广西狂犬病野毒株N和G基因的克隆与序列分析
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 前言 | 第9-21页 |
| 一、 材料与方法 | 第21-31页 |
| 1 材料 | 第21-24页 |
| ·病毒 | 第21页 |
| ·实验小白鼠 | 第21页 |
| ·试剂及配制 | 第21-23页 |
| ·仪器 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-31页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| ·犬脑组织及ERA疫苗株的处理 | 第25页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第25页 |
| ·犬脑组织阳性鉴定 | 第25-26页 |
| ·小白鼠脑内攻毒实验和病毒分离 | 第26页 |
| ·小白鼠脑组织病毒RNA的提取 | 第26页 |
| ·狂犬病毒N基因的扩增 | 第26页 |
| ·狂犬病毒G基因的扩增 | 第26-27页 |
| ·电泳及PCR产物分析 | 第27页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第27页 |
| ·连接 | 第27-28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·筛选培养 | 第28页 |
| ·抽提质粒 | 第28-29页 |
| ·酶切和PCR鉴定 | 第29页 |
| ·取阳性克隆测序和序列分析 | 第29页 |
| ·重组DH_(5a)的保存 | 第29页 |
| ·重组质粒的保存 | 第29-31页 |
| 二、 实验结果 | 第31-63页 |
| ·犬脑组织RV阳性鉴定结果 | 第31页 |
| ·小白鼠脑内接种实验结果 | 第31-32页 |
| ·狂犬病毒N基因的扩增、克隆鉴定及序列分析 | 第32-44页 |
| ·狂犬病毒N基因RT-PCR结果 | 第32-33页 |
| ·胶回收结果 | 第33页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第34页 |
| ·核苷酸和推导氨基酸序列对比 | 第34-42页 |
| ·核苷酸和推导氨基酸同源性分析 | 第42-43页 |
| ·遗传系统树分析 | 第43-44页 |
| ·狂犬病毒G基因的扩增、克隆鉴定及序列分析 | 第44-63页 |
| ·狂犬病毒G基因的RT-PCR扩增 | 第44页 |
| ·胶回收结果 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第45页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第45-46页 |
| ·核苷酸和推导氨基酸序列对比 | 第46-59页 |
| ·核苷酸和推导氨基酸同源性分析 | 第59-61页 |
| ·遗传系统树分析 | 第61-63页 |
| 三、 讨论 | 第63-68页 |
| ·病料来源及三个毒株的阳性鉴定 | 第63页 |
| ·PCR产物的纯化和克隆 | 第63-64页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第64页 |
| ·序列比较及同源性分析 | 第64-65页 |
| ·N基因序列比较及同源性分析 | 第64-65页 |
| ·G基因序列比较及同源性分析 | 第65页 |
| ·与抗原性和致病性相关区段和位点的分析 | 第65-68页 |
| ·N基因抗原性相关区段及Th表位的分析 | 第65-66页 |
| ·G基因抗原性及致病性相关区段和位点的分析 | 第66-68页 |
| 四、 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
