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猪12号染色体上四个新基因的分离、鉴定与物理定位

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 文献综述第12-31页
   ·猪中重要生理功能相关基因研究现状与继续寻找新基因的必要性第12-15页
     ·与生长和胴体性状相关的候选基因第12页
     ·与肉质性状相关的候选基因第12-13页
     ·与繁殖性状有关的候选基因第13-14页
     ·与抗病力相关的候选基因第14-15页
   ·基因分离的几种主要方法第15-17页
   ·利用基因序列的同源性分离基因第17-20页
     ·依据第17-18页
     ·利用CATS引物分离基因片段第18-19页
     ·采用电脑克隆策略获取cDNA序列第19-20页
   ·猪基因物理定位技术第20-23页
     ·体细胞杂种细胞系技术用于物理图谱构建第21页
     ·体细胞杂种板(SCHP)用于染色体区域定位第21-22页
     ·辐射杂种板(RH)用于染色体精细定位第22-23页
     ·体细胞杂种细胞系技术与其它物理定位技术的比较第23页
   ·猪12号染色体上的功能基因物理定位现状第23-28页
   ·四个拟分离基因的研究现状第28-31页
     ·胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)基因第28-29页
     ·铁氧还蛋白还原酶(FDXR)基因第29页
     ·杆细胞磷酸二酯酶γ亚单位(PDEG)基因第29页
     ·蛋白酶体激活亚单位3(PSME3)基因第29-31页
2 研究目的意义第31-32页
3 材料与方法第32-49页
   ·材料第32-35页
     ·样品第32-33页
     ·培养基、酶及试剂盒第33-34页
     ·主要试剂及配制第34-35页
     ·主要仪器设备第35页
     ·主要分子生物学软件第35页
   ·方法第35-49页
     ·猪12号染色体上新基因的分离法第35-38页
     ·四个新基因物理定位的SCHP和RH法第38-43页
     ·猪基因的多态性和遗传方式检测第43页
     ·电脑克隆略获取猪PSME3基因cDNA及序列分析第43-47页
     ·PSME3基因DNA序列的延伸第47-48页
     ·猪PSME3基因与性状的关联分析第48-49页
4 结果第49-91页
   ·四个猪新基因片段的分离、序列分析与鉴定结果第49-57页
     ·CATS引物扩增猪基因组的结果第49页
     ·扩增产物的序列分析结果第49-52页
     ·在GenBank数据库中的序列同源性检索结果第52-55页
     ·四对CATS引物扩增产物的鉴定结果第55-57页
   ·四个猪新基因的物理定位结果第57-69页
     ·利用SCHP的染色体区域定位结果第57-65页
     ·利用IMpRH的染色体精细定位结果第65-66页
     ·四个新分离的猪基因在人17号和猪12号染色体上的比较定位图第66-69页
   ·GFAP、FDXR和PDEG基因的遗传变异与遗传方式检测结果第69-75页
     ·GFAP基因的遗传变异检测结果第69页
     ·FDXR基因的遗传变异和遗传方式第69-72页
     ·PDEG基因的遗传变异和遗传方式检测第72-75页
   ·猪PSME3基因cDNA的克隆及与性状的关联分析第75-79页
     ·总RNA的提取第75页
     ·RT-PCR扩增结果第75页
     ·cDNA序列及推导的氨基酸序列第75-78页
     ·推导的PA28_γ亚单位同源性比较及功能域分析第78-79页
   ·猪PSME3基因部分基因组DNA序列的分离第79-84页
     ·猪PSME3基因部分基因组DNA序列的分离和鉴定结果第79-80页
     ·所分离的猪PSME3基因部分基因组DNA序列分析结果第80-84页
   ·PSME3基因的遗传变异和遗传方式检测结果第84-90页
     ·PSME3基因第5内含子的缺失突变第84-87页
     ·PSME3基因第5内含子HhaⅠ酶切位点多态性检测结果第87-89页
     ·PSME3基因第8外显子AluⅠ酶切位点多态性第89-90页
   ·猪PSME3基因与性状的关联分析第90-91页
5 讨论第91-101页
   ·关于应用CATS引物分离猪中新基因第91-93页
     ·可行性问题第91页
     ·CATS引物的设计问题第91-92页
     ·扩增条件的优化问题第92-93页
     ·四个基因片段的鉴定问题第93页
   ·关于新分离基因的物理定位技术第93-97页
     ·“背景”带干扰问题第93-95页
     ·用SCHP定位的数据分析问题第95-96页
     ·关于四个新分离基因的物理定位结果第96-97页
   ·关于新分离基因的遗传变异和遗传方式的检测结果第97-99页
     ·关于等位基因频率在猪群间的分布差异问题第97-99页
     ·关于新分离基因的遗传方式第99页
   ·关于PSME3基因编码区的获取及与性状关联第99-101页
     ·电脑克隆策略获取全长cDNA的可行性第99页
     ·关于PSME3基因编码区序列结构分析结果第99-100页
     ·猪PSME3基因与性状的关联分析第100-101页
6 结论第101-102页
参考文献第102-114页
在读期间发表论文题录第114-115页
致谢第115-116页

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