第一章 文献综述 | 第1-38页 |
1 大麦黄矮病毒的分子生物学 | 第10-26页 |
·生物学特性 | 第10-11页 |
·分类学 | 第11-13页 |
·基因组的结构 | 第13-14页 |
·基因的表达机制 | 第14-20页 |
·基因的功能 | 第20-23页 |
·复制机制 | 第23-26页 |
2 植物病毒抗病基因工程研究进展 | 第26-35页 |
·病毒自身基因介导的抗性及其应用 | 第27-30页 |
·利用植物自身的抗病基因介导的策略 | 第30-31页 |
·利用植物源抗病毒活性物质基因 | 第31-32页 |
·直接或间接作用于病毒核酸的策略 | 第32-34页 |
·其它的抗病毒基因工程策略 | 第34-35页 |
3 研究的目的意义与主要研究内容 | 第35-38页 |
·目的与意义 | 第35-37页 |
·主要研究内容 | 第37-38页 |
第二章 大麦黄矮病毒GAV基因组全序列测定及其结构分析 | 第38-75页 |
1 材料 | 第39页 |
·病毒分离物 | 第39页 |
·饲毒蚜虫和寄主植物 | 第39页 |
2 方法 | 第39-51页 |
·BYDV GAV的生物学测定 | 第39-40页 |
·GAV分离物的繁殖 | 第40页 |
·GAV的提纯 | 第40-42页 |
·BYDV GAV病毒RNA的提取 | 第42-43页 |
·RT-PCR | 第43页 |
·5'RACE | 第43-45页 |
·3'RACE | 第45-47页 |
·序列分析采用的引物 | 第47-48页 |
·PCR扩增片段的回收 | 第48-49页 |
·基因的克隆 | 第49-51页 |
·基因序列的测定及分析 | 第51页 |
3 结果与分析 | 第51-73页 |
·BYDV GAV的生物学测定 | 第51页 |
·BYDV GAV的繁殖 | 第51页 |
·BYDVGAV的精提纯 | 第51-52页 |
·全基因组克隆策略示意图 | 第52-53页 |
·BYDV GAV的ORF1-2和ORF2-5之间部分序列测定 | 第53-56页 |
·BYDV GAV的ORF5-ORF6间片段序列分析 | 第56-57页 |
·5’端末端序列分析 | 第57-59页 |
·ORF6及其后的非编码序列分析 | 第59-61页 |
·3'RACE分析结果 | 第61-63页 |
·BYDV GAV基因组全序列及其基因组结构分析 | 第63-73页 |
4 小结与讨论 | 第73-75页 |
第三章 大麦黄矮病毒GAV的运动蛋白基因原核表达与抗血清制备 | 第75-84页 |
1 材料与方法 | 第75-79页 |
·菌种和表达质粒 | 第75页 |
·所用主要试剂 | 第75页 |
·方法 | 第75-79页 |
2 结果与分析 | 第79-82页 |
·运动蛋白原核表达载体的构建 | 第79-80页 |
·SDS-PAGE分析 | 第80-81页 |
·原核表达产物抗血清效价测定 | 第81页 |
·发病燕麦体内运动蛋白的免疫检测 | 第81-82页 |
3 小结与讨论 | 第82-84页 |
第四章 基因枪介导法向小麦导入大麦黄矮病毒运动蛋白基因的研究 | 第84-104页 |
1 材料与方法 | 第84-95页 |
·材料 | 第84页 |
·方法 | 第84-95页 |
2 结果与分析 | 第95-102页 |
·运动蛋白基因全长及缺失突变体植物表达载体的构建及鉴定 | 第95-97页 |
·地高辛探针的制备 | 第97页 |
·基因枪转化结果 | 第97-100页 |
·T1代转基因小麦的检测结果 | 第100-102页 |
3 小结与讨论 | 第102-104页 |
结论 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-120页 |
附录 | 第120-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
个人简历 | 第130页 |