摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第1章 综述 | 第10-16页 |
·PE_PGRS蛋白的结构 | 第10-11页 |
·PE_PGRS在分枝菌属中的亚细胞定位和表达情况 | 第11-12页 |
·PE_PGRS蛋白的功能 | 第12-14页 |
·PE_PGRS蛋白影响结核分枝杆菌的细胞结构和菌落形态 | 第12页 |
·PE_PGRS蛋白影响分枝杆菌的存活力 | 第12-13页 |
·PE_PGRS蛋白是可变异抗原 | 第13页 |
·PE_PGRS家族与肉芽肿 | 第13-14页 |
·PE_PGRS家族相关成员 | 第14-15页 |
·展望 | 第15-16页 |
第2章 前言 | 第16-17页 |
第3章 实验材料和方法 | 第17-27页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·实验菌株、质粒和细胞 | 第17页 |
·培养基和主要试剂 | 第17-19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-27页 |
·结核分枝杆菌H37Rv基因组的提取:CTAB法 | 第19页 |
·结核分枝杆菌PE_PGRS17基因(Rv0978c)PCR引物的设计与合成 | 第19页 |
·结核分枝杆菌PE_PGRS17基因(Rv0978c)扩增 | 第19-20页 |
·PCR扩增产物的柱式胶回收纯化 | 第20页 |
·Rv0978c基因的TA克隆 | 第20页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第20页 |
·质粒的提取 | 第20-21页 |
·Rv0978c基因亚克隆至pNIT-myc质粒,并转化至大肠杆菌DH5α保种 | 第21页 |
·Rv0978c基因重组耻垢分枝杆菌mc2155的构建和鉴定 | 第21-22页 |
·重组质粒在耻垢分枝杆菌中的表达及验证 | 第22-23页 |
·U937细胞的培养 | 第23页 |
·LDH实验检测U937细胞被重组耻垢分枝杆菌侵染后的存活力变化 | 第23-24页 |
·检测U937被重组耻垢分枝杆菌侵染后细胞因子表达的变化 | 第24-26页 |
·数据处理 | 第26-27页 |
第4章 结果与分析 | 第27-34页 |
·Rv978c基因的PCR扩增和鉴定 | 第27页 |
·在耻垢分枝杆菌中构建并鉴定重组质粒pNIT-Rv0978c | 第27-28页 |
·重组耻垢分枝杆菌杆菌阳性克隆筛选 | 第28页 |
·诱导Rv0978c基因在重组耻垢分枝杆菌中表达,并通过Westesn Blot鉴定重组蛋白 | 第28页 |
·Rv0978c基因的表达对重组耻垢分枝杆菌生长快慢无影响 | 第28-29页 |
·表达Rv0978c基因的重组耻垢分枝杆菌有助于在U937中存活 | 第29页 |
·表达Rv0978c基因的重组耻垢分枝杆菌促进U937细胞的死亡 | 第29-30页 |
·表达Rv0978c基因的重组分枝杆菌促进U937分泌TNF-α和IL-10 | 第30-32页 |
·半定量RT-PCR检测被重组耻垢分枝杆菌侵染的U937细胞内TNF-α和IL-10转录情况 | 第30-31页 |
·ELISA定量检测被重组耻垢分枝杆菌侵染的U937细胞内TNF-α和IL-10表达量变化 | 第31-32页 |
·表达Rv0978c基因的重组分枝杆菌依赖ERK调控TNF-α的分泌 | 第32-34页 |
·半定量RT-PCR检测经抑制剂处理的U937被侵染后,TNF-α和IL-10转录情况 | 第32页 |
·ELISA定量检测经抑制剂处理的U937被侵染后,TNF-α和IL-10的表达变化 | 第32-34页 |
第5章 结论与展望 | 第34-36页 |
·实验结论与分析 | 第34-35页 |
·展望 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
在学期间所发表的文章 | 第41页 |