| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 本文缩略语表 | 第9-10页 |
| 氨基酸缩略表 | 第10-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 1 绪论 | 第14-32页 |
| ·引言 | 第14-15页 |
| ·研究背景 | 第15-29页 |
| ·抗菌肽的研究 | 第15-23页 |
| ·表达系统的基因工程研究 | 第23-25页 |
| ·Parasin Ⅰ的研究 | 第25-29页 |
| ·立题依据 | 第29-30页 |
| ·研究内容 | 第30页 |
| ·试验设计思路 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-44页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第32-34页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·主要培养基 | 第32页 |
| ·主要溶液 | 第32-34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-44页 |
| ·Parasin Ⅰ基因序列的设计、合成及扩增 | 第34-35页 |
| ·TA克隆和测序 | 第35-37页 |
| ·pET32-a(+)-Para Ⅰ表达载体构建 | 第37-38页 |
| ·pET32-a(+)-Para Ⅰ的转化 | 第38-39页 |
| ·IPTG诱导表达 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白的制备、鉴定及纯化 | 第40-42页 |
| ·可溶性Parasin Ⅰ的抗菌活性检测 | 第42-44页 |
| 3 实验结果与分析 | 第44-52页 |
| ·Parasin Ⅰ基因的人工设计与合成 | 第44页 |
| ·Parasin Ⅰ基因的扩增 | 第44-45页 |
| ·TA克隆、酶切鉴定和测序 | 第45页 |
| ·Parasin Ⅰ基因的TA克隆 | 第45页 |
| ·Parasin Ⅰ克隆序列与设计序列比对 | 第45页 |
| ·pET32-a(+)-Para Ⅰ表达载体构建及鉴定 | 第45-47页 |
| ·重组质粒pMD18-T-Para Ⅰ的双酶切鉴定 | 第46页 |
| ·pET32-a(+)的双酶切 | 第46-47页 |
| ·pET32-a(+)-Para Ⅰ重组质粒的鉴定 | 第47页 |
| ·Rosetta(DE3)/pET32-a(+)-Para Ⅰ的筛选 | 第47-48页 |
| ·重组抗菌肽Parasin Ⅰ的诱导表达与鉴定 | 第48-49页 |
| ·37℃诱导表达蛋白的SDS-PAGE检测 | 第48页 |
| ·20℃诱导表达蛋白的SDS-PAGE检测 | 第48-49页 |
| ·可溶性融合蛋白的纯化及浓度测定 | 第49-51页 |
| ·可溶性融合蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| ·可溶性融合蛋白的浓度测定 | 第50-51页 |
| ·Parasin Ⅰ的抗菌活性分析 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| ·抗菌肽Parasin Ⅰ基因和引物的人工设计与扩增 | 第52页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第52页 |
| ·重组抗菌肽Parasin Ⅰ的表达 | 第52-54页 |
| ·载体和宿主菌的选择 | 第52-53页 |
| ·诱导温度的改变 | 第53-54页 |
| ·融合表达优势 | 第54页 |
| ·Parasin Ⅰ融合蛋白的纯化 | 第54-55页 |
| ·重组抗菌肽Parasin Ⅰ的抗菌活性分析 | 第55-56页 |
| 5 结论与展望 | 第56-58页 |
| ·结论 | 第56页 |
| ·展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 附录一 | 第68-69页 |
| 附录二 | 第69页 |
