摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-17页 |
前言 | 第17-23页 |
第一章 中华按蚊防御素基因cDNA序列和基因组序列的克隆、鉴定及生物信息学分析 | 第23-72页 |
1 材料 | 第23-26页 |
·实验蚊株 | 第23页 |
·菌株和载体 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·PCR引物 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·溶液及培养基配制 | 第25-26页 |
2 方法 | 第26-49页 |
·中华按蚊基因组DNA文库的构建 | 第26-29页 |
·中华按蚊防御素基因巢式PCR扩增 | 第29-33页 |
·目的基因片段的纯化回收 | 第33-34页 |
·pMD 18 T-defensins重组载体质粒的构建 | 第34-36页 |
·重组克隆的筛选与鉴定 | 第36-37页 |
·中华按蚊防御素基因全长cDNA序列扩增 | 第37-44页 |
·中华按蚊防御素基因组 DNA序列的克隆 | 第44-49页 |
3 结果 | 第49-68页 |
·中华按蚊基因组 DNA文库的构建 | 第49页 |
·中华按蚊防御素基因巢式 PCR扩增 | 第49-54页 |
·中华按蚊防御素基因cDNA序列的克隆 | 第54-62页 |
·中华按蚊防御素基因组 DNA序列的克隆及序列分析 | 第62-68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
5 小结 | 第71-72页 |
第二章 中华按蚊转基因载体质粒的构建 | 第72-91页 |
1 材料 | 第72-73页 |
·菌株和载体 | 第72页 |
·主要试剂 | 第72页 |
·主要仪器 | 第72页 |
·培养基及主要试剂 | 第72-73页 |
2 方法 | 第73-84页 |
·pSLfa1180fa-Defensins载体质粒的构建 | 第73-77页 |
·pVg-Defensins-SV40载体质粒的构建 | 第77-80页 |
·pBac-Vg-Defensins-SV40载体质粒的构建 | 第80-84页 |
·帮助载体质粒phsp-pBac的鉴定 | 第84页 |
3 结果 | 第84-88页 |
·pSLfa1180fa-Defensins载体质粒的构建及鉴定 | 第84-85页 |
·pVg-Defensins-SV40载体质粒的构建及鉴定 | 第85-87页 |
·pBac-Vg-Defensins-SV40载体质粒的构建及鉴定 | 第87-88页 |
4 讨论 | 第88-90页 |
5 小结 | 第90-91页 |
第三章 显微注射及转基因蚊初步定性分析 | 第91-103页 |
1 材料 | 第91-92页 |
·实验蚊株、蚊卵及菌株 | 第91页 |
·显微注射质粒 | 第91页 |
·主要试剂 | 第91页 |
·主要仪器 | 第91-92页 |
·溶液的配制 | 第92页 |
2 方法 | 第92-97页 |
·无内毒素质粒的提取 | 第92-94页 |
·注射前胚胎的收集和处理 | 第94-95页 |
·显微注射针的制备 | 第95-96页 |
·显微注射操作 | 第96-97页 |
3 结果 | 第97-98页 |
4 讨论 | 第98-102页 |
5 小结 | 第102-103页 |
总结 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-110页 |
攻读学位期间成果 | 第110-111页 |
缩略语词汇表 | 第111-112页 |
统计学审稿证明 | 第112-113页 |
致谢 | 第113-115页 |