| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 1． 文献综述 | 第8-30页 |
| 1．1 伪狂犬病毒表达载体研究进展 | 第8-20页 |
| 1．1．1 概述 | 第8-9页 |
| 1．1．2 伪狂犬病毒的基因组结构和生物学特性 | 第9-11页 |
| 1．1．2．1 伪狂犬病毒的基因组结构 | 第9页 |
| 1．1．2．2 伪狂犬病毒的增殖 | 第9-10页 |
| 1．1．2．3 伪狂犬病病毒中与表达外源基因相关的基因及其相应蛋白的功能 | 第10-11页 |
| 1．1．3 伪狂犬病毒表达载体的构建 | 第11-14页 |
| 1．1．3．1 伪狂犬病毒表达载体构建的原理 | 第11-12页 |
| 1．1．3．2 重组伪狂犬病毒的筛选 | 第12-14页 |
| 1．1．4 伪狂犬病毒表达载体的应用 | 第14-19页 |
| 1．1．4．1 以PRV gG基因作为插入基因的伪狂犬活病毒载体研究 | 第14-16页 |
| 1．1．4．2 以PRV TK基因作为插入基因的伪狂犬活病毒载体研究 | 第16-17页 |
| 1．1．4．3 以PRV gC、gD、gE、PK基因作为插入基因的伪狂犬活病毒载体研究 | 第17-19页 |
| 1．1．5 重组活病毒疫苗的免疫效力及其评定 | 第19-20页 |
| 1．1．5．1 重组活病毒疫苗的安全性及评定 | 第19页 |
| 1．1．5．2 评定免疫效力的主要依据 | 第19-20页 |
| 1．1．6 结语 | 第20页 |
| 1．2 猪细小病毒分子生物学研究进展 | 第20-30页 |
| 1．2．1 概述 | 第20-21页 |
| 1．2．2 PPV的基因组结构 | 第21-23页 |
| 1．2．3 PPV基因组的转录 | 第23-24页 |
| 1．2．4 PPV病毒基因组编码的蛋白 | 第24-26页 |
| 1．2．4．1 非结构蛋白 | 第24-25页 |
| 1．2．4．2 病毒的结构蛋白 | 第25-26页 |
| 1．2．4．3 结构蛋白的免疫原性 | 第26页 |
| 1．2．5 PPV的基因表达调控 | 第26-28页 |
| 1．2．5．1 转录水平的调控 | 第27-28页 |
| 1．2．5．2 转录后水平的调控 | 第28页 |
| 1．2．6 细小病毒基因工程疫苗研究进展 | 第28-29页 |
| 1．2．7 结语 | 第29-30页 |
| 2． 引言 | 第30页 |
| 3． 材料与方法 | 第30-41页 |
| 3．1 菌株、质粒、引物 | 第30-33页 |
| 3．1．1 培养基 | 第31页 |
| 3．1．2 酶及其它试剂 | 第31页 |
| 3．1．3 主要溶液及配制 | 第31-33页 |
| 3．1．4 仪器设备 | 第33页 |
| 3．2 方法 | 第33-41页 |
| 3．2．1 GH质粒的转化与提取鉴定 | 第33-36页 |
| 3．2．2 PPV VP_2基因的扩增与克隆 | 第36-37页 |
| 3．2．3 重组质粒PPW的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| 3．2．4 PUSK质粒的转化提取及鉴定 | 第38-39页 |
| 3．2．5 PUSP转移载体构建 | 第39-40页 |
| 3．2．6 重组质粒PUSP的鉴定 | 第40-41页 |
| 4． 结果与分析 | 第41-46页 |
| 4．1 GH质粒的酶切鉴定结果 | 第41-42页 |
| 4．2 PCR扩增结果与分析 | 第42页 |
| 4．3 高效感受态细胞转化效率的检测 | 第42-43页 |
| 4．4 重组质粒PPW酶切鉴定 | 第43-44页 |
| 4．4．1 单酶切鉴定结果 | 第43页 |
| 4．4．2 双酶切鉴定结果 | 第43-44页 |
| 4．5 PUSK质粒酶切鉴定结果 | 第44-45页 |
| 4．6 回收片段的结果 | 第45页 |
| 4．7 重组质粒PUSP的酶切鉴果 | 第45-46页 |
| 4．7．1 单酶切结果分析 | 第45-46页 |
| 4．7．2 双酶切结果分析 | 第46页 |
| 5． 结论与讨论 | 第46-52页 |
| 5．1 讨论 | 第46-50页 |
| 5．1．1 伪狂犬病病毒gG基因表达外源基因的讨论 | 第46-48页 |
| 5．1．2 关于模板的选择 | 第48页 |
| 5．1．3 扩增PPV VP_2引物设计 | 第48-49页 |
| 5．1．4 关于T载体的选择 | 第49页 |
| 5．1．5 关于VP_2基因的扩增 | 第49页 |
| 5．1．6 关于高效感受态细胞的制备 | 第49页 |
| 5．1．7 关于PPW质粒插入片段的正确性 | 第49-50页 |
| 5．1．8 关于PUSP质粒插入片段的正确 | 第50页 |
| 5．2 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 英文摘要 | 第60页 |
