| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-27页 |
| 1 果实着色研究 | 第15-17页 |
| ·花青苷的基本结构和种类 | 第15-16页 |
| ·花青苷在果实中的分布 | 第16-17页 |
| 2 果实中花青苷研究进展 | 第17-22页 |
| ·花青苷生物合成途径 | 第17-18页 |
| ·花青苷合成的结构基因 | 第18-20页 |
| ·PAL | 第18-19页 |
| ·CHS 和 CHI | 第19页 |
| ·UFGT | 第19页 |
| ·其他 | 第19-20页 |
| ·花青苷合成的调节基因 | 第20页 |
| ·外界环境等因素对花青苷合成的影响 | 第20-22页 |
| ·光照 | 第20-21页 |
| ·温度 | 第21页 |
| ·矿质元素 | 第21页 |
| ·激素 | 第21-22页 |
| ·糖、酸等 | 第22页 |
| 3 cDNA-AFLP 差异显示技术研究进展 | 第22-24页 |
| ·cDNA-AFLP 技术原理及特点 | 第22-23页 |
| ·cDNA-AFLP 技术在分离差异表达基因上的应用 | 第23-24页 |
| 4 立项意义 | 第24-25页 |
| 5 研究内容及技术路线 | 第25-27页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 ‘法兰地’草莓果实着色相关生理生化指标的测定 | 第27-33页 |
| 1 材料与方法 | 第27-29页 |
| ·试验材料 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-29页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第27-28页 |
| ·可滴定酸含量的测定 | 第28页 |
| ·花青苷含量的测定 | 第28页 |
| ·类黄酮物质含量的测定 | 第28-29页 |
| ·酚类物质含量的测定 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-32页 |
| ·草莓成熟过程中可溶性糖、酸含量的变化 | 第29-30页 |
| ·草莓果实成熟过程花青苷含量的变化 | 第30页 |
| ·草莓果实成熟过程类黄酮物质含量的变化 | 第30-31页 |
| ·草莓果实成熟过程酚类物质含量的变化 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 ‘法兰地’草莓果实 cDNA-AFLP 技术体系的构建 | 第33-50页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·主要仪器、设备 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·所用引物 | 第33-34页 |
| 2 试验方法 | 第34-41页 |
| ·总 RNA 的提取与检测 | 第34-36页 |
| ·无菌、无 RNase 环境的创造 | 第34-35页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第35页 |
| ·总 RNA 的检测 | 第35-36页 |
| ·cDNA 的合成 | 第36-37页 |
| ·cDNA 第一链的获得 | 第36页 |
| ·cDNA 第二链的合成 | 第36页 |
| ·cDNA 片段的纯化与检测 | 第36-37页 |
| ·cDNA 的酶切及连接 | 第37-38页 |
| ·预扩增 | 第38页 |
| ·选择性扩增 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第39-41页 |
| ·电泳玻璃板的准备及组装 | 第39页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的制备及灌胶 | 第39-40页 |
| ·扩增产物凝胶电泳 | 第40页 |
| ·银染显色 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-48页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·双链 cDNA 质量 | 第42页 |
| ·预扩增 | 第42-43页 |
| ·反应体系中各因子对选择性扩增的影响 | 第43-46页 |
| ·cDNA 模板用量对选择性扩增的影响 | 第43-44页 |
| ·dNTP 浓度对选择性扩增的影响 | 第44-45页 |
| ·引物浓度对选择性扩增的影响 | 第45-46页 |
| ·Ex-Taq 酶浓度对选择性扩增的影响 | 第46页 |
| ·部分选择性扩增产物聚丙烯酰胺凝胶图谱 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| ·草莓果实总 RNA 的提取 | 第48页 |
| ·选择性扩增体系 | 第48页 |
| ·cDNA-AFLP 试验注意事项 | 第48-50页 |
| 第四章 差异片段的分离、验证与分析 | 第50-62页 |
| 1 试剂 | 第50页 |
| 2 试验方法 | 第50-55页 |
| ·差异片段的分离 | 第50-51页 |
| ·差异片段的回收 | 第50页 |
| ·差异片段的二次 PCR 扩增 | 第50页 |
| ·二次扩增产物的回收 | 第50-51页 |
| ·差异片段 cDNA 阳性验证 | 第51-54页 |
| ·杂交相关溶液的配制 | 第51页 |
| ·探针的制备 | 第51-52页 |
| ·探针效率的检测 | 第52-53页 |
| ·反向 Northern 杂交 | 第53-54页 |
| ·差异片段的分析 | 第54-55页 |
| ·目的片段的连接 | 第54页 |
| ·连接产物的转化 | 第54页 |
| ·菌液 PCR 检测 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-60页 |
| ·差异片段的二次 PCR 扩增 | 第55页 |
| ·差异片段的反向 Northern 杂交 | 第55-57页 |
| ·探针效率检测 | 第56页 |
| ·杂交结果分析 | 第56-57页 |
| ·测序结果分析 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| ·反向 Northern 杂交注意事项 | 第60-61页 |
| ·阳性验证分析 | 第61页 |
| ·测序结果分析 | 第61-62页 |
| 第五章 草莓果实着色基因 UFGT 的克隆与分析 | 第62-75页 |
| 1 材料 | 第62页 |
| ·植物材料 | 第62页 |
| ·仪器设备 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62页 |
| ·引物合成与测序 | 第62页 |
| 2 方法 | 第62-68页 |
| ·总 RNA 的提取及检测 | 第62页 |
| ·总 RNA 的逆转录 | 第62-64页 |
| ·3'-RACE-Ready cDNA 的合成 | 第62-63页 |
| ·5'-RACE-Ready cDNA 的合成 | 第63-64页 |
| ·UFGT 基因的 3'-RACE | 第64-66页 |
| ·引物设计 | 第64页 |
| ·第一轮 PCR 扩增 | 第64-65页 |
| ·第二轮 PCR 扩增 | 第65-66页 |
| ·目的片段的回收 | 第66页 |
| ·目的片段的连接转化与验证 | 第66页 |
| ·UFGT 基因的 5'-RACE | 第66-67页 |
| ·引物设计 | 第66页 |
| ·5 '末端的第一轮 PCR 扩增 | 第66页 |
| ·第二轮 PCR 扩增 | 第66-67页 |
| ·目的片段的回收 | 第67页 |
| ·目的片段的连接转化与验证 | 第67页 |
| ·UFGT 基因的 ORF 扩增 | 第67-68页 |
| ·引物设计 | 第67页 |
| ·UFGT 基因的 ORF 扩增 | 第67-68页 |
| ·目的片段的回收 | 第68页 |
| ·目的片段的连接转化与测序 | 第68页 |
| ·生物信息学分析 | 第68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-73页 |
| ·UFGT 基因部分序列 | 第68页 |
| ·草莓果实 UFGT 基因的 3'-RACE | 第68-69页 |
| ·草莓果实 UFGT 基因的 5'-RACE | 第69-71页 |
| ·草莓果实 UFGT 基因 cDNA 全长的获得 | 第71-72页 |
| ·草莓果实 UFGT 基因的 ORF 扩增 | 第72-73页 |
| ·生物信息学分析 | 第73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 第六章 小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 附录 | 第84-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
