| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 1 绪论 | 第13-23页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·植物过氧化物酶的研究进展 | 第13-18页 |
| ·POD分子结构特点 | 第14-15页 |
| ·POD的生理功能 | 第15-16页 |
| ·过氧化物酶的基因工程 | 第16-18页 |
| ·逆境胁迫与活性氧的关系 | 第18-19页 |
| ·干旱和盐胁迫与活性氧 | 第18页 |
| ·高温胁迫与活性氧 | 第18-19页 |
| ·强光胁迫与活性氧 | 第19页 |
| ·杨树基因工程研究现状 | 第19-21页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第21页 |
| ·本项研究的内容和技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究的内容 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 2 柽柳ThPOD的序列分析及转录表达特性研究 | 第23-37页 |
| ·材料和方法 | 第23-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·酶和试剂 | 第23页 |
| ·ThPOD基因序列的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| ·Real-time PCR检测ThPOD基因的转录表达特性 | 第24-26页 |
| ·结果 | 第26-35页 |
| ·ThPOD的生物信息学分析 | 第26-31页 |
| ·ThPOD在逆境胁迫下转录表达的特性分析 | 第31-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 3 ThPOD在E.coli中的表达、纯化与特性分析 | 第37-48页 |
| ·材料与方法 | 第37-41页 |
| ·菌株和质粒 | 第37页 |
| ·酶和试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·ThPOD的PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·ThPOD表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·ThPOD重组蛋白的诱导表达 | 第39页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第39页 |
| ·包涵体中重组蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·pET28a-ThPOD重组质粒的获得 | 第41-42页 |
| ·pET28a-ThPOD的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·pET28a-ThPOD的可溶性分析及纯化 | 第43-44页 |
| ·Western blot对目的融合蛋白的检测 | 第44页 |
| ·ThPOD在柽柳不同组织中的表达 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第45-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 4 ThPOD基因不同功能区的原核表达及抗逆性分析 | 第48-57页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第48页 |
| ·ThPOD全长cDNA及不同删减子原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白的诱导 | 第49页 |
| ·重组蛋白的Western blot检测 | 第49页 |
| ·重组大肠杆菌抗逆性分析 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-54页 |
| ·ThPOD基因不同功能区的原核表达 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白的Western blotting分析 | 第51-52页 |
| ·盐和干旱条件下重组菌株生长分析 | 第52-53页 |
| ·存活率法分析重组蛋白的抗逆功能 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-57页 |
| 5 柽柳ThPOD在山新杨中的遗传转化及抗逆性分析 | 第57-74页 |
| ·材料与方法 | 第57-64页 |
| ·植物材料 | 第57页 |
| ·菌株和质粒 | 第57-58页 |
| ·酶和山新杨转化主要试剂 | 第58页 |
| ·分子杂交检测主要试剂 | 第58页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第58页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化及鉴定 | 第58-59页 |
| ·根癌农杆菌介导的山新杨遗传转化 | 第59-60页 |
| ·转基因山新杨植株的分子鉴定 | 第60-63页 |
| ·转基因山新杨植株的耐盐及抗氧化胁迫分析 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-72页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第64-65页 |
| ·pROK Ⅱ—ThPOD植物表达载体转化农杆菌 | 第65页 |
| ·农杆菌介导的山新杨叶片遗传转化 | 第65页 |
| ·转ThPOD基因山新杨的PCR检测 | 第65-66页 |
| ·转ThPOD基因山新杨的Southern斑点杂交 | 第66-67页 |
| ·转ThPOD山新杨Southern blot检测 | 第67-68页 |
| ·转ThPOD山新杨Northern blot检测 | 第68页 |
| ·转ThPOD山新杨抗逆性分析 | 第68-72页 |
| ·讨论 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-90页 |
| 附录 | 第90-94页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
