| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-23页 |
| ·猪瘟和猪瘟病毒概述 | 第9-11页 |
| ·猪瘟 | 第9页 |
| ·猪瘟病毒 | 第9-11页 |
| ·猪瘟病毒的遗传分型 | 第11页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征及其病毒概述 | 第11-13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第11-12页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第12-13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传分型 | 第13页 |
| ·荧光定量PCR | 第13-16页 |
| ·荧光定量PCR 技术的原理 | 第14页 |
| ·荧光定量PCR 技术的两种定量形式 | 第14页 |
| ·荧光定量PCR 技术的种类 | 第14-16页 |
| ·荧光定量PCR 技术在动物疾病检测中的应用 | 第16页 |
| ·猪瘟及猪繁殖与呼吸综合征诊断方法的研究现状 | 第16-22页 |
| ·病原学检测 | 第16-17页 |
| ·血清学检测 | 第17-18页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第18-19页 |
| ·分子诊断 | 第19-20页 |
| ·鉴别诊断 | 第20-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 鉴别猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征的复合荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第23-40页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·病毒、细胞与质粒 | 第24页 |
| ·主要实验仪器及试剂 | 第24页 |
| ·引物和探针 | 第24-25页 |
| ·病毒RNA 提取和反转录 | 第25-26页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 阳性标准品 | 第26页 |
| ·常规PCR | 第26页 |
| ·同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征病毒的复合荧光定量RT-PCR 反应条件的优化 | 第26-27页 |
| ·特异性试验 | 第27页 |
| ·敏感性试验 | 第27页 |
| ·重复性试验 | 第27页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 与常规RT-PCR 的符合率试验 | 第27页 |
| ·病毒分离试验 | 第27-28页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 对现地样品的检测和种系发生分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-37页 |
| ·退火温度优化 | 第28-30页 |
| ·探针浓度优化 | 第30-31页 |
| ·Mg~(2+)浓度的优化 | 第31-32页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 反应参数的优化结果及标准曲线的建立 | 第32-33页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 的特异性 | 第33-34页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 的敏感性 | 第34-35页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 的重复性 | 第35页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 与常规RT-PCR 的符合率 | 第35-36页 |
| ·阳性样品的病毒分离试验 | 第36页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 对现地样品的检测和种系发生分析 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 方法的可行性和必要性 | 第37-38页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 方法的建立和优化 | 第38页 |
| ·选择质粒作为标准品的原因 | 第38页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR 方法的影响因素和改进措施 | 第38-40页 |
| 第三章 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简历 | 第48页 |
