摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词(Abbreviation) | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 花器官的发育 | 第12-17页 |
·花发育的ABC模型及其发展 | 第12-15页 |
·经典ABC模型 | 第12-13页 |
·花发育的ABCD模型 | 第13-14页 |
·花发育的ABCDE模型 | 第14页 |
·花发育的四重奏模型 | 第14-15页 |
·MADS-box基因研究进展 | 第15-16页 |
·MADS-box基因研究前景 | 第16-17页 |
2 AGAMOUS及其同源基因的功能 | 第17-19页 |
3 植物基因表达方法 | 第19-22页 |
·Northern印迹法 | 第19页 |
·RT-PCR法 | 第19页 |
·实时定量RT-PCR | 第19-20页 |
·原位杂交技术 | 第20-22页 |
第二章 果梅AG基因的克隆与序列分析 | 第22-30页 |
摘要 | 第22页 |
1 材料和方法 | 第22-25页 |
·试验材料与试剂 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-25页 |
·总RNA的提取 | 第23页 |
·cDNA第一链的合成 | 第23页 |
·RT-PCR | 第23页 |
·PCR产物的回收 | 第23页 |
·目的片段T载体的连接,转化及鉴定 | 第23-24页 |
·大肠杆菌质粒提取 | 第24页 |
·序列及系统发育分析 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-30页 |
·总RNA提取 | 第25页 |
·RT-PCR扩增果梅AG基因序列 | 第25-26页 |
·AG基因序列分析 | 第26-28页 |
·同源性分析 | 第26-27页 |
·系统发育分析 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-30页 |
第三章 利用RT-PCR和荧光定量PCR研究AG基因的表达模式 | 第30-38页 |
摘要 | 第30页 |
1 材料和方法 | 第30-32页 |
·试验材料 | 第30页 |
·各器官RNA的提取 | 第30页 |
·cDNA第一链的合成 | 第30页 |
·果梅AG基因的RT-PCR扩增 | 第30-31页 |
·定量PCR(qRT-PCR) | 第31-32页 |
·RNA提取和cDNA合成 | 第31页 |
·蛋白延伸因子EF-1a和AG基因片段的克隆 | 第31页 |
·定量PCR | 第31-32页 |
2 结果分析 | 第32-36页 |
·AG基因在不同果梅组织中的RT-PCR表达分析 | 第32-33页 |
·荧光定量PCR | 第33-36页 |
·RT-PCR引物的特异性扩增检测 | 第33-34页 |
·荧光定量PCR时空表达 | 第34-35页 |
·荧光定量后琼脂糖凝胶电泳检测 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 原位杂交技术研究果梅AG基因表达 | 第38-44页 |
摘要 | 第38页 |
1 材料 | 第38页 |
·植物材料 | 第38页 |
·载体 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
2 原位杂交方法 | 第38-41页 |
·正义、反义探针制备 | 第39页 |
·探针半定量 | 第39页 |
·果梅花芽的固定与石蜡包埋 | 第39-40页 |
·杂交和显色 | 第40-41页 |
3 结果及分析 | 第41-44页 |
·探针半定量 | 第41-42页 |
·结果分析与讨论 | 第42-44页 |
第五章 农杆菌介导果梅AG基因转化烟草 | 第44-54页 |
摘要 | 第44页 |
1 材料和方法 | 第44-48页 |
·材料 | 第44-45页 |
·植物材料 | 第44-45页 |
·试剂 | 第45页 |
·烟草组织培养培养基 | 第45页 |
·试验方法 | 第45-48页 |
·AG基因双元表达载体的构建及鉴定 | 第45页 |
·农杆菌菌株的活化 | 第45页 |
·烟草叶盘法遗传转化 | 第45-46页 |
·转AG基因烟草的分子检测 | 第46-48页 |
2 结果与分析 | 第48-51页 |
·AG基因双元表达载体的构建及鉴定 | 第48-49页 |
·转AG基因烟草的PCR检测 | 第49-50页 |
·转AG基因烟草的RT-PCR检测 | 第50页 |
·转AG基因烟草表型观察 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
全文结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 本文中常用试剂及培养基的配置 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |