| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 第一节 乳腺癌转移 | 第12页 |
| 第二节 人高转移潜能乳腺癌细胞系LM-MCF-7 | 第12-13页 |
| 第三节 HBXIP在肿瘤发生中的作用 | 第13-15页 |
| 第四节 microRNA与肿瘤发生的关系 | 第15-17页 |
| 第五节 研究内容、目的及意义 | 第17-19页 |
| 第二章 HBXIP调节乳腺癌细胞迁移的分子机制 | 第19-53页 |
| 第一节 实验材料 | 第19-22页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 第二节 实验方法 | 第22-41页 |
| ·细胞培养、传代及计数 | 第22-23页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第23-24页 |
| ·质粒的小量提取及纯化 | 第24-25页 |
| ·基因转染 | 第25-26页 |
| ·细胞总RNA的提取及反转录 | 第26-27页 |
| ·反转录PCR(RT-PCR) | 第27-28页 |
| ·载体构建 | 第28-32页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析 | 第32-33页 |
| ·miRNA加尾及cDNA合成 | 第33-34页 |
| ·实时定量PCR | 第34-35页 |
| ·蛋白免疫印迹分析 | 第35-40页 |
| ·细胞划痕实验(Wounding healing assay) | 第40页 |
| ·细胞迁移实验(Modified bodyen's chamber assay) | 第40-41页 |
| ·统计学分析 | 第41页 |
| 第三节 实验结果 | 第41-50页 |
| ·三种乳腺癌细胞系迁移能力比较 | 第41-42页 |
| ·HBXIP的表达水平及其与乳腺癌细胞迁移的关系 | 第42-44页 |
| ·miR-520b的表达水平及其与乳腺癌细胞迁移的关系 | 第44-46页 |
| ·miR-520b靶向HBXIP的3'UTR | 第46-48页 |
| ·HBXIP调节乳腺癌细胞迁移过程受miR-520b的调控 | 第48-50页 |
| 第四节 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 HBXIP蛋白纯化条件探索 | 第53-65页 |
| 第一节 实验材料 | 第53-55页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·质粒 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54-55页 |
| 第二节 实验方法 | 第55-59页 |
| ·原核表达载体构建 | 第55-57页 |
| ·融合蛋白诱导表达 | 第57页 |
| ·亲和层析法 | 第57-58页 |
| ·离子交换层析法 | 第58页 |
| ·分子筛层析法 | 第58-59页 |
| ·蛋白浓缩 | 第59页 |
| 第三节 实验结果 | 第59-63页 |
| ·pet-28a-HBXIP原核表达载体测序结果 | 第59-60页 |
| ·His-HBXIP1的纯化效果 | 第60-61页 |
| ·His-HBXIP2的纯化效果 | 第61-63页 |
| 第四节 讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录 常规溶液配制 | 第70-74页 |
| 个人简历、在学期间发表的论文与研究成果 | 第74页 |
