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结核分枝杆菌PE_PGRS17基因(Rv0978c)的功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第1章 综述第10-16页
   ·PE_PGRS蛋白的结构第10-11页
   ·PE_PGRS在分枝菌属中的亚细胞定位和表达情况第11-12页
   ·PE_PGRS蛋白的功能第12-14页
     ·PE_PGRS蛋白影响结核分枝杆菌的细胞结构和菌落形态第12页
     ·PE_PGRS蛋白影响分枝杆菌的存活力第12-13页
     ·PE_PGRS蛋白是可变异抗原第13页
     ·PE_PGRS家族与肉芽肿第13-14页
   ·PE_PGRS家族相关成员第14-15页
   ·展望第15-16页
第2章 前言第16-17页
第3章 实验材料和方法第17-27页
   ·实验材料第17-19页
     ·实验菌株、质粒和细胞第17页
     ·培养基和主要试剂第17-19页
     ·主要仪器第19页
   ·实验方法第19-27页
     ·结核分枝杆菌H37Rv基因组的提取:CTAB法第19页
     ·结核分枝杆菌PE_PGRS17基因(Rv0978c)PCR引物的设计与合成第19页
     ·结核分枝杆菌PE_PGRS17基因(Rv0978c)扩增第19-20页
     ·PCR扩增产物的柱式胶回收纯化第20页
     ·Rv0978c基因的TA克隆第20页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第20页
     ·质粒的提取第20-21页
     ·Rv0978c基因亚克隆至pNIT-myc质粒,并转化至大肠杆菌DH5α保种第21页
     ·Rv0978c基因重组耻垢分枝杆菌mc2155的构建和鉴定第21-22页
     ·重组质粒在耻垢分枝杆菌中的表达及验证第22-23页
     ·U937细胞的培养第23页
     ·LDH实验检测U937细胞被重组耻垢分枝杆菌侵染后的存活力变化第23-24页
     ·检测U937被重组耻垢分枝杆菌侵染后细胞因子表达的变化第24-26页
     ·数据处理第26-27页
第4章 结果与分析第27-34页
   ·Rv978c基因的PCR扩增和鉴定第27页
   ·在耻垢分枝杆菌中构建并鉴定重组质粒pNIT-Rv0978c第27-28页
   ·重组耻垢分枝杆菌杆菌阳性克隆筛选第28页
   ·诱导Rv0978c基因在重组耻垢分枝杆菌中表达,并通过Westesn Blot鉴定重组蛋白第28页
   ·Rv0978c基因的表达对重组耻垢分枝杆菌生长快慢无影响第28-29页
   ·表达Rv0978c基因的重组耻垢分枝杆菌有助于在U937中存活第29页
   ·表达Rv0978c基因的重组耻垢分枝杆菌促进U937细胞的死亡第29-30页
   ·表达Rv0978c基因的重组分枝杆菌促进U937分泌TNF-α和IL-10第30-32页
     ·半定量RT-PCR检测被重组耻垢分枝杆菌侵染的U937细胞内TNF-α和IL-10转录情况第30-31页
     ·ELISA定量检测被重组耻垢分枝杆菌侵染的U937细胞内TNF-α和IL-10表达量变化第31-32页
   ·表达Rv0978c基因的重组分枝杆菌依赖ERK调控TNF-α的分泌第32-34页
     ·半定量RT-PCR检测经抑制剂处理的U937被侵染后,TNF-α和IL-10转录情况第32页
     ·ELISA定量检测经抑制剂处理的U937被侵染后,TNF-α和IL-10的表达变化第32-34页
第5章 结论与展望第34-36页
   ·实验结论与分析第34-35页
   ·展望第35-36页
参考文献第36-40页
致谢第40-41页
在学期间所发表的文章第41页

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