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一个新铜绿假单胞菌质粒的分离鉴定及其温度敏感型衍生体的构建

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
图表目录第9-10页
缩略用语第10-12页
第一部分 前言第12-26页
   ·铜绿假单胞菌的性质及危害第12-13页
   ·细菌质粒的基本特征第13-23页
     ·质粒的不相容性及质粒拷贝数第14-15页
     ·质粒的稳定性第15-17页
     ·细菌质粒复制机制研究第17-23页
   ·重组质粒载体的应用第23-24页
   ·研究目的和意义第24-26页
第二部分 实验材料和方法第26-38页
   ·实验材料第26-29页
     ·菌株和质粒第26-27页
     ·培养基的配置第27-28页
     ·试剂第28页
     ·仪器第28-29页
   ·实验方法第29-38页
     ·质粒的小量提取第29-30页
     ·细菌基因组DNA的提取第30页
     ·感受态细胞的制备第30-31页
     ·电转化第31页
     ·质粒或DNA片段的酶切和连接第31-32页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第32-33页
     ·假单胞菌的分离及质粒提取第33-34页
     ·穿梭载体pUM1的构建及pMM1质粒序列测定第34页
     ·温度敏感载体pUM8的构建第34-35页
     ·温度敏感载体pUM8质粒稳定性的测定第35-36页
     ·温度敏感载体pUM8质粒的序列测定及分析第36页
     ·利用温度敏感载体pUM8进行PA3899的敲除试验第36-38页
第三部分 实验结果第38-50页
   ·假单胞菌的分离及质粒的提取结果第38-39页
     ·假单胞菌的分离第38页
     ·假单胞菌质粒的提取第38-39页
   ·构建穿梭载体pUM1第39页
   ·pMM1质粒序列测定及序列分析第39-44页
     ·pMM1序列测定第39-40页
     ·pMM1序列分析第40-44页
   ·构建温度敏感载体pUM8第44-46页
   ·测试温度敏感载体pUM8的质粒稳定性第46-47页
   ·温度敏感载体pMM8突变位点的分析第47-48页
   ·PA3899基因敲除实验第48-50页
第四部分 讨论第50-53页
参考文献第53-57页
附录第57-63页
致谢第63页

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