新型融合抗菌肽基因重组真核质粒的构建及抗菌活性研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一部分 ECD抗菌肽融合基因重组真核质粒的构建 | 第15-28页 |
| 1. 引言 | 第15-16页 |
| 2. 材料和方法 | 第16-23页 |
| ·材料 | 第16-18页 |
| ·质粒和宿主菌 | 第16-17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-23页 |
| ·抗菌肽融合基因片段的制备 | 第18-20页 |
| ·载体片段的制备 | 第20-21页 |
| ·抗菌肽融合基因目标片段克隆到VR1020载体中 | 第21页 |
| ·连接产物的转化 | 第21-22页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第22-23页 |
| ·重组质粒中插入片段的序列测定及结果分析 | 第23页 |
| 3 结果 | 第23-26页 |
| ·抗菌肽融合基因片段的制备 | 第23-24页 |
| ·载体片段的制备 | 第24页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第24-26页 |
| 4 讨论 | 第26-28页 |
| 第二部分 ECD抗菌肽融合蛋白基因抗菌活性研究 | 第28-43页 |
| 1 引言 | 第28-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-35页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·转染用细胞和质粒 | 第29页 |
| ·实验用菌株 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·培养基及溶液的配置 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·转染用质粒DNA的制备 | 第30-32页 |
| ·壳聚糖包裹质粒DNA纳米颗粒的制备 | 第32-33页 |
| ·转染用HEK293细胞的准备 | 第33页 |
| ·重组真核表达质粒转染HEK293细胞 | 第33-34页 |
| ·抗菌肽融合基因在真核细胞中表达的检测 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-40页 |
| ·壳聚糖纳米颗粒的形态、粒径及zeta电位 | 第35-36页 |
| ·凝胶阻滞分析 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR的结果 | 第37-39页 |
| ·转染细胞上清液抑菌活性检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 综述 | 第48-81页 |
| 抗菌肽研究进展 | 第48-81页 |
| 1 引言 | 第48页 |
| 2 抗菌肽的来源 | 第48-51页 |
| ·昆虫抗菌肽 | 第48-49页 |
| ·两栖类抗菌肽 | 第49页 |
| ·鱼类抗菌肽 | 第49页 |
| ·哺乳动物抗菌肽 | 第49-50页 |
| ·植物抗菌肽 | 第50页 |
| ·细菌抗菌肽 | 第50页 |
| ·病毒抗菌肽 | 第50-51页 |
| ·禽类抗菌肽 | 第51页 |
| 3 抗菌肽的结构特点和生物学活性 | 第51-55页 |
| ·抗菌肽的结构特点 | 第51-52页 |
| ·抗菌肽的生物学活性 | 第52-55页 |
| ·抗菌肽对细菌的杀伤作用 | 第52页 |
| ·抗菌肽对真菌的杀伤作用 | 第52-53页 |
| ·抗菌肽对寄生虫的杀伤作用 | 第53页 |
| ·抗菌肽对癌细胞的杀伤作用 | 第53-54页 |
| ·抗菌肽对性传播病原体的杀伤作用 | 第54页 |
| ·抗菌肽的免疫调节作用 | 第54-55页 |
| 4 抗菌肽的分子生物学和基因表达的调控 | 第55页 |
| 5 抗菌肽抗菌机理研究进展 | 第55-60页 |
| ·膜结合型抗菌肽抗菌机理 | 第56-57页 |
| ·非膜结合型抗菌肽抗菌机理 | 第57-59页 |
| ·抑制蛋白质及细胞壁合成 | 第57-58页 |
| ·线粒体攻击作用 | 第58页 |
| ·对细胞核染色体的影响 | 第58页 |
| ·对癌细胞骨架的断裂作用 | 第58-59页 |
| ·协同抗菌作用和其它生物学功能 | 第59-60页 |
| 6 抗菌肽的开发应用 | 第60-64页 |
| ·抗菌肽的分子设计和合成 | 第60-63页 |
| ·α-螺旋结构新型抗菌肽的分子设计 | 第62页 |
| ·嵌合体肽的设计合成 | 第62-63页 |
| ·通过化学合成抗菌肽来阐明其生物合成途径 | 第63页 |
| ·抗菌肽的生产 | 第63-64页 |
| 7 抗菌肽的应用 | 第64-70页 |
| ·在农业、畜牧业上的应用 | 第64-66页 |
| ·抗菌肽在医药研制上的应用 | 第66-67页 |
| ·抗菌肽在抗菌、抗病毒药物研制上的应用 | 第67-68页 |
| ·抗菌肽在治疗癌症上的应用 | 第68-69页 |
| ·抗菌肽的抗寄生虫作用 | 第69页 |
| ·抗菌肽在中医药上的应用 | 第69-70页 |
| ·食品工业应用 | 第70页 |
| 8 存在的问题及解决方案 | 第70-72页 |
| 9 结语 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 在读硕士阶段发表论文情况 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
