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喜树组织培养与遗传转化的研究

前言第1-11页
1 综述第11-30页
   ·引言第11页
   ·林木基因工程的现状及发展趋势第11-15页
     ·林木基因工程的现状第11-15页
     ·林木基因工程的发展趋势第15页
   ·植物组织培养的器官形成及影响因素第15-20页
     ·组织培养中器官的形成第15-17页
     ·影响植物组织培养器官形成的因素第17-20页
       ·培养基第18-19页
       ·培养的环境条件第19页
       ·培养材料的状况第19-20页
   ·影响农杆菌介导植物基因转化的因素第20-23页
     ·不同属性的农杆菌对转化的影响第21页
     ·植物基因型及外植体对转化的影响第21-22页
     ·培养方法对转化的影响第22-23页
   ·喜树资源的开发与研究现状第23-30页
2 喜树组织培养系统的建立第30-56页
   ·材料和方法第30-32页
     ·材料来源第30页
     ·试验方法第30-32页
   ·结果与分析第32-48页
     ·初始培养阶段第32-33页
     ·诱导培养阶段第33-44页
       ·腋芽增殖途径第33-38页
       ·愈伤组织再生途径第38-44页
     ·幼植株的生根阶段第44-48页
       ·不同培养基对生根的影响第44-45页
       ·不同激素种类及浓度对生根的影响第45-46页
       ·不同蔗糖浓度对生根的影响第46-47页
       ·生根幼植株的炼苗第47页
       ·生根幼植株的移栽第47-48页
   ·本章小结第48-49页
   ·讨论第49-56页
     ·不同的外植体对愈伤组织再分化的影响第49-50页
     ·激素对腋芽增殖和愈伤组织诱导和分化的影响第50-51页
     ·愈伤组织增殖培养过程中应该注意的问题第51-56页
3 组培苗与实生苗在盆栽过程中生长性状与光合生理生态的差异第56-72页
   ·材料来源与方法第56-58页
     ·材料来源第56页
     ·测定方法第56-57页
     ·数据处理第57-58页
   ·结果与讨论第58-69页
     ·组培苗与实生苗生长性状的差异第58-61页
     ·组培苗与实生苗光合生理生态学差异第61-69页
   ·小结第69-72页
4 木醋酸菌UGPase基因转化喜树的研究第72-97页
   ·材料与方法第72-80页
     ·材料第72页
     ·培养基及培养条件第72-73页
     ·外源基因的转化第73-75页
       ·Kana最佳筛选浓度的确定第73-74页
       ·叶片的准备和预培养第74页
       ·根癌农杆菌的培养及工程菌液的准备第74页
       ·侵染第74页
       ·共培养第74页
       ·AS最佳浓度的确定第74-75页
       ·选择培养第75页
       ·抗性芽的筛选第75页
       ·生根的卡那霉素敏感性试验第75页
     ·质粒DNA的提取第75-76页
       ·所需试剂及其配制方法第75页
       ·操作步骤第75-76页
     ·喜树叶片总DNA的提取第76-77页
       ·所需试剂及其配制方法第76页
       ·操作步骤第76-77页
     ·琼脂糖凝胶电泳第77页
       ·溶液配制第77页
       ·琼脂糖凝胶的制备第77页
       ·电泳检测和摄影第77页
     ·PCR检测第77-78页
     ·目的片段PCR产物的回收第78-79页
     ·Southern Blotting分析第79-80页
       ·Southern杂交试剂的配制第79页
       ·植物基因组DNA的限制性酶切及电泳分离第79页
       ·转膜第79-80页
       ·探针标记第80页
       ·Southern杂交第80页
       ·洗膜与信号检测第80页
     ·转化苗的生根及移栽第80页
   ·结果与分析第80-92页
     ·Kana最佳筛选浓度的确定第81-82页
     ·预培养时间对转化效果的影响第82-83页
     ·菌液浓度及侵染时间对转化效率的影响第83-85页
       ·菌液浓度对转化效率的影响第83-84页
       ·浸染时间对遗传转化效率的影响第84-85页
     ·共培养时间对转化效率的影响第85-87页
     ·pH值和乙酰丁香酮对转化的影响第87-88页
     ·抗生素对遗传转化的影响第88-90页
       ·不同浓度的头孢霉素对喜树遗传转化的影响第88-89页
       ·不同浓度的卡那霉素对喜树遗传转化的影响第89-90页
     ·生根的卡那敏感性实验第90-91页
     ·转化苗的生根第91页
     ·转基因植株的PCR检测第91-92页
     ·转基因植株的Southern检测第92页
   ·小结第92-93页
   ·讨论第93-97页
5 结论和建议第97-100页
   ·主要结果第97-98页
   ·进一步工作第98-100页
致谢第100-101页

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