| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第14-17页 |
| ·概述 | 第14页 |
| ·PRRSV 病原学特性 | 第14-15页 |
| ·PRRSV 基因组结构及编码蛋白 | 第15-16页 |
| ·PRRSV 分子疫苗研究 | 第16页 |
| ·PRRSV 分子生物学诊断 | 第16-17页 |
| ·展望 | 第17页 |
| ·PRRSV 免疫学研究进展 | 第17-21页 |
| ·获得性免疫 | 第17-18页 |
| ·PRRSV 的免疫调节与逃避 | 第18-19页 |
| ·PRRSV 的遗传多样性及其在研制PRRS 疫苗上的应用 | 第19-20页 |
| ·PRRSV 通用疫苗的研究展望 | 第20-21页 |
| ·PRRSV 疫苗佐剂研究进展 | 第21-27页 |
| ·细胞因子 | 第21-23页 |
| ·化学制剂 | 第23-25页 |
| ·细菌产物 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| ·研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 PRRSV GS 株的基因组测序及其结构蛋白抗原表位的预测 | 第28-38页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·病料 | 第28-29页 |
| ·Marc-145 细胞 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·仪器与设备 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-33页 |
| ·病毒细胞分离与培养 | 第29-30页 |
| ·PRRSV 总RNA 的提取 | 第30页 |
| ·PRRSV 的RT-PCR 扩增 | 第30-33页 |
| ·目的基因的测序与分析 | 第33页 |
| ·PRRSV 结构蛋白抗原表位的预测 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-37页 |
| ·病毒分离 | 第33页 |
| ·PRRSV 基因片段的RT-PCR 结果 | 第33-34页 |
| ·PRRSV GS 株的基因序列分析 | 第34-35页 |
| ·结构蛋白抗原表位的预测 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 高致病性猪蓝耳病病毒RT-PCR 诊断技术研究 | 第38-45页 |
| ·材料与方法 | 第38-40页 |
| ·酶及主要试剂 | 第38页 |
| ·引物设计 | 第38页 |
| ·毒株 | 第38-39页 |
| ·病料的处理 | 第39页 |
| ·RNA 提取 | 第39页 |
| ·RT-PCR 扩增体系及条件 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR 产物的检测 | 第40页 |
| ·RT-PCR 产物的测序和比对 | 第40页 |
| ·RT-PCR 的敏感性和特异性检测 | 第40页 |
| ·疑似PRRS 的临床样品的检测 | 第40页 |
| ·试验结果 | 第40-43页 |
| ·高致病性猪蓝耳病病毒RT-PCR 检测体系的建立 | 第40页 |
| ·RT-PCR 产物的测序和比对结果 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR 检测体系的敏感性和特异性检测 | 第41-42页 |
| ·对疑似PRRS 的临床样品的检测结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 PRRSV GP3 和GP5 结构蛋白DNA 疫苗的构建及初步免疫试验研究 | 第45-55页 |
| ·材料与方法 | 第45-51页 |
| ·质粒、菌株、细胞 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·引物的设计与合成 | 第46页 |
| ·PCR 扩增 | 第46页 |
| ·目的基因的亚克隆与鉴定 | 第46-49页 |
| ·目的片段亚克隆至pBudCE4.1 表达载体的酶切回收 | 第49页 |
| ·重组表达质粒的细胞转染 | 第49-51页 |
| ·动物免疫试验 | 第51页 |
| ·免疫小鼠血清特异性抗体测定 | 第51页 |
| ·试验结果 | 第51-54页 |
| ·GP3 和GP5 基因PCR 扩增结果 | 第51-52页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第52-53页 |
| ·重组质粒的体外表达 | 第53页 |
| ·动物免疫后血清抗体检测结果 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 IFN-γ分子佐剂对PRRSV GP3和GP5 DNA疫苗的免疫增强作用研究 | 第55-64页 |
| ·材料与方法 | 第55-59页 |
| ·质粒、菌株、细胞 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·真核共表达的构建 | 第56页 |
| ·重组表达质粒的细胞转染 | 第56-57页 |
| ·重组质粒在细胞中表达的检测 | 第57-58页 |
| ·动物免疫试验 | 第58页 |
| ·免疫小鼠血清抗体的测定 | 第58页 |
| ·淋巴细胞亚型的检测 | 第58-59页 |
| ·试验结果 | 第59-62页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第59-60页 |
| ·重组质粒的体外表达 | 第60-61页 |
| ·免疫抗体检测 | 第61页 |
| ·FCM 分析外周血淋巴细胞的CD8+和CD4+亚群变化 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第六章 PRRSV GP3、GP5 和猪CD58 基因共表达质粒的构建及其在体外细胞中的表达 | 第64-71页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·质粒、菌株、细胞 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-67页 |
| ·pBud-CD-GP3 和pBud-CD-GP5 真核共表达的构建 | 第64-65页 |
| ·重组表达质粒的细胞转染 | 第65-66页 |
| ·重组质粒在细胞中表达的检测 | 第66-67页 |
| ·试验结果 | 第67-69页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第67-68页 |
| ·重组质粒的体外表达 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| 第七章 全文结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简历 | 第84页 |
