| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-43页 |
| 第一章 动物细胞核移植的研究进展 | 第13-25页 |
| ·同种动物核移植的研究现状 | 第13-15页 |
| ·胚胎细胞来源的同种动物核移植 | 第14页 |
| ·体细胞来源的同种动物核移植 | 第14-15页 |
| ·异种动物核移植的研究现状 | 第15-17页 |
| ·胚胎细胞来源的异种动物核移植 | 第15-16页 |
| ·体细胞来源的异种动物核移植 | 第16-17页 |
| ·动物体细胞核移植的机理 | 第17-20页 |
| ·Ca~(2+)启动供体核的再程序化 | 第18页 |
| ·MPF 对供体核的再程序化 | 第18-19页 |
| ·卵子细胞质对供体核的再程序化 | 第19-20页 |
| ·DNA 甲基化对供体核的再程序化 | 第20页 |
| ·动物核移植的应用前景 | 第20-22页 |
| ·治疗性克隆 | 第21页 |
| ·畜牧业生产 | 第21页 |
| ·核移植技术和转基因技术结合 | 第21-22页 |
| ·保护濒危野生动物 | 第22页 |
| ·理论价值 | 第22页 |
| ·动物核移植存在的问题 | 第22-25页 |
| 第二章 胚胎干细胞的研究进展 | 第25-35页 |
| ·胚胎干细胞的概念和基本特征 | 第25页 |
| ·ESC 的胚胎来源 | 第25-28页 |
| ·孤雌激活胚胎 | 第25-26页 |
| ·胚胎生殖干细胞 | 第26页 |
| ·体外受精胚胎 | 第26-27页 |
| ·核移植胚胎 | 第27-28页 |
| ·其他来源 | 第28页 |
| ·胚胎干细胞研究历史 | 第28-29页 |
| ·胚胎干细胞的生物学特征 | 第29-32页 |
| ·形态学特征 | 第29-30页 |
| ·核型分析 | 第30页 |
| ·端粒酶活性 | 第30-31页 |
| ·阶段性特异性胚胎细胞表面抗原的表达 | 第31页 |
| ·转录因子Oct-4 的表达 | 第31页 |
| ·碱性磷酸酶的活性 | 第31页 |
| ·体内外分化能力 | 第31-32页 |
| ·胚胎干细胞应用前景 | 第32-34页 |
| ·克隆和生产转基因动物 | 第32页 |
| ·动物发育生物学研究 | 第32-33页 |
| ·组织器官修复和移植治疗研究 | 第33-34页 |
| ·存在的问题展望 | 第34-35页 |
| 第三章 人胚胎干细胞建系方法的研究 | 第35-43页 |
| ·HESCS 分离培养的方法 | 第36-37页 |
| ·ICM 分离的方法 | 第36-37页 |
| ·HESCS 培养体系 | 第37-40页 |
| ·含饲养层的培养体系 | 第38-39页 |
| ·无饲养层培养体系 | 第39-40页 |
| ·胚胎干细胞的传代方法 | 第40-41页 |
| ·机械法 | 第40页 |
| ·酶消化法 | 第40-41页 |
| ·HESCS 的鉴定方法 | 第41-42页 |
| ·形态学鉴定 | 第41页 |
| ·碱性磷酸酶活性 | 第41页 |
| ·阶段特异性胚胎细胞表面抗原 | 第41页 |
| ·端粒酶活性分析 | 第41页 |
| ·全能性基因的表达 | 第41页 |
| ·核型分析 | 第41-42页 |
| ·分化潜能 | 第42页 |
| ·问题与展望 | 第42-43页 |
| 第二部分 实验研究 | 第43-84页 |
| 前言 | 第43-45页 |
| 第四章 人成纤维细胞单克隆的制备及扩大培养 | 第45-52页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·实验试剂 | 第45页 |
| ·实验仪器 | 第45页 |
| ·主要液体的配制 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·人皮肤组织的采集及原代培养 | 第46页 |
| ·人皮肤成纤维细胞的传代培养及冷冻与复苏 | 第46-47页 |
| ·细胞单克隆的制备与扩大培养 | 第47-48页 |
| ·染色体Giemsa 染色的核型分析 | 第48页 |
| ·试验数据的统计分析 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-49页 |
| ·细胞单克隆的分离与扩大培养 | 第48-49页 |
| ·分离克隆的染色体核型分析 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第五章 人-山羊异质核移植程序的优化 | 第52-60页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·实验试剂 | 第52页 |
| ·实验仪器 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·供体细胞的准备 | 第53页 |
| ·卵母细胞的体外成熟及核移植 | 第53页 |
| ·电融合 | 第53-55页 |
| ·结果 | 第55-58页 |
| ·电压对人-山羊异质核移植电融合效率的影响 | 第55页 |
| ·脉冲时程对人-山羊异质核移植电融合效率的影响 | 第55-56页 |
| ·脉冲次数对人-山羊异质核移植电融合效率的影响 | 第56页 |
| ·融合与激活间隔时间对重组胚胎体外发育的影响 | 第56-57页 |
| ·培养体系对重组胚胎体外发育的影响 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第六章 TSA 处理对人-山羊异质克隆胚胎发育的影响 | 第60-67页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·实验试剂 | 第61页 |
| ·实验仪器 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-63页 |
| ·TSA 处理供体细胞 | 第61页 |
| ·卵母细胞的体外成熟及核移植 | 第61-62页 |
| ·电融合 | 第62页 |
| ·克隆胚胎的激活与培养 | 第62页 |
| ·TSA 处理重构胚 | 第62-63页 |
| ·试验数据的统计分析 | 第63页 |
| ·结果 | 第63-65页 |
| ·TSA对供体细胞的影响 | 第63页 |
| ·TSA 处理供体细胞对克隆胚早期发育力的影响 | 第63-64页 |
| ·TSA 处理重构胚对克隆胚早期发育的影响 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第七章 不同饲养层对人胚胎干细胞支持情况 | 第67-76页 |
| ·材料与方法 | 第67-70页 |
| ·实验试剂 | 第67-68页 |
| ·实验仪器 | 第68页 |
| ·饲养层细胞的准备 | 第68页 |
| ·细胞饲养层的制备 | 第68-69页 |
| ·人-山羊异质核移植囊胚的生产 | 第69页 |
| ·ICM 的分离 | 第69页 |
| ·摸索适合hESCs 生长的饲养层条件 | 第69-70页 |
| ·统计学分析 | 第70页 |
| ·结果 | 第70-72页 |
| ·丝裂霉素处理时间对不同细胞复苏率的影响 | 第70-71页 |
| ·不同类型细胞饲养层对hESCs 生长的影响 | 第71页 |
| ·不同密度的饲养层对hESCs 生长的影响 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第八章 INT-HESCS 的无动物源性成份限定性培养 | 第76-84页 |
| ·材料与方法 | 第76-78页 |
| ·实验试剂 | 第76-77页 |
| ·实验仪器 | 第77页 |
| ·HFF 饲养层细胞的制备 | 第77页 |
| ·iNT-hESCs 细胞的培养、传代 | 第77页 |
| ·iNT-hESCs 的鉴定 | 第77-78页 |
| ·统计学分析 | 第78页 |
| ·结果 | 第78-81页 |
| ·HESCO 对人-山羊异质核移植来源的iNT-hESCs 生长支持情况 | 第78-80页 |
| ·纤连蛋白对iNT-hESCs 生长的影响 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-98页 |
| 缩略词 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简介 | 第101页 |
