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梅AGAMOUS(AG)基因的克隆与表达分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词(Abbreviation)第10-11页
前言第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
 1 花器官的发育第12-17页
   ·花发育的ABC模型及其发展第12-15页
     ·经典ABC模型第12-13页
     ·花发育的ABCD模型第13-14页
     ·花发育的ABCDE模型第14页
     ·花发育的四重奏模型第14-15页
   ·MADS-box基因研究进展第15-16页
   ·MADS-box基因研究前景第16-17页
 2 AGAMOUS及其同源基因的功能第17-19页
 3 植物基因表达方法第19-22页
   ·Northern印迹法第19页
   ·RT-PCR法第19页
   ·实时定量RT-PCR第19-20页
   ·原位杂交技术第20-22页
第二章 果梅AG基因的克隆与序列分析第22-30页
 摘要第22页
 1 材料和方法第22-25页
   ·试验材料与试剂第22-23页
   ·方法第23-25页
     ·总RNA的提取第23页
     ·cDNA第一链的合成第23页
     ·RT-PCR第23页
     ·PCR产物的回收第23页
     ·目的片段T载体的连接,转化及鉴定第23-24页
     ·大肠杆菌质粒提取第24页
     ·序列及系统发育分析第24-25页
 2 结果与分析第25-30页
   ·总RNA提取第25页
   ·RT-PCR扩增果梅AG基因序列第25-26页
   ·AG基因序列分析第26-28页
     ·同源性分析第26-27页
     ·系统发育分析第27-28页
  3 讨论第28-30页
第三章 利用RT-PCR和荧光定量PCR研究AG基因的表达模式第30-38页
 摘要第30页
 1 材料和方法第30-32页
   ·试验材料第30页
   ·各器官RNA的提取第30页
   ·cDNA第一链的合成第30页
   ·果梅AG基因的RT-PCR扩增第30-31页
   ·定量PCR(qRT-PCR)第31-32页
     ·RNA提取和cDNA合成第31页
     ·蛋白延伸因子EF-1a和AG基因片段的克隆第31页
     ·定量PCR第31-32页
 2 结果分析第32-36页
   ·AG基因在不同果梅组织中的RT-PCR表达分析第32-33页
   ·荧光定量PCR第33-36页
     ·RT-PCR引物的特异性扩增检测第33-34页
     ·荧光定量PCR时空表达第34-35页
     ·荧光定量后琼脂糖凝胶电泳检测第35-36页
 3 讨论第36-38页
第四章 原位杂交技术研究果梅AG基因表达第38-44页
 摘要第38页
 1 材料第38页
   ·植物材料第38页
   ·载体第38页
   ·主要试剂第38页
 2 原位杂交方法第38-41页
   ·正义、反义探针制备第39页
   ·探针半定量第39页
   ·果梅花芽的固定与石蜡包埋第39-40页
   ·杂交和显色第40-41页
 3 结果及分析第41-44页
   ·探针半定量第41-42页
   ·结果分析与讨论第42-44页
第五章 农杆菌介导果梅AG基因转化烟草第44-54页
 摘要第44页
 1 材料和方法第44-48页
   ·材料第44-45页
     ·植物材料第44-45页
     ·试剂第45页
     ·烟草组织培养培养基第45页
   ·试验方法第45-48页
     ·AG基因双元表达载体的构建及鉴定第45页
     ·农杆菌菌株的活化第45页
     ·烟草叶盘法遗传转化第45-46页
     ·转AG基因烟草的分子检测第46-48页
 2 结果与分析第48-51页
   ·AG基因双元表达载体的构建及鉴定第48-49页
   ·转AG基因烟草的PCR检测第49-50页
   ·转AG基因烟草的RT-PCR检测第50页
   ·转AG基因烟草表型观察第50-51页
 3 讨论第51-54页
全文结论第54-56页
参考文献第56-62页
附录 本文中常用试剂及培养基的配置第62-66页
致谢第66页

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