中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
图表目录 | 第9-10页 |
缩略用语 | 第10-12页 |
第一部分 前言 | 第12-26页 |
·铜绿假单胞菌的性质及危害 | 第12-13页 |
·细菌质粒的基本特征 | 第13-23页 |
·质粒的不相容性及质粒拷贝数 | 第14-15页 |
·质粒的稳定性 | 第15-17页 |
·细菌质粒复制机制研究 | 第17-23页 |
·重组质粒载体的应用 | 第23-24页 |
·研究目的和意义 | 第24-26页 |
第二部分 实验材料和方法 | 第26-38页 |
·实验材料 | 第26-29页 |
·菌株和质粒 | 第26-27页 |
·培养基的配置 | 第27-28页 |
·试剂 | 第28页 |
·仪器 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-38页 |
·质粒的小量提取 | 第29-30页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第30页 |
·感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
·电转化 | 第31页 |
·质粒或DNA片段的酶切和连接 | 第31-32页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第32-33页 |
·假单胞菌的分离及质粒提取 | 第33-34页 |
·穿梭载体pUM1的构建及pMM1质粒序列测定 | 第34页 |
·温度敏感载体pUM8的构建 | 第34-35页 |
·温度敏感载体pUM8质粒稳定性的测定 | 第35-36页 |
·温度敏感载体pUM8质粒的序列测定及分析 | 第36页 |
·利用温度敏感载体pUM8进行PA3899的敲除试验 | 第36-38页 |
第三部分 实验结果 | 第38-50页 |
·假单胞菌的分离及质粒的提取结果 | 第38-39页 |
·假单胞菌的分离 | 第38页 |
·假单胞菌质粒的提取 | 第38-39页 |
·构建穿梭载体pUM1 | 第39页 |
·pMM1质粒序列测定及序列分析 | 第39-44页 |
·pMM1序列测定 | 第39-40页 |
·pMM1序列分析 | 第40-44页 |
·构建温度敏感载体pUM8 | 第44-46页 |
·测试温度敏感载体pUM8的质粒稳定性 | 第46-47页 |
·温度敏感载体pMM8突变位点的分析 | 第47-48页 |
·PA3899基因敲除实验 | 第48-50页 |
第四部分 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 | 第57-63页 |
致谢 | 第63页 |