| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·禽传染性支气管炎概述 | 第9-10页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒的分子生物学研究进展 | 第10-14页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统慨况 | 第14-18页 |
| ·存在的问题 | 第18-19页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第19页 |
| ·本研究的目的意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与仪器 | 第21-25页 |
| ·试验材料 | 第21-24页 |
| ·仪器 | 第24-25页 |
| 3 技术路线 | 第25-26页 |
| 4 方法 | 第26-34页 |
| ·IBV M基因的RT-PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·IBV M基因表达片断的克隆 | 第27-28页 |
| ·IBV M基因pPIC9K表达载体的构建及鉴定 | 第28-29页 |
| ·IBV 重组表达质粒pPIC9K-M的电击转化及转化子的筛选 | 第29-31页 |
| ·IBV M基因在毕赤酵母中的表达 | 第31页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE和Western-blot分析 | 第31-33页 |
| ·ELISA检测表达蛋白活性 | 第33-34页 |
| 5 结果 | 第34-40页 |
| ·IBV M基因的RT-PCR扩增 | 第34页 |
| ·M基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·IBV M基因pPIC9K表达载体的构建 | 第35页 |
| ·pPIC9K-M的电击转化及重组酵母转化子的筛选 | 第35-37页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第37-38页 |
| ·表达产物的Western-blot分析 | 第38页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·以ELISA检测表达蛋白活性结果 | 第39-40页 |
| 6 讨论 | 第40-45页 |
| ·关于M基因 | 第40页 |
| ·酵母表达系统 | 第40-41页 |
| ·关于表达蛋白的纯化和检测 | 第41-42页 |
| ·影响IBV M蛋白表达量的因素及提高表达量的措施 | 第42-44页 |
| ·实验中避免污染的注意事项 | 第44页 |
| ·M基因表达的应用前景 | 第44页 |
| ·进一步研究的打算 | 第44-45页 |
| 7 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第54页 |
