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日本乙型脑炎实验室诊断方法的研究和应用

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·乙脑历史、危害及流行特征第11-13页
     ·乙脑历史第11页
     ·乙脑危害第11-12页
     ·乙脑流行特征第12-13页
   ·乙脑的病原学特性第13-14页
     ·分类及生物学特性第13页
     ·血凝特性第13页
     ·增殖特性第13-14页
     ·发病机制第14页
   ·乙脑病毒的分子生物学特性第14-17页
     ·基因组结构第14-15页
     ·结构蛋白第15-16页
     ·非结构蛋白第16-17页
   ·乙脑的诊断第17-19页
     ·病原学诊断第17-18页
     ·血清学诊断第18-19页
   ·乙脑的防治第19-21页
第二章 研究目的和意义第21-23页
第三章 材料和方法第23-31页
   ·材料第23-26页
     ·毒株、血清与质粒第23页
     ·实验所需试剂盒及工具酶第23页
     ·ELISA所用试剂第23-24页
     ·血凝抑制试验所用试剂第24页
     ·主要培养基第24-25页
     ·琼脂糖凝胶电泳相关溶液第25页
     ·SDS-PAGE相关溶液第25页
     ·包涵体提取相关溶液第25页
     ·其它试剂第25-26页
     ·PCR引物第26页
   ·方法第26-31页
     ·全病毒ELISA方法的优化、试剂盒的研制与应用研究第26-27页
       ·全病毒ELISA方法的优化第26-27页
         ·乙脑病毒抗原的获得第26页
         ·最佳致敏条件的选择(方阵滴定)第26页
         ·全病毒ELISA阳性的判定第26-27页
         ·保存期试验第27页
       ·全病毒ELISA试剂盒的研制第27页
         ·全病毒ELISA试剂盒的组装第27页
         ·试剂盒操作步骤及判定结果第27页
         ·试剂盒的重复性、特异性和符合率试验第27页
       ·全病毒ELISA试剂盒的初步应用第27页
     ·乙脑RT-PCR诊断方法的建立和应用第27-28页
       ·样品的处理第27-28页
       ·RNA的提取第28页
       ·RT-PCR第28页
       ·RT-PCR产物的鉴定第28页
       ·敏感性检测第28页
       ·临床应用第28页
     ·乙脑E-ELISA方法的建立第28-31页
       ·乙脑E蛋白的表达包涵体的提取第28-29页
         ·菌种的复苏第28页
         ·最佳IPTG浓度的选择第28-29页
         ·最佳诱导时间的选择第29页
         ·最佳表达时间的选择第29页
         ·SDS-PAGE第29页
         ·包涵体的提取第29页
       ·乙脑E-ELISA方法的研究第29-31页
         ·最佳致敏条件的选择(方阵滴定)第29-30页
         ·酶联免疫吸附试验阴阳性界限的判定第30页
         ·血清阳性的判定第30页
         ·重复性试验第30页
         ·特异性试验第30页
         ·符合率试验第30页
         ·临床应用第30-31页
第四章 结果与分析第31-41页
   ·全病毒ELISA方法的优化、试剂盒的研制与初步应用第31-35页
     ·全病毒ELISA方法的优化第31-33页
       ·最佳包被条件的确定第31页
       ·ELISA阴阳性界限值的确定第31-32页
       ·保存期试验第32-33页
     ·ELISA试剂盒的研制第33-34页
       ·试剂盒的组装第33页
       ·试剂盒的重复性、特异性和敏感性试验第33-34页
     ·ELISA试剂盒的初步应用第34-35页
   ·乙脑RT-PCR检测方法的建立与应用第35-37页
     ·乙脑病毒PCR产物凝胶电泳结果第35-36页
     ·特异性检测第36页
     ·敏感性检测第36页
     ·对可疑病例的检测第36-37页
   ·乙脑E-ELISA方法的研究第37-41页
     ·乙脑病毒E蛋白的表达和包涵体的提取第37页
     ·乙脑E-ELISA方法的建立第37-41页
       ·最佳包被条件的确定第37-38页
       ·ELISA阴阳性界限值的确定第38页
       ·重复性试验第38页
       ·特异性试验第38-39页
       ·符合率试验第39页
       ·送检血清检测结果第39-41页
第五章 讨论与结论第41-44页
   ·讨论第41-42页
     ·乙脑全病毒ELISA方法的优化、试剂盒的研制及初步应用第41页
     ·乙脑病毒RT-PCR方法的建立和初步应用第41-42页
     ·乙脑E蛋白ELISA方法的建立和初步应用第42页
   ·结论第42-44页
参考文献第44-51页
缩略语表(Abbreviation)第51-52页
致谢第52-53页
附录第53页

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