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亚洲棉GaP5CS与GaTPS基因的克隆与功能鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 引言第13-23页
   ·植物渗透调节研究进展第13-18页
     ·植物应对渗透胁迫的适应性第13页
     ·植物渗透调节机制第13页
     ·植物渗透调节物质的种类第13-14页
     ·脯氨酸与植物渗透调节第14-16页
     ·甜菜碱与植物渗透调节第16-17页
     ·海藻糖与植物渗透调节第17-18页
   ·棉花耐旱性研究及耐旱育种第18-20页
     ·渗透调节对棉花耐旱性影响第18-19页
     ·棉花耐旱育种现状第19-20页
   ·研究目的及意义第20-21页
   ·实验技术路线第21-23页
第二章 亚洲棉 GAP5CS 和 GATPS 基因的克隆及序列分析第23-48页
   ·实验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·菌株与质粒第23页
     ·酶、生化试剂与试剂盒第23-24页
   ·实验方法第24-31页
     ·植物材料与胁迫处理第24页
     ·总RNA 的提取及反转录第24-25页
     ·目的基因的分离第25-27页
     ·序列分析第27页
     ·Southern 杂交第27-30页
     ·渗透胁迫条件下GaP5CS 和 GaTPS 基因的表达第30-31页
   ·实验结果与分析第31-46页
     ·RNA 提取第31页
     ·亚洲棉GaP5CS 和 GaTPS 基因的分离第31-33页
     ·亚洲棉GaP5CS 和 GaTPS 基因的生物信息学分析第33-43页
     ·GaP5CS 和 GaTPS 基因的拷贝数分析第43-45页
     ·渗透胁迫条件下GaP5CS 和GaTPS 基因的表达第45-46页
   ·讨论第46-48页
     ·RACE 克隆新基因中存在的问题第46页
     ·GaP5CS 和 GaTPS 基因的分析第46-48页
第三章 亚洲棉 GAP5CS 和 GATPS 基因在 E.COLI 中的表达第48-53页
   ·实验材料与方法第48-50页
     ·菌株与质粒第48页
     ·酶、生化试剂及试剂盒第48页
     ·原核表达载体的构建第48-49页
     ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE 分析第49-50页
   ·实验结果第50-52页
     ·原核表达载体的构建第50-51页
     ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE 分析第51-52页
   ·讨论第52-53页
第四章 亚洲棉 GAP5CS 和 GATPS 基因植物表达载体的构建及转化植物第53-69页
   ·实验材料第53页
     ·植物材料第53页
     ·菌株及载体第53页
     ·酶、试剂与试剂盒第53页
     ·引物合成及测序第53页
   ·实验方法第53-61页
     ·rd29A 和 CaM355 启动子驱动基因的植物表达载体的构建及筛选第53-55页
     ·农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备及转化第55页
     ·叶盘转化法转化烟草第55-56页
     ·农杆菌侵染法转化棉花第56-58页
     ·基因枪轰击法转化棉花第58-59页
     ·转基因植株的筛选检测第59-60页
     ·转基因烟草的逆境生理指标检测第60-61页
   ·实验结果第61-67页
     ·植物表达载体的构建、筛选及转化农杆菌第61-62页
     ·叶盘转化法转化烟草第62-63页
     ·农杆菌介导法转化棉花第63-64页
     ·基因枪轰击法转化棉花第64-65页
     ·转基因烟草的分子检测第65-66页
     ·转基因烟草耐旱性检测第66-67页
   ·讨论第67-69页
第五章 创新点第69-70页
第六章 结论及研究展望第70-71页
   ·全文结论第70页
   ·研究展望第70-71页
参考文献第71-76页
致谢第76-77页
作者简 历第77页

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