| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-28页 |
| 1 木质素生物合成的研究进展 | 第10-20页 |
| ·木质素的组成 | 第10-11页 |
| ·木质素的生物合成 | 第11页 |
| ·木质素合成的分子调控 | 第11-20页 |
| ·木质素生物合成过程中的关键酶 | 第11-14页 |
| ·木质素合成的分子调控 | 第14-20页 |
| 2 反义RNA技术在植物基因工程中的应用 | 第20-27页 |
| ·反义RNA技术的操作原理 | 第21-22页 |
| ·反义RNA的分类 | 第21页 |
| ·反义RNA的作用机制 | 第21-22页 |
| ·反义RNA技术在植物基因工程中的应用 | 第22-26页 |
| ·反义RNA技术在花色改造基因工程中的应用 | 第23页 |
| ·反义RNA技术在植物果实性状控制上的应用 | 第23-24页 |
| ·反义RNA技术在植物抗病性上的应用 | 第24-25页 |
| ·反义RNA技术在植物育性研究中的应用 | 第25页 |
| ·反义RNA技术在其他方面的的应用 | 第25-26页 |
| ·反义RNA技术的特点和展望 | 第26-27页 |
| 3 本研究的课题来源、研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 第二章 苎麻CCoAOMT基因反义表达载体的构建及转化模式烟草WS38的研究 | 第28-40页 |
| 1 材料与试剂 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·菌株 | 第28-29页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·农杆菌LBA4404培养基 | 第28页 |
| ·侵染用工程农杆菌培养基 | 第28页 |
| ·植物培养基 | 第28-29页 |
| ·酶与试剂盒 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-35页 |
| ·反义片段的扩增和酶切 | 第29-31页 |
| ·pMD-BnCCoAOMT质粒DNA提取 | 第29-30页 |
| ·目的基因BnCCoAOMT的扩增 | 第30-31页 |
| ·反义植物表达载体pBI121-antiBnCCoAOMT的构建及检测 | 第31-32页 |
| ·反义表达载体pBI121-antiBnCCoAOMT的构建 | 第31页 |
| ·反义表达载体pBI121-antiBnCCoAOMT的菌落PCR及酶切检测 | 第31-32页 |
| ·反义表达载体pBI121-antiBnCCoAOMT转化根癌农杆菌 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第32-33页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第33-34页 |
| ·农杆菌的培养 | 第33页 |
| ·共培养 | 第33页 |
| ·选择培养并诱导丛生芽 | 第33-34页 |
| ·诱导生根 | 第34页 |
| ·再生植株的移栽 | 第34页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·CTAB法抽提植物总DNA | 第34页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·反义植物表达载体pBI121-antiBnCCoAOMT的构建流程 | 第35页 |
| ·目的基因BnCCoAOMT的扩增 | 第35-36页 |
| ·载体pBI121双酶切 | 第36-37页 |
| ·重组载体pBI121-antiBnCCoAOMT酶切检测 | 第37页 |
| ·反义表达载体pBI121-antiBnCCoAOMT转化农杆菌LBA4404的检测 | 第37-38页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第38页 |
| ·共培养 | 第38页 |
| ·诱导丛生芽 | 第38页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第38-40页 |
| 第三章 苎麻CCoAOMT基因正向表达载体的构建及转化模式烟草WS38的研究 | 第40-48页 |
| 1 材料与试剂 | 第40页 |
| ·菌株与质粒 | 第40页 |
| ·植物材料及培养基 | 第40页 |
| ·烟草品种 | 第40页 |
| ·农杆菌LBA4404培养基 | 第40页 |
| ·侵染用工程农杆菌培养基 | 第40页 |
| ·植物培养基 | 第40页 |
| ·酶与试剂盒 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-44页 |
| ·引物设计及CCoAOMT基因的PCR扩增 | 第40-42页 |
| ·引物设计 | 第40-42页 |
| ·目的基因CCoAOMT的扩增 | 第42页 |
| ·正向植物表达载体pWM101-BnCCoAOMT的构建及检测 | 第42-43页 |
| ·正向表达载体pWM101-BnCCoAoMT的构建 | 第42页 |
| ·正向表达载体pWM101-BnCCoAOMT的菌落PCR及酶切检测 | 第42-43页 |
| ·pWM101-BnCCoAOMT转化根癌农杆菌 | 第43页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第43页 |
| ·叶盘法转化烟草(无菌操作) | 第43页 |
| ·农杆菌的培养 | 第43页 |
| ·共培养 | 第43页 |
| ·筛选培养 | 第43页 |
| ·诱导丛生芽 | 第43页 |
| ·诱导生根 | 第43页 |
| ·再生植株的练苗与移栽 | 第43页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第43-44页 |
| ·CTAB法抽提植物总DNA | 第43页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-48页 |
| ·正向基因植物表达载体pWM101-BnCCoMOT的构建流程 | 第44-46页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因cDNA全长PCR扩增 | 第46页 |
| ·正义表达载体pWM101-BnCCoAOMT的构建 | 第46-47页 |
| ·正向表达载体pWM101-BnCCoAOMT转化农杆菌LBA4404的检测 | 第47页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第47页 |
| ·转正义BnCCoAOMT基因烟草的PCR检测 | 第47-48页 |
| 第四章 苎麻CCoAOMT基因转化烟草的检测与分析 | 第48-53页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·材料固定 | 第48页 |
| ·洗涤 | 第48页 |
| ·脱水 | 第48-49页 |
| ·脱酒精 | 第49页 |
| ·浸蜡 | 第49页 |
| ·包埋 | 第49-50页 |
| ·切片 | 第50页 |
| ·粘片 | 第50页 |
| ·脱蜡 | 第50页 |
| ·染色与封片 | 第50页 |
| ·镜检 | 第50页 |
| 2 实验结果 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录A 缩写词(Abbreviation) | 第62-64页 |
| 附录B 主要试剂配置 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
