中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-31页 |
·猪中重要生理功能相关基因研究现状与继续寻找新基因的必要性 | 第12-15页 |
·与生长和胴体性状相关的候选基因 | 第12页 |
·与肉质性状相关的候选基因 | 第12-13页 |
·与繁殖性状有关的候选基因 | 第13-14页 |
·与抗病力相关的候选基因 | 第14-15页 |
·基因分离的几种主要方法 | 第15-17页 |
·利用基因序列的同源性分离基因 | 第17-20页 |
·依据 | 第17-18页 |
·利用CATS引物分离基因片段 | 第18-19页 |
·采用电脑克隆策略获取cDNA序列 | 第19-20页 |
·猪基因物理定位技术 | 第20-23页 |
·体细胞杂种细胞系技术用于物理图谱构建 | 第21页 |
·体细胞杂种板(SCHP)用于染色体区域定位 | 第21-22页 |
·辐射杂种板(RH)用于染色体精细定位 | 第22-23页 |
·体细胞杂种细胞系技术与其它物理定位技术的比较 | 第23页 |
·猪12号染色体上的功能基因物理定位现状 | 第23-28页 |
·四个拟分离基因的研究现状 | 第28-31页 |
·胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)基因 | 第28-29页 |
·铁氧还蛋白还原酶(FDXR)基因 | 第29页 |
·杆细胞磷酸二酯酶γ亚单位(PDEG)基因 | 第29页 |
·蛋白酶体激活亚单位3(PSME3)基因 | 第29-31页 |
2 研究目的意义 | 第31-32页 |
3 材料与方法 | 第32-49页 |
·材料 | 第32-35页 |
·样品 | 第32-33页 |
·培养基、酶及试剂盒 | 第33-34页 |
·主要试剂及配制 | 第34-35页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·主要分子生物学软件 | 第35页 |
·方法 | 第35-49页 |
·猪12号染色体上新基因的分离法 | 第35-38页 |
·四个新基因物理定位的SCHP和RH法 | 第38-43页 |
·猪基因的多态性和遗传方式检测 | 第43页 |
·电脑克隆略获取猪PSME3基因cDNA及序列分析 | 第43-47页 |
·PSME3基因DNA序列的延伸 | 第47-48页 |
·猪PSME3基因与性状的关联分析 | 第48-49页 |
4 结果 | 第49-91页 |
·四个猪新基因片段的分离、序列分析与鉴定结果 | 第49-57页 |
·CATS引物扩增猪基因组的结果 | 第49页 |
·扩增产物的序列分析结果 | 第49-52页 |
·在GenBank数据库中的序列同源性检索结果 | 第52-55页 |
·四对CATS引物扩增产物的鉴定结果 | 第55-57页 |
·四个猪新基因的物理定位结果 | 第57-69页 |
·利用SCHP的染色体区域定位结果 | 第57-65页 |
·利用IMpRH的染色体精细定位结果 | 第65-66页 |
·四个新分离的猪基因在人17号和猪12号染色体上的比较定位图 | 第66-69页 |
·GFAP、FDXR和PDEG基因的遗传变异与遗传方式检测结果 | 第69-75页 |
·GFAP基因的遗传变异检测结果 | 第69页 |
·FDXR基因的遗传变异和遗传方式 | 第69-72页 |
·PDEG基因的遗传变异和遗传方式检测 | 第72-75页 |
·猪PSME3基因cDNA的克隆及与性状的关联分析 | 第75-79页 |
·总RNA的提取 | 第75页 |
·RT-PCR扩增结果 | 第75页 |
·cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第75-78页 |
·推导的PA28_γ亚单位同源性比较及功能域分析 | 第78-79页 |
·猪PSME3基因部分基因组DNA序列的分离 | 第79-84页 |
·猪PSME3基因部分基因组DNA序列的分离和鉴定结果 | 第79-80页 |
·所分离的猪PSME3基因部分基因组DNA序列分析结果 | 第80-84页 |
·PSME3基因的遗传变异和遗传方式检测结果 | 第84-90页 |
·PSME3基因第5内含子的缺失突变 | 第84-87页 |
·PSME3基因第5内含子HhaⅠ酶切位点多态性检测结果 | 第87-89页 |
·PSME3基因第8外显子AluⅠ酶切位点多态性 | 第89-90页 |
·猪PSME3基因与性状的关联分析 | 第90-91页 |
5 讨论 | 第91-101页 |
·关于应用CATS引物分离猪中新基因 | 第91-93页 |
·可行性问题 | 第91页 |
·CATS引物的设计问题 | 第91-92页 |
·扩增条件的优化问题 | 第92-93页 |
·四个基因片段的鉴定问题 | 第93页 |
·关于新分离基因的物理定位技术 | 第93-97页 |
·“背景”带干扰问题 | 第93-95页 |
·用SCHP定位的数据分析问题 | 第95-96页 |
·关于四个新分离基因的物理定位结果 | 第96-97页 |
·关于新分离基因的遗传变异和遗传方式的检测结果 | 第97-99页 |
·关于等位基因频率在猪群间的分布差异问题 | 第97-99页 |
·关于新分离基因的遗传方式 | 第99页 |
·关于PSME3基因编码区的获取及与性状关联 | 第99-101页 |
·电脑克隆策略获取全长cDNA的可行性 | 第99页 |
·关于PSME3基因编码区序列结构分析结果 | 第99-100页 |
·猪PSME3基因与性状的关联分析 | 第100-101页 |
6 结论 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-114页 |
在读期间发表论文题录 | 第114-115页 |
致谢 | 第115-116页 |