第23页
     ·数据统计分析第23页
3 结果与分析第23-33页
   ·奶牛乳腺上皮细胞的原代培养第23-24页
   ·乳腺上皮细胞的纯化和传代第24页
   ·奶牛乳腺上皮细胞的生长曲线第24-25页
   ·乳腺上皮细胞核型分析第25页
   ·奶牛乳腺上皮细胞总 RNA 提取检测第25-26页
   ·荧光定量 RT-PCR 检测结果第26-30页
   ·荧光定量 RT-PCR 产物的电泳检测结果第30-31页
   ·添加脂多糖后乳腺上皮细胞中细胞因子的mRNA 表达量差异第31-32页
   ·正常和炎性乳腺上皮细胞中 BNBD5 mRNA 的表达差异第32-33页
4 讨论第33-34页
5 结论第34-35页
致谢第35-36页
参考文献第36-42页
附录第42-45页
作者简历第45页

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